液基細胞學與高危型HPV-DNA聯合檢測在宮頸病變篩查中的意義

喻 垚，郭變琴，羅光麗，賴年鈺(重慶市腫瘤研究所檢驗科 400030)

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液基細胞學與高危型HPV-DNA聯合檢測在宮頸病變篩查中的意義

喻 垚，郭變琴，羅光麗，賴年鈺△(重慶市腫瘤研究所檢驗科 400030)

目的 探討薄層液基細胞學(TCT)與高危型人乳頭狀瘤病毒(HR-HPV) DNA檢測在宮頸病變篩查中的臨床意義。方法 2012年1月至2014年1月該院就診的宮頸病變患者1 343例，其中臨床已病理確診的宮頸癌386例，宮頸炎555例，CINⅠ269例，CINⅡ/Ⅲ 133例，對所有患者均采用TCT法檢測細胞病變，同時使用第2代雜交捕獲法(HC2)檢測高危型HPV-DNA的陽性表達率，并比較2種方法的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值。結果 高危型HPV-DNA在宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和宮頸癌中的陽性率分別為26.5%、48.7%、54.9%、72.0%，4組患者之間比較，差異有統計學意義(P<0.01);TCT與高危型HPV-DNA聯合檢測其敏感性為80.2%，特異性為88.5%，陽性預測值86.7%，陰性預測值81.3%，均比單獨檢測值有所增高。結論 TCT與高危型HPV-DNA聯合檢測可提高檢出率，對宮頸癌的預防和治療具有重要意義。

TCT; HPV-DNA; 宮頸病變; 宮頸癌

宮頸癌是僅次于乳腺癌的女性最常見的惡性腫瘤，其發生、發展已呈年輕化趨勢，全球有近53萬宮頸癌新發病例和27.5萬病死病例,其中約85%發生在發展中國家,宮頸癌中有95%的女性從未進行早期篩查[1]。由于地區不同，宮頸癌發病有很大差異，我國每年新增宮頸癌病例13萬以上,嚴重危害其健康與生命安全[2]。近年來大量流行病學及分子生物學研究表明,人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌及癌前病變發病的主要原因[3]。臨床及病理研究顯示，宮頸上皮內瘤變(CIN)與宮頸癌密切相關，伴有高危型HPV感染的CIN進一步可發展為宮頸癌，因此高危型HPV檢測在宮頸疾病中的診斷具有重要作用。宮頸癌是婦科腫瘤中最容易早期診斷的腫瘤，若早期發現宮頸癌前病變，可進一步控制和預防宮頸癌的發生和發展，因此早期篩查、合理干預是防治宮頸癌的重要環節。近年來，一些學者發現薄層液基細胞學(TCT)、高危型人乳頭狀瘤病毒(HR-HPV)及聯合TCT與HR-HPV在宮頸癌的臨床篩查上提高了準確性和特異性[4]。現收集該院近2年來的1 343例患者采用TCT法和第二代雜交捕獲法(HC2)檢測高危型HPV-DNA，回顧性分析兩者及聯合檢測在宮頸炎、CIN和宮頸癌的診斷與鑒別診斷中的臨床意義。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2014年1月在該院進行檢測的患者隨機抽取1 343例，其中已被病理組織學確診的宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、宮頸癌依次為555例、269例、133例、386例，平均年齡52(21～70)歲，所有患者均進行TCT、高危型HPV-DNA檢測。

1.2 方法

1.2.1 HC2-HPV-DNA檢測 將及時送檢的合格標本采用HC2進行檢測，儀器是DML2000發光分析儀，試劑是美國Digene分子診斷公司的HC2原裝試劑盒，質控合格。操作步驟依次為堿處理、雜交、捕獲、信號放大、信號檢測。可檢測HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型13種高危型HPV病毒亞型。在DML2000系統上進行結果判斷，HPV-DNA≥1.0 pg/mL,即RLU/CO比值大于1為陽性;陽性率為HPV-DNA陽性病例與所檢病例的百分比。

1.2.2 TCT檢查 將收集的合格標本及時進行檢測，TCT試劑來自武漢致誠信達科技有限公司。TCT診斷標準采用TBS分級系統，包括：正常范圍(NILM)、意義不明確的非典型鱗狀細胞(ASCUS)、鱗狀上皮內低度病變(LSIL)、鱗狀上皮內高度病變(HSIL)、鱗狀細胞癌(SCC)。

1.3 統計學處理 使用SPSS19.0 軟件進行統計分析，計數資料采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 高危型HPV-DNA在不同程度宮頸病變中的結果比較 高危型HPV-DNA在宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和宮頸癌中的陽性表達率分別為26.5%、48.7%、54.9%、72.0%，差異有統計學意義(χ2=194.46,P=0.000)，分別對各組間進行兩兩比較，宮頸炎組分別與CINⅠ組、CINⅡ/Ⅲ組、宮頸癌組，CINⅠ組與宮頸癌組，CINⅡ/Ⅲ組與宮頸癌組之間差異均有統計學差異(P<0.01)，而CINⅠ組與CINⅡ/Ⅲ組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 高危型HPV-DNA在各類宮頸疾病中的結果比較[n(%)]

2.2 TCT檢測在不同程度宮頸病變中的結果比較 將TCT 檢測結果分為:≤ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 4個組,在各宮頸病變組織即慢性炎性、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC中的分布有一定的差異。TCT檢測結果大于LSIL為陽性有706例，占52.7%，病理組織學結果大于或等于CINⅠ 為陽性者788例，占59.7%，在CINⅡ/Ⅲ和宮頸癌組織中，HSIL與SCC的比率也隨之增高。見表2。

表2 病理學診斷與TCT檢測結果比較[n(%)]

2.3 TCT與高危型HPV-DNA 檢測結果比較 對TCT各組的高危型HPV-DNA表達情況進行比較，差異有統計學意義(P<0.01)，各組間進行兩兩比較，HSIL組與SCC組之間差異無統計學意義(χ2=199.37;P=0.000)，其他各組間兩兩比較差異均有統計學意義(P<0.01)。見表3。

表3 TCT與高危型HPV-DNA檢測結果比較[n(%)]

2.4 TCT聯合高危型HPV-DNA對診斷宮頸病變的結果比較 以病理組織學診斷結果為標準，取TCT檢測結果大于或等于LSIL為陽性，對TCT檢測和高危型HPV-DNA檢測共同出現陽性者以及兩者其中一項出現陽性者均作為聯合檢測陽性判斷標準，將TCT和高危型HPV-DNA單獨檢測及兩者聯合檢測對于病理診斷結果大于或等于CINⅠ的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值進行比較，聯合檢測以上各項指標均有明顯上升。見表4。

表4 TCT和高危型HPV-DNA單獨及其聯合檢測結果比較[%(n/n)]

3 討 論

宮頸癌的發生、發展是一個從宮頸CIN、早期浸潤癌、浸潤癌的緩慢過程，癌前病變期和宮頸癌早期的治療效果較好，對宮頸CIN和早期癌的及時高效篩查和正確處理是防治宮頸癌的關鍵。目前對宮頸癌早期篩查受到很多學者的關注,細胞學檢查可使宮頸癌的發病率和病死率大幅下降，但傳統的檢測方法存在一定的缺陷，如巴氏涂片細胞學檢查假陰性率較高，易受主觀因素影響，診斷水平差異較大。TCT是由計算機控制的系統自動均勻處理樣本細胞，形成清晰易讀的單層細胞涂片，改進了傳統的巴氏染色制片的缺陷，提高制片質量，增加靈敏度，是宮頸癌及癌前病變的又一個新的重要檢測方法[5]。

HPV感染是最常見的性傳播疾病之一，大約50%的女性在開始性生活后2年內可以發現生殖道HPV感染。HPV侵襲人的皮膚和黏膜,可導致不同程度的增生性病變，根據在宮頸癌發生中的危險性不同,可將HPV分為高危型和低危型兩類。很多研究表明宮頸病變的演進與高危型HPV持續感染有明顯關系[6-7]。本組數據結果也顯示高危型HPV-DNA的感染率隨著宮頸病變的加重而增高。有研究發現HPV檢測的敏感度高于宮頸細胞學篩查，能更好地預測患宮頸癌的風險[8]。在對宮頸病變的篩查效果方面，HPV-DNA檢測尚未進行適當的評價。有學者對浙江省部分人群進行篩查分析，通過HC2檢測高危型HPV-DNA的敏感性和特異性均高于TCT檢測，若兩者結合檢測其敏感度更高[9]。目前，一些發達國家建議將TCT與HPV檢測結合作為新的宮頸癌篩查方案[10]。

本研究1 343例患者的統計數據表明，與病理組織結果對照，>CINⅠ期患者的HSIL和SCC以及HPV-DNA陽性率均較高，并且伴隨著病變程度的增高，陽性率也隨之增加。然而在HPV陰性患者中，有28%宮頸鱗癌患者，同時在小于或等于ASCUS中仍然也有少量的CINⅡ/Ⅲ,說明單獨采用TCT或HPV檢測均有一定的漏檢率。2種方法學比較，TCT具有更高的靈敏度和陽性預測值，而高危型HPV檢測具有較高的特異性和陰性預測值。2種方法聯合檢測其靈敏度、特異性、陰性預測值以及陽性預測值較單獨檢測均有不同程度的提高。

綜上所述，通過TCT和高危型HPV-DNA聯合檢測可將具有潛在患宮頸癌風險的女性從低風險女性中區分出來，提高宮頸病變診斷的準確性，降低漏診率，做到早期發現，早期治療，具有重要的臨床意義。

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The clinical significance of TCT joint the high-risk HPV-DNA detection in cervical lesions screening

YUYao,GUOBian-qin,LUOGuang-li,LAINian-yu△

(DepartmentofClinicalLaboratory,ChongqingCancerInstitute，Chongqing400030,China)

Objective To study the clinical significance of TCT and the high-risk HPV-DNA detection in cervical lesions screening.Methods There were 386 cases of cervical cancer,555 cases of clinical cervicitis,269 cases of CINⅠ,133 cases of CINⅡ/Ⅲ,all have been confirmed by histopathological diagnosis.We detected the cytology lesions through Thinprep cytology test (TCT),and detected the expression of high-risk HPV-DNA through second-generation hybrid capture Ⅱ(hybrid captme，HC Ⅱ).Results The positive expression rates of high-risk HPV-DNA in cervicitis,CINⅠ,CINⅡ/Ⅲ,cervical cancer were 26.5%,48.7%,54.9%,72.0%，and there were statistically significance in the four groups (P<0.01).In screening CINⅠ or above,sensitivity,specificity,PPV and NPV of HR-HPV detection combined with cytology were 80.2%,88.5%,86.7%,81.3%,and higher than the separate detection.Conclusion Infection rate of HR-HPV is ascending with serious degree of cervical lesion.HR-HPV detection by HC-Ⅱ is an important method in screening cervical lesion.Combined TCT and HR-HPV test will improve the detection rate of cervical lesions;it is an ideal method to screening cervical cancer and prevention.

TCT; HPV-DNA; cervical lesions; cervical cancer

喻垚，女，碩士，檢驗師，主要從事腫瘤標志物研究。

△通訊作者，E-mail:yuyaodalian@sina.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.11.022

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1672-9455(2015)11-1550-02

2014-12-15

2015-02-12)