黃學梅,喻 垚,張海偉,郭變琴,王云龍,吳立翔△
(重慶市腫瘤研究所:1.檢驗科;2.腫瘤學研究室 400030)
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·論 著·
血漿替代血清行常規生化檢測縮短正流轉時間的可行性探討*
黃學梅1,喻 垚1,張海偉2,郭變琴1,王云龍1,吳立翔1△
(重慶市腫瘤研究所:1.檢驗科;2.腫瘤學研究室 400030)
目的 探討肝素鋰抗凝血漿替代血清進行常規生化檢測縮短正流轉時間(TAT)的可行性。方法 應用日立H7600-20全自動生化分析儀對抽取的110例患者肝素鋰抗凝血漿和血清中的35項生化檢測結果進行比對分析。結果 在肝素鋰抗凝血漿與血清的35項生化檢測結果中,清蛋白(ALB)、γ-谷氨?;D移酶(GGT)、總膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TB)、氯(Cl)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、肌酐(CRE)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、胱抑素C(CysC)、β2-微球蛋白(β2-MG)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)共16項指標的檢測結果比較差異無統計學意義(P>0.05);而鈉離子(Na+)、鉀離子(K+)、二氧化碳(CO2)、磷(P)、鐵(Fe)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、前清蛋白(PreA)、α-L-巖藻糖苷酶(AFU)、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TCH)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白A1(ApoA1)、載脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白a[Lp(a)]、血糖(GLU)、直接膽紅素(DB)共19項指標的檢測結果比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論 肝素鋰抗凝血漿與血清中常規生化檢測結果不完全一致,肝素鋰抗凝血漿可選擇性地替代血清進行部分急診生化檢測以縮短TAT。
血漿; 血清; 常規生化檢驗; 正流轉時間
隨著新的檢測設備和技術的引進,以及檢測方法的改進,臨床生化檢測的精密度與準確度均取得了明顯的提高。現代醫學要求臨床實驗室能夠提供準確而快速的實驗數據,近年來三等甲級醫院的復評條例更是對各檢驗項目的正流轉時間(TAT)作出了要求,TAT成為了實驗室ISO15189認證中的主要內容之一。TAT受到檢驗過程中多個環節的制約,其中標本種類的選擇可嚴重影響TAT[1-2]。本研究采用肝素鋰抗凝血漿替代血清進行常規生化檢測,并探討其在縮短各檢驗項目TAT中的可行性,現將結果報道如下。
1.1 標本來源 隨機抽取本院住院患者的空腹血清和血漿標本各110例,避免脂血和溶血標本[3]。
1.2 儀器與試劑 血清真空管(紅頭)和肝素鋰真空管(綠頭)均購于山東省威高集團高分子制品有限公司,日立H7600-20全自動生化分析儀,長沙平凡儀器儀表有限公司醫用低速離心機TD4C。檢測試劑丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、γ-谷氨?;D移酶(GGT)、總膽紅素(TB)、直接膽紅素(DB)、總蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、尿素(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(CRE)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、磷(P)、鐵(Fe)均購自日本和光純藥工業株式會社,三酰甘油(TG)、總膽固醇(TCH)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白A1(APoA1)、載脂蛋白B(APoB)、脂蛋白a[Lp(a)]、前清蛋白(PreA)、α-L-巖藻糖苷酶(AFU)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽汁酸(TBA)、胱抑素C(CysC)、乳酸脫氫酶(LDH)均購自四川邁克生物科技有限公司,二氧化碳(CO2) 購自北京豪邁生物工程有限公司,β2-微球蛋白(β2-MG)購自寧波美康生物科技股份有限公司,血糖(GLU)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)購自北京萊幫生物技術有限公司;日立ISE 內部標準液、參比電極液和稀釋液均購于日立(蘇州)有限公司。
1.3 方法 分別用紅頭管和綠頭管采集同一患者空腹靜脈血約3 mL。紅頭管為血清組,采集后于室溫或37 ℃放置30 min;綠頭管為血漿組,采樣后顛倒輕輕混勻3~5次,分別于低速離心機3 000 r/min離心5 min,排除高脂血、溶血、高膽紅素血標本。均于抽血后4 h內完成全部項目的檢測。所有測定項目均按照試劑盒說明書設定測定參數,采用試劑配套校準品進行校準,確認質控結果在控后,同時對2種標本進行測定。

血清和血漿標本ALB、GGT、TBA、TB、Cl、Ca、Mg、CRE、BUN、UA、CysC、β2-MG、CK、CK-MB、LDH 和HDL-C水平比較差異無統計學意義(P>0.05),即上述16項(45.7%)檢測項目的血清及血漿標本檢測結果無明顯差異。血漿與血清標本Na+、K+、CO2、P、Fe、ALT、AST、ALP、TP、Lp(a)、AFU、TG、TCH、PA、LDL-C、ApoA1、ApoB、GLU、DB共19項(54.3%)檢測項目的檢測水平比較差異有統計學意義(P<0.05),其中血清AST、TP和CO2檢測水平低于血漿,其余16項血清標本檢測水平均高于血漿,見表1。

表1 血清與血漿標本常規生化檢驗結果

續表1 血清與血漿標本常規生化檢驗結果
血清是指離體的血液凝固之后,經血凝塊聚縮所釋出的液體;而血漿是指離開血管的血液經抗凝處理后,通過離心沉淀所獲得的不含細胞成分的液體。傳統方法通常采用血清標本進行生化檢驗,但由于血液凝固需要一段時間,且血清標本需孵育30 min后再離心、上機檢測、報告結果,從而使TAT延長,尤其不利于急診標本的處理。此外,對于臨床采用抗凝治療的患者,其血液凝固及析出血清的時間會相應延長,另外纖維蛋白凝塊會干擾分析儀,可能導致儀器樣品針和管道堵塞,造成嚴重的后果。肝素抗凝劑能夠較好地避開血液凝固的過程,盡快對標本進行分離和檢測,從而縮短TAT,這對于挽救臨床危急患者的生命至關重要。
有學者研究發現,在肝素鋰抗凝血漿與血清的比對試驗中,很多生化項目的檢測結果存在明顯差異[4]。本研究結果顯示,35項生化指標中有16項(45.7%)在血漿和血清中的檢測結果比較差異無統計學意義(P>0.05),其余19項(54.3%)比較差異有統計學意義(P<0.05)。提示血漿并不能完全應用于本研究測定的35項常規檢測項目。部分學者認為,血漿比血清能更好地反映患者的病理狀態,使用抗凝劑能避免待測成分的改變,尤其有利于K+的精確檢驗[5]。本研究電解質檢測結果表明,血清與血漿Cl、Ca、Mg的檢測水平無明顯差異,其余5項除CO2以外血清均明顯高于血漿。也有學者認為,血清具有更高的穩定性,因此推薦使用血清進行生化檢測。作者在工作中發現不同廠商的試劑說明書對各種檢測項目有不同的要求,如CRE、β2-MG、TBA、CO2、Mg的檢測要求使用血清,而血清和血漿均可用于ALT、AST等的檢測,這提示某些檢測項目的檢測水平在血清和血漿中存在差異。本研究結果中個別檢測項目的血漿和血清檢測水平差別較大,且大部分生化檢測項目在血清中的濃度高于血漿,這與Yu等[6]的研究結果一致。
本研究還發現,血清標本的TP值較肝素抗凝血漿低,其原因可能是血液加入肝素抗凝劑后阻斷了凝血活酶的生成,阻止了血液凝固,導致纖維蛋白原不能水解轉化成纖維蛋白單體仍留在血漿中;而血清中的纖維蛋白原由于凝固被消耗。由此可見,血漿中的TP是包含了纖維蛋白原在內的所有蛋白質,而血清中的TP不含有纖維蛋白原,理論上其TP水平應該低于血漿[7]。因此,在進行血液TP水平的測定時,最好以血清為標本。而某些急診標本,或是某些因其他原因急需測定的標本,采用血漿標本測定TP時應扣除纖維蛋白原水平,以保證與血清標本所測得的TP水平一致。血脂測定結果是否準確對冠狀動脈粥樣硬化與冠心病風險評估的準確性有著重要作用,同時也是防治血脂異常、降低冠心病等疾病風險的重要環節。對肝素鋰抗凝血漿是否適宜于脂質檢驗的研究存在差異,中華醫學會檢驗學會血脂專家委員會建議血脂、脂蛋白的測定均采用血清。本研究發現,血脂中除HDL-C檢測水平在血清和血漿中較為一致,其他指標均存在明顯差異,且血漿檢測水平普遍低于用血清,以LP(a)差異最大。
本研究結果還顯示,血清K+檢測水平高于血漿,這是由于紅細胞的溶解破壞使血清K+水平比血漿高,因此測定K+時應注意血清與血漿的差異,可以考慮針對血漿和血清設置不同的參考范圍。另外,血清GLU水平明顯高于血漿,這可能是由于血糖在體外分解導致濃度降低。氟化鈉抗凝劑可以有效地阻止GLU分解,有學者比較氟化鈉抗凝血漿與血清的GLU水平發現檢測結果無明顯差異[8],說明氟化鈉抗凝標本可以取代血清用于測定GLU水平。但是由于氟化鈉對其他生化項目的影響較大,單獨用于GLU檢測會造成資源的浪費。還有學者研究發現,血清與肝素抗凝血漿標本在抽血后1 h內立即處理并檢測,其GLU水平無明顯差異,但隨著放置時間的延長GLU水平均降低,且血清中GLU水平的下降速度低于血漿。因此,及時分離肝素抗凝血漿或血清均可真實地反映患者血液GLU水平。
綜上所述,肝素鋰抗凝血漿可選擇性地替代血清進行部分生化檢測,特別是對于急診時GLU、腎功能、心肌酶譜等項目的檢測可縮短TAT。
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Feasibility of using heparinized plasma instead of serum sample for conducting routine biochemical tests to shorten TAT*
HUANGXue-mei1,YUYao1,ZHANGHai-wei2,GUOBian-qing1,WANGYun-long1,WULi-xiang1△
(1.DepartmentofClinicalLaboratory;2.OncolonyResearchLaboratory,ChongqingTumorResearchInstitute,Chongqing400030,China)
Objective To investigate the feasibility of using heparin lithium anticoagulation plasma instead of serum for conducting the routine biochemical tests to shorten turn around time(TAT).Methods 35 items of biochemical detection results in the anticoagulation plasma samples with lithium heparin and serum samples extracted from 110 patients were performed the comparative analysis by using the Hitachi H7600-20 automatic biochemical analyzer.Results Among the detection results of 35 items of biochemical tests in heparin lithium anticoagulation plasma and serum,there were no statistically significant differences in 16 items of ALB,GGT,TBA,TB,Cl,Ca,Mg,CRE,BUN,UA,CysC,β2-MG,CK,CK-MB,LDH and HDL-C between heparin lithium anticoagulation plasma and serum samples(P>0.05);while 19 items of Na+,K+,CO2,P,Fe,ALT,AST,ALP,TP,PreA,AFU,TG,TCH,LDL-C,ApoA1,ApoB,Lp(a),GLU and DB had statistical differences between heparin lithium anticoagulation plasma and serum (P<0.05).Conclusion The routine biochemical detection results in heparin lithium anticoagulation plasma and serum samples are not entirely consistent.Heparin lithium anticoagulation plasma may selectively replace the serum sample for conducting partial emergency biochemical detection items to shorten TAT.
plasma; serum; routine biochemical tests; turn around time
重慶市自然科學基金項目(cstc2013jcyjA1513)。
黃學梅,女,本科,副主任技師,主要從事臨床生化檢測?!?/p>
,E-mail:wlx124610@aliyun.com。
10.3969/j.issn.1672-9455.2015.06.004
A
1672-9455(2015)06-0729-03
2014-08-20
2014-12-14)