香薰中藥消毒液對(duì)病房常見菌的抑制作用研究

梁玉玲 戴衛(wèi)波 陸丹倩

香薰中藥消毒液對(duì)病房常見菌的抑制作用研究

梁玉玲 戴衛(wèi)波 陸丹倩

目的觀察香薰中藥消毒液對(duì)病房常見菌的抑制作用。方法用K-B紙片擴(kuò)散法觀察香薰中藥消毒液對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎鏈球菌及肺炎克雷伯菌等病房常見菌的抑制作用。觀察香薰中藥消毒液對(duì)病房消毒后1 h和通風(fēng)后1 h的消毒效果。結(jié)果香薰中藥消毒液對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌有較好的抑制作用, 尤其對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最為敏感。用于病房消毒, 在消毒1 h后及通風(fēng)1 h后仍保持較好的消毒效果, 殺菌率均達(dá)75%以上, 并且消毒效果與0.5%過氧乙酸相當(dāng)。結(jié)論香薰中藥消毒液對(duì)病房常見菌有較好的抑制作用, 并且氣味芳香, 值得推廣。

香薰中藥消毒劑；病房；消毒

對(duì)病房空氣消毒是凈化病房空氣、控制和減少醫(yī)院感染的重要措施之一。目前, 常用的有過氧乙酸、過氧化氫、甲醛噴灑等化學(xué)消毒劑消毒法和紫外線照射消毒法, 只能在無人條件下使用, 且消毒后病房氣味難聞且有刺激性。在我國東晉時(shí)期葛洪著《肘后備急方》中就有記載用艾燃燒灸患者病床四角防治瘟疫傳染, 這是我國早期的應(yīng)用中藥進(jìn)行空氣消毒的記載[1,2]。本研究采用氣味芳香中藥組方, 提取總揮發(fā)油制成香薰消毒液, 觀察對(duì)病房常見菌的抑制作用, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 薰衣草、蒼術(shù)、桂枝等藥材由中山市中醫(yī)院中藥房提供, 經(jīng)中山市中醫(yī)院曾聰彥主任中藥師鑒定為正品。

1.2 菌株 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )ATCC-25923、銅綠假單胞菌(Escherichia coli)ATCC27853、大腸桿菌(Escherichia coli)ATCC25922、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae) ATCC49619、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae) ATCC35659, 標(biāo)準(zhǔn)菌株均為衛(wèi)生部(現(xiàn)衛(wèi)計(jì)委)臨床檢驗(yàn)中心提供, 實(shí)驗(yàn)操作是在中山市中醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室中完成。

1.3 試劑與儀器 MH瓊脂培養(yǎng)基(江門市凱林貿(mào)易有限公司)；空白藥敏試紙(OXOID)；吐溫-80(廣州化學(xué)試劑廠)；LRH-250A生化培養(yǎng)箱(廣東省醫(yī)療器械廠) ；XSW-CJ-2A標(biāo)準(zhǔn)型凈化工作臺(tái)(吳江市津化設(shè)備總廠)； LMQR-4060型立式滅菌器(山東新華醫(yī)療器械股份有限公司)； DL-ZD1濁度儀(珠海迪爾生物工程有限公司) ；WH-203超聲霧化器 (廣東粵華醫(yī)療器械廠有限公司)。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 香薰中藥消毒液的制備 稱取400 g藥材, 混合打成粗粉, 葉類藥材剪碎, 加入圓底燒瓶, 按固液比1:6加入蒸餾水, 冷浸2 h, 按水蒸氣蒸餾法收集揮發(fā)油。用1%吐溫-80無菌液稀釋, 配成100%、75%、50%、25%濃度香薰中藥消毒液。

1.4.2 菌懸液的配制 金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌5種試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)菌經(jīng)平板分離培養(yǎng)24 h后, 用無菌接種環(huán)挑取數(shù)個(gè)菌落置于生理鹽水稀釋液中, 用濁度儀校正濃度至0.5麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)液。

1.4.3 香薰中藥消毒液抑菌活性試驗(yàn)[3,4]用微量移液器吸取30 μl各濃度香薰中藥消毒液均勻涂布于無菌空白藥敏紙片, 兩面各15 μl。紙片吸透藥液后貼于菌平板上, 做好標(biāo)記,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。以平板中貼浸30 μl有1%吐溫-80無菌水液的紙片為空白對(duì)照。用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果取平均值。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：不敏感(≤6 mm, -), 低度敏感(≤7 mm, +),中度敏感(＞7 mm, ++), 高度敏感(≥15 mm, +++)。

抑菌率(%)=[(藥液抑菌圈平均直徑—空白紙片直徑)/空白紙片直徑]×100%。

1.4.4 病房消毒試驗(yàn)[4]選取本院格局相同的病房20間,用濃度1 g/ml香薰中藥消毒液進(jìn)行噴霧消毒, 霧化量為0.7 g/m3,以0.5%過氧乙酸對(duì)照, 霧化劑量為2 ml/m3, 各隨機(jī)消毒10間, 消毒后關(guān)閉門窗60 min。采用自然菌沉降法監(jiān)測(cè)每間病房消毒前30 min、消毒后1 h及通風(fēng)后1 h空氣中細(xì)菌數(shù)量。分別在病房四角近墻1 m處和中間位置各放置一平皿, 開蓋30 min。37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h, 肉眼觀察并計(jì)數(shù)菌落數(shù)和殺菌率[1]。

空氣菌落總數(shù)＝50000 N/A T (cfu/ m3),

式中A為平皿面積(cm2), T 為平皿暴露時(shí)間(min), N 為平皿平均菌落數(shù)(cfu/平皿)。

殺菌率=(消毒前平均菌落數(shù)-消毒后平均菌落數(shù))/消毒前平均菌落數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 通過SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 香薰中藥消毒液抑菌活性試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示香薰中藥消毒液對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌有較好的抑制作用, 尤其對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最為敏感,25%的濃度下抑制率仍達(dá)100%以上。對(duì)糞腸球菌和肺炎鏈球菌沒有抑制作用。見表1。見圖1-6。

2.2 病房消毒試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示香薰中藥消毒液與0.5%過氧乙酸對(duì)病房均具有良好的消毒效果(P＜0.01), 消毒后1 h和通風(fēng)后1 h兩者消毒效果均能保持, 兩消毒劑消毒效果相當(dāng)。見表2。

表1 香薰中藥消毒液對(duì)供試菌的抑菌圈直徑(±s, n=3)

表1 香薰中藥消毒液對(duì)供試菌的抑菌圈直徑(±s, n=3)

注：-表示沒有抑制作用

抑菌圈(mm)金黃色葡萄球菌 23.84±1.97 281.44 20.41±1.42 226.56 18.36±1.27 193.76 14.82±0.64 137.12 - 圖1大腸桿菌 20.70±0.29 231.20 18.43±1.33 194.88 16.38±0.29 162.08 13.96±0.65 123.36 - 圖2糞腸球菌 - - - - - - - - - 圖3銅綠假單胞菌 11.57±0.37 85.12 8.31±0.26 32.96 7.59±0.61 21.44 7.63±1.01 22.08 - 圖4肺炎鏈球菌 - - - - - - - - - 圖5肺炎克雷伯菌 17.43±0.38 178.88 14.23±0.62 127.68 13.89±0.66 122.24 9.65±0.20 54.40 - 圖6菌種100%香薰消毒液 75%香薰消毒液 50%香薰消毒液 25%香薰消毒液 空白紙片抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)抑菌圈(mm)抑菌率(%)

表2 不同消毒劑消毒效果的比較(±s, %, n=10)

表2 不同消毒劑消毒效果的比較(±s, %, n=10)

注：與同組消毒前比較,aP＜0.01

類別 菌落數(shù)/(cfu/m3) 殺菌率消毒前30 min 消毒后1 h 通風(fēng)后1 h 消毒后1 h 通風(fēng)后1 h香薰中藥消毒液 658±74 142±21a 164±35a 78.42 75.08 0.5%過氧乙酸 664±83 131±15a 148±26a 80.27 77.71

圖1 金黃色葡萄球菌

圖2 大腸桿菌

圖3 糞腸球菌

圖4 銅綠假單胞菌

圖5 肺炎鏈球菌

圖6 肺炎克雷伯菌

3 小結(jié)

本香薰消毒液是由薰衣草、蒼術(shù)、桂枝等揮發(fā)油按一定配比組成, 具有氣味芳香, 又能鎮(zhèn)靜、放松心情的效果。本研究顯示香薰中藥消毒液對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌有較好的抑制作用, 尤其對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最為敏感。并用于病房消毒, 在消毒1 h后及通風(fēng)1 h后仍保持較好的消毒效果, 殺菌率均達(dá)75%以上, 并且消毒效果與0.5%過氧乙酸相當(dāng)。對(duì)本香薰消毒液進(jìn)行急性吸入毒性實(shí)驗(yàn)研究, 發(fā)現(xiàn)小鼠在20600 mg/m3吸入劑量下未見異常[5], 按照標(biāo)準(zhǔn)屬于實(shí)際無毒。本香薰消毒液制備工藝簡(jiǎn)單, 消毒效果良好, 并能避免傳統(tǒng)化學(xué)消毒劑的刺激性, 其芳香氣味還能對(duì)患者及家屬心情有較好的緩解作用, 值得推廣。

[1]戴衛(wèi)波, 梅全喜.葛洪《肘后備急方》中艾葉治療疾病的機(jī)理探討.中國民間療法,2014,22(7):5-8.

[2]戴衛(wèi)波, 梅全喜, 金世明.論葛洪《肘后備急方》對(duì)熏洗療法的貢獻(xiàn).時(shí)珍國醫(yī)國藥,2013,24(10):2478-2480.

[3]彭偉文, 王英晶, 陸丹倩, 等.黑面神莖、葉不同提取物抑菌作用對(duì)比研究.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2014,34(11):869-872.

[4]唐裕芳, 張妙玲, 陶能國, 等.蒼術(shù)揮發(fā)油的提取及其抑菌活性研究.西北植物學(xué)報(bào),2008,28(3):588-594.

[5]梁玉玲.香薰中藥消毒劑對(duì)病房消毒的實(shí)驗(yàn)研究.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2015,13(1):138-140.

Research of inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward

LIANG Yu-ling, DAI Wei-bo, LU Dan-qian. Guangdong Zhongshan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Zhongshan528401, China

ObjectiveTo observe inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward.MethodsK-B disk diffusion method was applied to observe inhibition effect by aroma Chinese herb disinfectant for common bacteria in ward, such as staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli, streptococcus pneumonia, and klebsiella pneumonia. Disinfection effects of aroma Chinese herb disinfectant in1 h after ward disinfection and ventilation were observed.ResultsAroma Chinese herb disinfectant provided good inhibition effects for staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli, and klebsiella pneumonia, and it is especially sensitive to staphylococcus aureus and escherichia coli. It also can maintain good disinfection effect in1 h after ward disinfection and ventilation, with sterilizing rates all above75%. Its disinfection effect is similar to that of 0.5% peroxyacetic acid.ConclusionAroma Chinese herb disinfectant can provide good inhibition effect for common bacteria in ward, with fragrant smell. It is worth promoting.

Aroma Chinese herb disinfectant; Ward; Disinfection

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.192

2015-04-01]

廣東省中山市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科研立項(xiàng)(項(xiàng)目編號(hào)：J2012070)

528401 廣東省中山市中醫(yī)院