全自動尿沉渣分析儀Sysmex UF-1000i的性能評價

方雯丹，甘志忠，黃曉榮，許玉珍

(解放軍第一七五醫院/廈門大學附屬東南醫院檢驗科，福建漳州 363000)

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·論 著·

全自動尿沉渣分析儀Sysmex UF-1000i的性能評價

方雯丹，甘志忠，黃曉榮，許玉珍

(解放軍第一七五醫院/廈門大學附屬東南醫院檢驗科，福建漳州 363000)

目的 評價Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀(簡稱Sysmex UF-1000i)的性能，以探討其是否符合臨床要求。方法 按照實驗室ISO15189要求，檢測白細胞(WBC)計數、紅細胞(RBC)計數、上皮細胞(EC)計數、管型(CAST)計數及細菌(BACT)計數5項指標的批內精密度、批間精密度、攜帶污染率、線性范圍、準確度并驗證生物參考區間。結果 Sysmex UF-1000i對白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、上皮細胞(EC)、管型(CAST)、細菌(BACT)的低值質控批內精密度、高值質控批內精密度、低值質控批間精密度、高值質控批間精密度、低值質控準確度、高值質控準確度，以及RBC、BACT的攜帶污染率(分別為0.02%和0.00%)均符合廠家要求。WBC、RBC、BACT的線性相關系數r2分別為0.999 4，0.999 8，0.999 8，r2均不低于0.95，線性良好。結論 UF-1000i各項性能均符合ISO15189對性能評價的要求，可應用于臨床尿液沉渣的檢驗。

UF-1000i全自動尿沉渣分析儀； 性能評價； 精密度； 準確度； 攜帶污染率； 線性范圍； 生物參考區間

尿沉渣有形成分檢測對尿路感染、腎小球性血尿、非腎小球性血尿與混合性血尿等泌尿系統疾病的臨床診斷與鑒別診斷至關重要[1-2]。目前尿沉渣有形成分的檢測主要包括顯微鏡鏡檢和尿沉渣分析儀兩大類。雖然顯微鏡鏡檢是尿沉渣檢測的金標準，但由于離心過程中會造成細胞破壞，并且離心不充分易使部分細胞仍懸浮于上層尿液，會很大程度地影響對尿液有形成分的檢測[3-4]。此外，該法操作要求高、費時費力、主觀性強、誤差大、重復性差、不能定量報告結果，且不利于疾病的動態觀察。若所有標本都進行尿沉渣鏡檢，將影響患者的診療時間。隨著醫療檢驗水平的不斷提高，Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀的應用彌補了顯微鏡鏡檢所存在的上述缺陷，不僅可以實現高通量快速檢測,還提高了分析的精確度和準確度，實現了高效率的檢驗工作[5]。為了滿足臨床工作的需要，本科室于2014年2月引進了該儀器。由于儀器性能會直接影響檢驗結果及患者的臨床診治，并且根據實驗室ISO15189認可標準中臨床體液分析細則要求，尿液有形成分分析儀在進行臨床標本檢測前必須進行儀器性能驗證[6]。本文對該儀器的精密度、攜帶污染率、線性范圍、準確度及生物參考區間等方面進行了驗證，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有標本均來源于2014年3～4月本院門診、住院患者及健康體檢者，均留取10 mL以上新鮮清潔中段尿，并于2 h內完成檢測。其中用于參考區間驗證的標本來自本院健康體檢者，男、女各20例，年齡25～65歲。

1.2 儀器與試劑 Sysmex UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀(以下簡稱Sysmex UF-1000i)及其配套試劑與質控品UFII PACK-SED(批號A3037)、UFII PACK-BAC(批號A3028)、UFII SHEATH(批號A3010) 、UFII SEARCH-SED(批號A3026)、UFII SEARCH-BAC(批號A3024)、UFII CONTROL(批號Ys3036)均購自日本Sysmex公司。對儀器進行日常保養與常規維護，以保證儀器運行狀態良好。工程師根據Sysmex UF-1000i校準要求及標準操作規程對儀器進行校準。每日采用高、低兩個水平進行質控測定，并根據質控規則13S、22S、R4S進行判斷及處理。

1.3 方法

1.3.3 攜帶污染率 即評價儀器測定高值標本后,對后續低值標本檢測結果的污染影響。取高濃度尿標本(廠家說明書要求WBC計數小于5 000/μL、RBC計數小于5 000/μL、BACT計數大于5 000/μL)和低濃度尿標本(生理鹽水)各1份進行試驗。先取高濃度標本混勻后連續檢測3次，結果為H1、H2、H3；然后立即對低濃度標本連續檢測3次，結果為L1、L2、L3，按下列公式計算攜帶污染率[攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。判斷標準：RBC攜帶污染率不超過0.1%，BACT攜帶污染率不超過0.05%，WBC、EC、CAST廠家未給予限定。

1.3.4 線性范圍 選取高濃度新鮮尿液標本。要求高值尿液標本各指標水平接近儀器廠家說明書提供的線性范圍上限(RBC計數約5 000/μL、WBC計數約5 000/μL、BACT計數為10 000/μL)，以鞘液作1∶2、1∶4、1∶16、1∶64、1∶256的系列稀釋，每份標本均檢測2次，取均值作為各稀釋尿樣的實測值；按照稀釋關系計算出各標本內所含分析物的濃度作為標本的理論值，將各稀釋比例尿液標本的實測值與理論值進行回歸統計，計算公式：Y=aX+b。判斷標準：線性標準要求a在(1±0.05)范圍內，相關系數r2≥0.95,則線性良好。

1.3.5 準確性驗證 使用UFII CONTROL按照說明書要求混勻后連續進行5次測定，將其平均值與靶值相比較，計算偏差值。判斷標準依據說明書對低值與高值偏差的要求。

1.3.6 生物參考區間驗證 收集并分析符合健康人群要求的40份新鮮尿液標本，若落于參考范圍之外的檢測結果不超過2個，則認為該參考范圍可接受。Sysmex公司提供的參考范圍：男性RBC為0～11/μL，WBC為0～11/μL，EC為0～6/μL，CAST為0～2/μL，BACT為0～26.4/μL;女性RBC為0～25/μL，WBC為0～25/μL，EC為0～20/μL，CAST為0～2/μL，BACT為0～130.7/μL。

2 結 果

2.1 室內控制分析 評價期間Sysmex UF-1000i高、低2個質控水平的測定結果均在控，各項目均無失控情況。

2.2 批內精密度 WBC、RBC、EC、CAST及BACT計數的測定結果均符合廠家要求，見表1。

2.3 批間精密度 WBC、RBC、EC、CAST及BACT計數的測定結果均符合廠家要求，見表2。

表1 Sysmex UF-1000i 各參數定量分析批內精密度

表2 Sysmex UF-1000i 各參數定量分析批間精密度

2.4 攜帶污染率 WBC、EC、CAST未限定攜帶污染率，RBC及BACT的攜帶污染率分別為0.02%、0.00%，均符合廠家要求。

2.5 線性范圍 WBC、RBC及BACT計數的回歸公式分別為Y=1.002 9X+31.503(r2=0.999 4),Y=1.004 4X+3.1236(r2=0.999 8),Y=1.002 6X+112.24(r2=0.999 8)，a均在(1±0.05)范圍內，均r2≥0.95,線性良好。

2.6 準確性驗證 WBC、RBC、EC、CAST及BACT計數的低值與高值均在參考范圍內，均符合廠家要求。見表3。

表3 準確性檢測結果(/μL)

續表3 準確性檢測結果(/μL)

2.7 生物參考區間驗證 20例健康男性和20例健康女性尿液標本RBC、WBC、EC、CAST及BACT計數的檢測結果均在參考范圍內，故該參考范圍可接受。

3 討 論

Sysmex UF-1000i是一套較為先進的全自動尿液有形成分檢測系統，利用流式細胞計數法和特異核酸熒光染色法對各種有形成分的細胞膜、細胞質、細胞核進行特異性的核酸熒光染色，可反映量化的細胞表面和細胞質內的性狀，以及細胞核的性質(核糖核酸和脫氧核糖核酸的數量),快速提供WBC、RBC、EC、CAST和BACT等參數的定量報告。并且該儀器具有獨立的沉渣和細菌雙檢測通道,大大地提高了儀器對尿液有形成分和細菌定量計數的檢測性能[7-8]。此外，該儀器還可以將結晶、類酵母細胞、小圓上皮細胞、病理管型、黏液絲、精子等作為標記參數，將這些標記信息輸出，具有簡便快捷、精密性好、準確度高、易于質量控制等特點[9]。

精密度是指在規定的測試條件下對同一個均勻標本進行多次檢測所得結果的接近程度，是儀器性能評價的重要指標[10]。本研究選用 UFII CONTROL高、低2個水平作為分析標本，其穩定性好，降低了檢測標本對精密度評價的影響。本研究中批內精密度的評價采用了11次連續測定，并去掉第1次檢測結果，可有效地降低攜帶污染率。結果顯示，各參數的低值水平及高值水平的批內CV與批間CV均符合要求，說明該儀器具有良好的精密度。然而，潘瑩等[11]研究發現，Sysmex UF-1000i的上述5項檢測項目的低值批內精密度不符合要求，可能是由于待測有形成分濃度過低、穩定性差，檢測結果稍有波動即造成精密度的較大變化，但是檢測結果的差值仍在可接受范圍內。

攜帶污染率是評價儀器測定時前一高值標本對后續低值標本檢測結果的影響，是儀器性能評價中不可缺少的指標，尤其在泌尿系統疾病患者的尿液標本檢測中，攜帶污染率已是測定結果的主要影響因素之一。本研究RBC與BACT的攜帶污染率分別為0.02%、0.00%，均符合要求。雖然廠家說明書對WBC、EC、CAST的攜帶污染率未給出限定，但結果顯示其攜帶污染率均為0，說明檢測高值標本后儀器對管道的沖洗充分，降低了對后續標本檢測結果的影響。

此外，本研究對WBC、RBC、BACT的線性范圍進行了評價，結果顯示三者的a值均在(1±0.05)范圍內，均r2≥0.95，表明均具有良好的線性范圍，符合儀器的線性要求。對于超過線性范圍的高濃度尿液標本，按要求需用鞘液稀釋后再進行測定。但張崇唯等[12]研究表明，在臨床診治過程中稀釋后的高值標本其檢測意義不大，因此無需進行稀釋、可直接報告。由于對準確性的評價國內尚無統一標準，本研究根據連續5次測定UFII CONTROL所得均值與靶值進行比較并計算偏差。結果顯示，5項檢測項目的低值與高值水平質控均在偏差要求的參考范圍內，說明檢測結果的準確性高、可靠性強。生物參考區間涉及臨床診治，是儀器性能評價的另一項重要指標。本研究結果顯示所有測定結果均在擬檢驗的區間內，表明該參考區間適用于本實驗室。

綜上所述，Sysmex UF-1000i尿沉渣分析系統的各項指標均達到檢測要求，具有良好的重復性、穩定性和線性范圍，且其攜帶污染率低，可應用于臨床。但是，由于Sysmex UF-1000i是基于有形成分的大小及熒光強度的檢測來進行非形態學研究，其干擾因素較多，且不能對異常形態細胞(如形態異常的紅細胞、腎小管上皮細胞、腫瘤細胞等)進行識別與計數。另外,Sysmex UF-1000i無法區分病理管型和生理管型，且計數結果往往偏高,因此檢測結果需同干化學及顯微鏡檢查相結合進行綜合分析[13]。此外，在實際工作中必須定期評價儀器性能，并對儀器做定期校準，充分了解儀器的性能，避免管道老化等因素造成的誤差，提高檢驗效率；并且，需制訂符合本實驗室的鏡檢復檢規則，以保證為臨床提供準確可靠的檢測結果，更好地服務于臨床。

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Performance evaluation of fully automatic urine sediment analyzer Sysmex UF-1000i

FANGWen-dan,GANZhi-zhong,HUANGXiao-rong,XUYu-zhen

(DepartmentofClinicalLaboratory,175HospitalofPLA/AffiliatedSoutheastHospitalofXiamenUniversity,Zhangzhou,Fujian363000,China)

Objective To evaluate the performance of fully automatic urine sediment analyzer Sysmex UF-1000i in order to discuss whether its performance meets the clinical requirements.Methods The evaluation was performed according to the guidelines established by the accreditation of the laboratory ISO15189.The within-batch and inter-batch precision,carry-over contamination rate,linear range and accuracy of WBC count,RBC count,epithelial cell(EC) count,CAST count and bacterial(BACT) count were analyzed and the biological reference interval was verified.Results The low level control within-batch precisions,high level control within-batch precisions,low level control inter-batch precisions,high level control inter-batch precisions,low level control accuracy,high level control accuracy of WBC,RBC,EC,CAST and BACT and the carryover contamination rates of RBC(0.02%) and BACT(0.00%)were conforming the requirements of the manufacturer.The linear correlation coefficients(r2) of WBC,RBC and BACT were 0.999 4，0.999 8 and 0.999 8 respectively,which was more than or equal to 0.95 with good linearity.Conclusion The various properties of the UF-1000i meet the demand of ISO15189,which could be used in clinical urine sediment detection.

UF-1000i fully automatic urine sediment analyzer； performance evaluation； precision； accuracy； carry-over contamination rate； linearity range； biological reference interval

方雯丹，女，本科，檢驗技師，主要從事檢驗醫學研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.06.020

A

1672-9455(2015)06-0770-03

2014-08-26

2014-12-02)