氯波必利生物黏附型緩釋片對實驗性胃潰瘍和胃腸動力障礙的作用研究Δ

曾春蓮，徐雄波，張青松，劉 鷹，劉衛平，馬 寧#（.長沙醫學院藥學院，長沙 4029；2.湖南正清制藥集團股份有限公司，湖南懷化 48005；.湖南九典制藥有限公司，湖南瀏陽 40）

氯波必利（CBP）是一種全胃腸動力藥，于1979 年首次在西班牙上市，在我國上市也有十余年[1]。其化學名為N-（1-芐基-4-哌啶基）-4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺蘋果酸鹽，是一種高選擇性苯甲酰胺類多巴胺受體拮抗藥，可加強并協調胃腸運動[2]，屬于國家二類藥物[3]，臨床上用于胃食管反流、功能性消化不良、胃輕癱和惡心嘔吐的對癥治療[4]。生物黏附型緩釋片不僅能延長藥物在胃腸道的滯留時間，還能增加藥物與吸收黏膜的接觸，改變細胞膜的流動性，增加藥物對小腸上皮細胞的穿透力，因而可以促進藥物的吸收、提高其生物利用度[5]。本課題組在前期研究中已完成CBP生物黏附型緩釋片的制備等工作[6]，本研究旨在此基礎上進一步觀察其藥效學作用。

1 材料

1.1 儀器

722 型紫外-可見分光光度計（天津市津維電子儀表有限公司）；TDL-60B型離心機（上海安亭科學儀器廠）。

1.2 藥品與試劑

CBP 生物黏附型緩釋片（長沙醫學院藥學院自制，批號：20140210，規格：每片0.34 mg）；CBP 片（湖南炎帝生物工程有限公司，批號：120801，規格：每片0.68 mg）；阿托品注射液（天津藥業集團新鄭股份有限公司，批號：0207051，規格：1 ml ∶0.5 mg）；阿司匹林片（沈陽奧吉娜藥業有限公司，批號：H20065051，規格：每片100 mg）；無水乙醇（北京恒業中遠化工有限公司，批號：10035）。

1.3 動物

2 方法

2.1 溶液的制備[7]

取苯酚紅15 mg 加蒸餾水至75 ml，再加5 g 淀粉，臨用時加熱成糊狀，即為20%酚紅糊劑。取NaOH 20 g 加蒸餾水至1 000 ml，即為0.5 mol/L NaOH溶液。

2.2 模型的復制

2.2.1 胃潰瘍模型 參考文獻[8]，采用乙醇+阿司匹林法復制胃潰瘍模型。取大鼠48只，每次給藥前禁食不禁水12 h，首日給藥前先ig無水乙醇200 g/ml，1 h后再ig阿司匹林200 mg/kg，之后每日ig 阿司匹林200 mg/kg 1 次，連續給藥4 d，復制胃潰瘍模型。末次給藥后禁食24 h，立即取樣2 只大鼠處死，沿胃大彎側剪開鼠胃，用生理鹽水沖洗干凈胃黏膜后，用游標卡尺測定潰瘍或糜爛的長徑及短徑，潰瘍多為圓形或橢圓形，計算潰瘍面積＝π×長徑×短徑/4[9]，潰瘍愈合率（%）＝（模型組潰瘍面積－給藥組潰瘍面積）/模型組潰瘍面積×100%。

2.2.2 胃腸動力障礙模型 參考文獻[10]，取小鼠ip 阿托品1 mg/kg 1次復制胃腸動力障礙模型。

2.3 分組、給藥與檢測

2.3.1 胃潰瘍模型 取胃潰瘍模型復制成功的大鼠，隨機分為模型（生理鹽水）組、普通片（CBP 片0.072 mg/kg）組和緩釋片高、低劑量（CBP 生物黏附型緩釋片0.072、0.036 mg/kg）組，每組12 只；另取6 只正常大鼠為正常對照（生理鹽水）組。除緩釋片高、低劑量組大鼠每日ig 藥物2 次外，其余各組大鼠每日ig藥物3次。給藥第2、4天后解剖大鼠觀察潰瘍面積，計算潰瘍愈合率。

2.3.2 胃腸動力障礙模型 取胃腸動力障礙模型小鼠分為模型（生理鹽水）組、普通片（CBP 片0.1 mg/kg）組和緩釋片高、中、低劑量（CBP生物黏附型緩釋片0.1、0.05、0.025 mg/kg）組，另取正常小鼠為正常對照（生理鹽水）組，每組6 只，每日ig藥物1次，連續3 d。于末次給藥前禁食不禁水24 h，末次給藥20 min 后ig 20%酚紅糊劑0.5 ml，間隔20 min 后處死小鼠，分離胃和小腸[10]。將小腸平鋪于白紙上；將胃置于30 ml NaOH 溶液（0.5 mol/L）中，沿胃大彎剪開胃，充分洗下胃內容物，取5 ml于離心半徑9.5 cm、3 000 r/min 離心10 min，取上清液用紫外-可見分光光度計于560 nm波長處測定吸光度。以酚紅在小腸中的移行距離/小腸全長×100%計算小腸推進率來評價小腸推進速度；以相同濃度的酚紅溶液為標準對照[11]，計算胃排空率（%）＝（1－試驗組吸光度/標準對照吸光度）×100%。

2.4 統計學方法

3 結果

3.1 對大鼠潰瘍模型的影響

與正常對照組比較，模型組大鼠可見胃竇前壁形成了近似圓形的深大潰瘍，潰瘍直徑約為0.3～0.7 cm，底部平坦，邊界清楚，胃竇壁厚度變薄，胃黏膜皺襞變淺或消失。與模型組比較，普通片組和緩釋片高、低劑量組大鼠胃竇壁結構均有所恢復，潰瘍面積減小，差異有統計學意義（P＜0.01）。各組大鼠胃潰瘍照片見圖1，潰瘍面積和潰瘍愈合率的測定結果見表1。由表1 結果可知，CBP 生物黏附型緩釋片高、低劑量均能縮小大鼠實驗性胃潰瘍的潰瘍面積和提高潰瘍愈合率，給藥4 d的潰瘍愈合率均達到70%以上。

圖1 各組大鼠胃潰瘍照片Fig 1 Photographs of gastric ulcer in each group of rats

3.2 對小鼠胃腸動力障礙模型的影響

表1 各組大鼠胃潰瘍面積和潰瘍愈合率的測定結果（，n＝6）Tab 1 The results of gastric ulcer area and ulcer healing rate in each group of rats（，n＝6）

表1 各組大鼠胃潰瘍面積和潰瘍愈合率的測定結果（，n＝6）Tab 1 The results of gastric ulcer area and ulcer healing rate in each group of rats（，n＝6）

注：與正常對照組比較，＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.01Note：vs.normal control group，＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.01

與正常對照組比較，模型組小鼠胃排空率和小腸推進率降低；與模型組比較，普通片組和緩釋片高、中、低劑量組小鼠胃排空率和小腸推進率升高，緩釋片高、中劑量組作用效果強于普通片組，以上差異均有統計學意義（P＜0.01 或P＜0.05）。各組小鼠胃排空率和小腸推進率的測定結果見表2。

表2 各組小鼠胃排空率和小腸推進率的測定結果（，n＝6）Tab 2 The results of rate of gastric emptying and small intestinal propulsion in each group of mice（，n＝6）

表2 各組小鼠胃排空率和小腸推進率的測定結果（，n＝6）Tab 2 The results of rate of gastric emptying and small intestinal propulsion in each group of mice（，n＝6）

注：與正常對照組比較，＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.01；與普通片組比較，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01Note：vs.normal control group，＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.01；vs.common tablet group，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01

3 討論

消化性潰瘍是由于胃黏膜損害因素和胃黏膜保護因素之間失去平衡所致，當損傷因素增強或保護因素減弱時，就可出現潰瘍。胃壁己糖胺是一種胃黏膜損傷因子，CBP 能有效地抑制胃壁己糖胺的形成，因而對胃黏膜具有保護、修復作用，可治療消化性潰瘍。胃腸動力障礙性疾病主要病理生理基礎為小腸功能障礙和胃排空延遲[12]。國外研究證實神經遞質乙酰膽堿在消化道產生興奮性活動，可促進胃腸道平滑肌收縮[13]。阿托品作為非選擇性M 膽堿受體阻滯藥，可通過抑制乙酰膽堿作用使胃腸道的平滑肌興奮性下降[14]，進而抑制胃腸蠕動，緩解胃腸平滑肌痙攣，故本實驗采用ip 阿托品復制胃腸動力障礙模型。一定時間內胃排空率及小腸推進率是反映胃及小腸蠕動程度的直觀指標[15]。

胃潰瘍實驗藥效學結果顯示，在給藥2、4 d 后，CBP 普通片與生物黏附型緩釋片均能縮小潰瘍面積、提高潰瘍抑制率，與模型對照組比差異有統計學意義（P＜0.01），說明CBP對胃潰瘍有良好的改善作用。緩釋片高劑量組與普通片組相比潰瘍面積差異無統計學意義，但緩釋片高劑量組減少了給藥次數、低劑量組減少給藥次數且藥量減半后，對胃潰瘍亦起到了良好的改善作用，潰瘍抑制率均達到70%以上。這表明在一定程度上CBP生物黏附型緩釋片對胃潰瘍的改善作用優于普通片。生物黏附型緩釋片在胃腸道具有較強的黏附作用，不僅能延長藥物制劑在胃腸道的滯留時間，還能增加藥物與吸收黏膜的接觸，改變細胞膜的流動性，增加藥物對小腸上皮細胞的穿透力，促進藥物的吸收。

胃腸動力障礙實驗藥效學結果顯示，與模型組相比，普通片組和緩釋片高、中、低劑量組均可提高模型小鼠胃排空率及小腸推進率（P＜0.01）。其中緩釋片高、中劑量組較普通片組效果更顯著（P＜0.01 或P＜0.05），提示CBP 生物黏附型緩釋片減少給藥量對小鼠胃排空及小腸推進亦有良好的改善效果，提高了生物利用度，降低了副作用。這說明CBP生物黏附型緩釋片對模型小鼠胃排空及小腸推進的效果較CBP 片更好，可能更適用于胃腸動力障礙的治療。

[1]王玉華，楊寶峰，徐蓮琴.氯波必利致錐體外系反應2 例及其相關文獻分析[J].中國醫院藥學雜志，2014，34（1）：80.

[2]羅娟娟，馬紅燕，馬瑩，等.恒波長同步熒光光譜法測定人體尿液中氯波必利的研究[J].分析測試學報，2011，30（5）：553.

[3]丁瀟瀟，李成平，單偉光.高效液相色譜測定氯波必利片劑含量及其有關物質[J].藥物分析雜志，2009，29（6）：947.

[4]賈紅生.氯波必利的臨床應用及不良反應[J].社區醫學雜志，2009，7（9）：41.

[5]張畢奎，蘇芬麗，向大雄，等.格列齊特生物黏附型緩釋片的研制及其體內體外評價[J].中國藥學雜志，2007，42（12）：910.

[6]羅映紅，歐志立，徐雄波，等.氯波必利生物黏附緩釋片的處方篩選[J].中國藥房，2014，25（21）：1 964.

[7]沈欣，李德鳳，宗桂珍.越鞠保和膠囊胃腸動力藥效研究[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（14）：243.

[8]陳志峰.探索理想的大鼠慢性胃潰瘍模型的建立方法[D].汕頭：汕頭大學，2012.

[9]王雨波.胃樂制劑1 抗實驗性胃潰瘍的主要藥效學研究[D].遵義：遵義醫學院，2010.

[10]聶子文，郭建生，陳君.烏藥不同提取部位對小腸推進、胃排空的影響[J].中藥藥理與臨床，2011，27（2）：93.

[11]郭金秀，劉孟安，王慧凱.中藥胃腸舒片對胃腸動力障礙小鼠胃排空及小腸推進影響的實驗研究[J].遼寧中醫雜志，2010，37（4）：751.

[12]曹曙光，吳萬春.應激與小腸運動的研究進展[J].世界華人消化雜志，2003，11（12）：2 005.

[13]Hirschowitz BI，Kmling D，Lewin M，et al.Phamacological a spects of diseases of the urinary tract[J].Eur J Med Chem，1995（30）：269.

[14]李瑞，殷明.藥理學[M].北京：人民衛生出版社，2003：77.

[15]馬珍珍，曹飛，郝少君.健胃消食片對阿托品致腸蠕動降低模型小鼠腸蠕動的影響[J].中醫學報，2012，27（167）：446.