老年人梅毒抗體測(cè)定產(chǎn)生假陽性的原因分析

高述芳,徐 紅

(山東省昌邑市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 261300)

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·臨床研究·

老年人梅毒抗體測(cè)定產(chǎn)生假陽性的原因分析

高述芳,徐 紅

(山東省昌邑市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 261300)

目的 探討應(yīng)用梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)檢測(cè)老年人梅毒特異性抗體容易產(chǎn)生假陽性的原因。方法 采用TP-ELISA分別對(duì)976例老年患者及3 004例其他年齡段患者血清中梅毒特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陽性者再用梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)進(jìn)行確診。結(jié)果 TP-ELISA檢測(cè)老年組梅毒抗體假陽性率明顯高于其他年齡組，二者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 患者的年齡與患者本身所患的疾病是造成TP-ELISA檢測(cè)梅毒抗體易發(fā)生假陽性的重要因素之一。

梅毒； 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)； 梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)； 假陽性； 老年人

梅毒的病原體為梅毒螺旋體(TP)，因其透明不易染色，又稱為蒼白螺旋體[1]。梅毒有較強(qiáng)的傳染性和復(fù)雜的病程，性接觸是梅毒的主要傳播途徑，占95%以上，此外還可通過垂直傳播、輸血和注射藥品、吸毒等方式傳播。臨床表現(xiàn)多樣，病情病程復(fù)雜，發(fā)病率在我國(guó)呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，現(xiàn)在已成為重要的臨床醫(yī)學(xué)問題。梅毒的診斷依賴病史、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查。實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目包括血清學(xué)檢測(cè)、直接查梅毒螺旋體(暗視野顯微鏡、直接熒光抗體法)和梅毒螺旋體核酸測(cè)定。其中梅毒的血清學(xué)檢測(cè)是傳統(tǒng)的也是目前二級(jí)以上醫(yī)院檢驗(yàn)科常規(guī)開展的項(xiàng)目，檢測(cè)梅毒螺旋體感染的血清學(xué)方法主要是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)[2]，因其價(jià)格低廉，操作方便，靈敏度高，特異性強(qiáng)而被廣泛使用。此外梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)也是實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢測(cè)梅毒螺旋體的主要方法，此方法通過檢測(cè)患者血清中有無抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體對(duì)患者進(jìn)行確診，TPPA已經(jīng)確定為美國(guó)疾病預(yù)防控制中心確診梅毒的標(biāo)準(zhǔn)方法[3]。

在免疫室的長(zhǎng)期工作中，作者發(fā)現(xiàn)在用ELSIA對(duì)門診及大多數(shù)住院患者的梅毒抗體的檢測(cè)中，老年患者特別是七十歲左右的老年患者梅毒抗體的假陽性率高[4]。就此問題本研究對(duì)本院2013年3～12月的門診與住院的3 980例患者進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測(cè)，探討應(yīng)用梅毒ELISA(TP-ELISA)檢測(cè)老年人梅毒特異性抗體容易產(chǎn)生假陽性的原因。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 2013年3～12月本院的門診及住院患者共3 980例。其中老年組976例，年齡65～88歲，平均73歲；其他年齡組3 004例，年齡19～56歲，平均36歲。

1.2 檢測(cè)儀器 瑞士產(chǎn)全自動(dòng)酶標(biāo)免疫檢測(cè)儀和全自動(dòng)洗板一體機(jī)。

1.3 檢測(cè)試劑 本試驗(yàn)用TP-ELISA試劑由北京萬泰生物藥業(yè)公司提供；TPPA試劑由日本東京富士株式會(huì)社提供。上述試劑均為合格產(chǎn)品，且均在規(guī)定的有效期內(nèi)使用。

1.4 方法 清晨空腹采集靜脈血3 mL，根據(jù)年齡信息將患者分為老年組和其他年齡組，先用TP-ELISA對(duì)兩組患者的血清進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陽性者，再用TPPA試進(jìn)行確證。試驗(yàn)操作及結(jié)果判定嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒的說明書規(guī)定進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

結(jié)果顯示用TP-ELISA檢測(cè)老年組患者血清出現(xiàn)陽性38例，用TPPA檢測(cè)同組血清出現(xiàn)陽性4例，以TPPA陽性為標(biāo)準(zhǔn) TP-ELISA檢測(cè)存在34例假陽性，假陽性率為3.48%(34/976)；用TP-ELISA檢測(cè)其他年齡組患者血清出現(xiàn)陽性76例，用TPPA檢測(cè)同組血清出現(xiàn)陽性57例，以TPPA陽性為標(biāo)準(zhǔn)，TP-ELISA檢測(cè)存在19例假陽性，假陽性率為0.63%(19/3 004)，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.43，P<0.01)，TP-ELISA檢測(cè)老年組梅毒特異性抗體假陽性率3.48%明顯高于其他年齡組，結(jié)果見表1。

表1 兩組間檢測(cè)結(jié)果比較

3 討 論

梅毒螺旋體是梅毒的病原體。在本次試驗(yàn)中，老年組梅毒患者假陽性率明顯高于其他年齡組，這種現(xiàn)象值得引起高度的重視。TP-ELISA篩查梅毒血清學(xué)試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性的原因可能有以下幾點(diǎn)。

3.1 年齡因素 吳建國(guó)[4]研究發(fā)現(xiàn)老年人生理功能逐步退化，在此年齡段容易出現(xiàn)免疫功能上的異常，產(chǎn)生一些針對(duì)鏈接用的清蛋白抗體或一些異常蛋白質(zhì)而干擾了檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性。TP-ELISA試劑盒主要選用具有較好的免疫活性的梅毒感染后產(chǎn)生的梅毒螺旋體外膜脂蛋白的分子抗原和人血清清蛋白與之鏈接[5]，合成的多肽直接作為試劑抗原使用，由于抗原不提純和使用人血清清蛋白，增加了意外假抗原位點(diǎn)的可能性。老年患者易出現(xiàn)免疫功能低下，會(huì)產(chǎn)生針對(duì)鏈接用的清蛋白抗體或者是一些異常蛋白質(zhì)，從而干擾了梅毒抗體的ELISA檢測(cè)[6]。

3.2 疾病因素 在感染梅毒后，患者體內(nèi)除了會(huì)產(chǎn)生針對(duì)梅毒的梅毒螺旋體抗體，還會(huì)產(chǎn)生一類針對(duì)類脂質(zhì)的抗體，此類抗體無特異性。除感染梅毒外，患者生理狀況發(fā)生改變或者感染另外一些疾病，人體內(nèi)也可能產(chǎn)生此類抗體，血清學(xué)檢測(cè)梅毒實(shí)際上是檢測(cè)的這兩類抗體。凡能導(dǎo)致產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體的疾病，均能導(dǎo)致假陽性產(chǎn)生。李亞[7]研究發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)異常和年齡因素是造成TP-ELISA檢測(cè)梅毒抗體易發(fā)生假陽性的原因。心血管疾病的患者大都存在血脂異常，體內(nèi)大部分都存在抗類脂抗體，而老年人是心血管疾病的高發(fā)人群，均是造成假陽性的主要因素。

3.3 技術(shù)性因素 梅毒血清假陽性反應(yīng)除了生物學(xué)假陽性，還存在技術(shù)性假陽性的現(xiàn)象。技術(shù)性假陽性主要是由于標(biāo)本保存不當(dāng)、檢測(cè)儀器出現(xiàn)偏差、實(shí)驗(yàn)員實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范等多種原因所造成的，一般技術(shù)性假陽性可以通過重復(fù)試驗(yàn)進(jìn)行排除[8]。本試驗(yàn)兩組血清標(biāo)本均是在相同試驗(yàn)條件下同時(shí)進(jìn)行，故此因素對(duì)結(jié)果影響不大。

3.4 其他因素 某些患者體內(nèi)可能有其他螺旋體共生，這些螺旋體的存在會(huì)誘導(dǎo)產(chǎn)生抗屬、群或科特異抗原的交叉反應(yīng)抗體，從而造成某些結(jié)果呈假陽性。此外某些生理狀況的改變，如妊娠，也可導(dǎo)致TP-ELISA假陽性[9]。本試驗(yàn)中，TP-ELISA篩查梅毒血清學(xué)試驗(yàn)，老年組假陽性率(3.48%)高于其他年齡組(0.63%)，與上述的年齡因素和疾病因素關(guān)系密切，是造成該結(jié)果的主要因素，其他因素對(duì)該結(jié)果影響不大。

由此也可以看出，血清學(xué)檢查是診斷梅毒的重要依據(jù)，但并不能作為確診的依據(jù)。對(duì)于那些TP-ELISA梅毒螺旋體檢測(cè)陽性而無臨床癥狀的患者，尤其是老年患者，應(yīng)做TPPA或者其他確證試驗(yàn)[7]，排除假陽性，做出正確的診斷。所以診斷梅毒，除依據(jù)檢測(cè)結(jié)果外，更重要的是要詳細(xì)了解患者的臨床表現(xiàn)和既往病史，各種因素綜合分析后慎重做出診斷。遇到可能的陽性標(biāo)本時(shí)，臨床醫(yī)師應(yīng)結(jié)合臨床綜合分析，詳細(xì)詢問患者有無性病史、流產(chǎn)史、抗梅毒治療史，認(rèn)真查體，注意患者是否有梅毒體征，是否為老年人等。所以建議TP-ELISA陽性患者，尤其是老年患者需要檢測(cè)TPPA進(jìn)行確診，減少誤診，避免產(chǎn)生醫(yī)患糾紛等問題。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.02.045

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