免疫組化標(biāo)記物在子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌診斷中的表達(dá)及臨床意義

黃敬皓

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院,南寧 530011)

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·論 著·

免疫組化標(biāo)記物在子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌診斷中的表達(dá)及臨床意義

黃敬皓

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院,南寧 530011)

目的 探討波形蛋白(Vim)、癌胚抗原(CEA)、雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和P16蛋白等免疫組化標(biāo)記物在子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌鑒別診斷中的表達(dá)，并分析其臨床意義。方法 選取2013年1月至2014年6月廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院收治的子宮內(nèi)膜樣腺癌(A組)與宮頸腺癌(B組)患者各80例。采用免疫組化法檢測(cè)Vim、CEA、ER和P16 蛋白表達(dá)，并比較Vim、CEA、ER三聯(lián)檢測(cè)與Vim、CEA、ER和P16蛋白四聯(lián)檢測(cè)的各項(xiàng)功能指標(biāo)。結(jié)果 A組的Vim和ER陽(yáng)性率分別為71.25%、73.75%，均高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；B組的CEA和P16陽(yáng)性率分別為73.75%、67.50%，均高于A組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A組四聯(lián)檢測(cè)的特異度、敏感度及準(zhǔn)確度分別為92.43%、56.44%、71.21%，B組分別為98.62%、58.57%、74.62%，均分別高于同組三聯(lián)檢測(cè)的特異度、敏感度及準(zhǔn)確度，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 子宮內(nèi)膜樣腺癌組織Vim和ER陽(yáng)性表達(dá)較高，宮頸腺癌組織CEA和P16陽(yáng)性表達(dá)較高，p16蛋白聯(lián)合傳統(tǒng)三聯(lián)檢測(cè)可以提高子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌鑒別診斷的準(zhǔn)確性。

子宮內(nèi)膜樣腺癌； 宮頸腺癌； 波形蛋白； 癌胚抗原； 雌激素受體

宮頸癌是婦科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其中腺癌約占5%～15%，多發(fā)生于宮頸管內(nèi)膜，呈內(nèi)生性生長(zhǎng)，由于分支較多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜,病理診斷中漏診及誤診率較高。子宮內(nèi)膜癌發(fā)生于子宮內(nèi)膜，大多數(shù)為腺癌。子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌可向上向下伸延擴(kuò)展，宮體下段子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌較難判斷和區(qū)分。子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌的鑒別診斷對(duì)于臨床治療和預(yù)后的判斷具有重要的臨床意義[1-2]。本研究旨在探討波形蛋白(Vim)、癌胚抗原(CEA)、雌激素受體(ER)和P16蛋白等免疫組化標(biāo)記物在子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌鑒別診斷中的表達(dá)，并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2014年6月本院收治的子宮內(nèi)膜樣腺癌(A組)與宮頸腺癌(B組)患者各80例。A組患者年齡34～71歲，平均(49.67±5.13)歲，其中Ⅰ級(jí)21例，Ⅱ級(jí)33例，Ⅲ級(jí)26例。B組患者年齡36～70歲，平均(46.58±4.29)歲，Ⅰ級(jí)20例，Ⅱ級(jí)35例，Ⅲ級(jí)25例。所有患者均知情同意，且研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 儀器與試劑 鼠抗人Vim、CEA蛋白免疫組化試劑盒和3,3-二氨基聯(lián)苯(DAB)顯色試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司，ER和P16蛋白免疫組化試劑盒均購(gòu)自北京中山公司。

1.3 方法

1.3.1 檢測(cè)方法 Vim、CEA、ER和P16 蛋白檢測(cè)均采用免疫組化方法，Vim、CEA、ER和P16蛋白工作濃度均為1∶50。所有患者標(biāo)本均經(jīng)10% 甲醛液固定后石蠟包埋、脫水、石蠟包埋、切片，根據(jù)組化試劑盒步驟應(yīng)用S-P免疫組化二步法，DAB顯色、脫水，透明和封片后在顯微鏡下進(jìn)行觀察。并將Vim、CEA、ER三聯(lián)檢測(cè)作為三聯(lián)法，Vim、CEA、ER和P16 蛋白四聯(lián)檢測(cè)作為四聯(lián)法。

1.3.2 評(píng)定方法 陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：Vim以細(xì)胞質(zhì)棕黃色顆粒深染為陽(yáng)性；CEA以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒深染為陽(yáng)性：ER以細(xì)胞核棕黃色顆粒深染為陽(yáng)性；P16 以細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)的棕黃色顆粒為陽(yáng)性。采用半定量評(píng)分法評(píng)估陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)分：陽(yáng)性細(xì)胞比例0%～5%記為0分；6%～20%記為1 分；21%～50%記為2 分，51%～80% 記為3分；80%以上記為4 分。細(xì)胞染色程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)的染色程度弱陽(yáng)性記為1 分；中度強(qiáng)度陽(yáng)性記為2分；強(qiáng)陽(yáng)性記為3 分。陽(yáng)性評(píng)分=陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)分×染色程度評(píng)分。依據(jù)ROC 曲線圖定義陽(yáng)性閾值：陰性為0～3 分，陽(yáng)性為4～12分[3-4]。

2 結(jié) 果

2.1 兩組各項(xiàng)免疫組化標(biāo)記物陽(yáng)性率比較 A組Vim、ER均呈較強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，A組Vim和ER陽(yáng)性率均高于B組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組CEA和P16蛋白均呈較強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，B組CEA和P16陽(yáng)性率均高于A組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組各項(xiàng)免疫組化標(biāo)記物檢測(cè)水平比較[n(%)]

注：與A組比較，a:P<0.05。

2.2 兩組不同檢測(cè)方法各功能評(píng)價(jià)指標(biāo)比較 A組四聯(lián)法檢測(cè)的特異度、敏感度及準(zhǔn)確度分別為92.43%、56.44%、71.21%，B組分別為98.62%、58.57%、74.62%，均分別高于同組三聯(lián)法檢測(cè)的特異度、敏感度及準(zhǔn)確度，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表2 兩組不同檢測(cè)方法各功能評(píng)價(jià)指標(biāo)比較(%)

注：與同組的三聯(lián)法比較，aP<0.05。

3 討 論

子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌是婦科較為常見(jiàn)的惡性腫瘤，且患病逐漸趨于年輕化。宮頸腺癌多來(lái)源于宮頸腺上皮,有多向分化的特點(diǎn),其組織學(xué)類型較多樣化。部分學(xué)者認(rèn)為子宮內(nèi)膜樣腺癌是一種雌激素依賴性相關(guān)腫瘤，是女性常見(jiàn)的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一。臨床診斷中當(dāng)原發(fā)于子宮體的子宮內(nèi)膜樣腺癌累及宮頸時(shí)，子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌難以鑒別，這將影響患者的治療及對(duì)預(yù)后的判斷。

Vim是中間絲的一種蛋白質(zhì)，主要存在于間充質(zhì)來(lái)源的細(xì)胞中，與微管及肌動(dòng)蛋白微細(xì)絲等一起維持細(xì)胞骨架的完整性。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜樣腺癌Vim呈較強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，而在宮頸腺癌中表達(dá)較少，可作為子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌鑒別診斷的指標(biāo)之一。癌組織中大多存在ER，可通過(guò)與核內(nèi)的雌激素結(jié)合實(shí)現(xiàn)其生物學(xué)功能，子宮內(nèi)膜癌與性激素有關(guān)，ER可能是內(nèi)膜癌變的一個(gè)啟動(dòng)因素或激發(fā)因素[5-6]。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者ER陽(yáng)性率明顯高于宮頸腺癌患者。提示ER與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)，并能夠在一定程度上反映腫瘤的分化程度。這主要是由于雌激素能夠促進(jìn)內(nèi)膜細(xì)胞的增生及血管增殖，ER被誘導(dǎo)從而促進(jìn)其過(guò)度生長(zhǎng)或癌變。

CEA是由內(nèi)胚層分化而來(lái)的一種腫瘤相關(guān)抗原，在腫瘤組織中有較高的陽(yáng)性表達(dá)率，主要表達(dá)于腺上皮來(lái)源的腺癌，幾乎所有的宮頸來(lái)源的腺癌其CEA表達(dá)持續(xù)陽(yáng)性[7]。本研究結(jié)果顯示，CEA在宮頸腺癌的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于子宮內(nèi)膜樣腺癌，提示CEA主要表達(dá)于宮頸腺癌，呈廣泛、較強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)，而在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)強(qiáng)度較弱，證實(shí)CEA對(duì)于子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌的鑒別診斷可起到重要作用。P16蛋白是一種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶的抑癌基因，位于染色體9p21，能夠調(diào)節(jié)pRB基因去磷酸化，抑制細(xì)胞周期在G1～S期，P16基因的缺失、突變、轉(zhuǎn)錄或表達(dá)異常可引起細(xì)胞增殖的失控[8-9]。本研究結(jié)果顯示，宮頸腺癌的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于子宮內(nèi)膜樣腺癌，提示p16蛋白檢測(cè)可用于子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌的鑒別。可能由于宮頸腺癌與高危型人類乳頭狀瘤病毒關(guān)系較為密切，可導(dǎo)致p16蛋白過(guò)度表達(dá)[10]。

此外，本研究結(jié)果表明，四聯(lián)檢測(cè)對(duì)于宮頸原發(fā)腺癌和子宮內(nèi)膜樣腺癌的輔助診斷和鑒別診斷的特異性、敏感性和準(zhǔn)確度均高于三聯(lián)檢測(cè)，更有利于子宮內(nèi)膜樣腺癌和宮頸腺癌的診斷，可以提高診斷的準(zhǔn)確性和可靠性，為病理診斷提供更多的依據(jù)，且對(duì)于宮頸原發(fā)腺癌的診斷效果更明顯。但四聯(lián)檢測(cè)的敏感性依然較低，限制了其在臨床中的應(yīng)用。

綜上所述，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者組織中Vim和ER陽(yáng)性表達(dá)較高，宮頸腺癌患者CEA和P16蛋白陽(yáng)性表達(dá)較高，p16蛋白聯(lián)合傳統(tǒng)三聯(lián)檢測(cè)可以提高子宮內(nèi)膜樣腺癌與宮頸腺癌鑒別診斷的準(zhǔn)確性。

[1]胡維維，陶金華，李廣民，等．ER、VIM、CEA和p16四聯(lián)檢測(cè)在宮頸原發(fā)腺癌和子宮內(nèi)膜癌診斷和鑒別中的應(yīng)用[J]．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30(3)：526-529．

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Expression of immunohistochemical markers in diagnosis of endometrial adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma and its clinical significance

HUANGJin-hao

(MaternalandChildHealthCareHospitalofGuangxiZhuangAutonomousRegion,Nanning,Guangxi530011,China)

Objective To explore the expression of immunohistochemical markers vimentin (Vim),carcinoembryonic antigen (CEA),estrogen receptor (ER),progesterone receptor (PR) and P16 protein in the differential diagnosis of endometrioid adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma,and to analyze its clinical significanceMethods 80 cases of endometrioid adenocarcinoma (group A) and 80 cases of cervical adenocarcinoma (group B) in our hospital from Jan. 2013 to Jun. 21014 were selected.The expression of Vim,CEA,ER and P16 protein was measured by the immunohistochemical method.The functional indexes were compared between the 3-item combined detection of Vim,CEA and ER and the 4-item combined detection of Vim,CEA,ER and P16 protein. Results The positive rates of Vim and ER in the group A were 71.25% and 73.75% respectively,which were higher than those in the group B,the differences were statistically significant (P<0.05).The positive rates of CEA and P16 protein in the group B were 73.75% and 67.50% respectively,which were higher than those in the group A,the differences were statistically significant (P<0.05).The specificity,sensitivity and accuracy of the 4-item combined detection in the group A and B were 92.43% and 98.62%,56.44% and 58.57%,71.21% and 74.62% respectively,which were higher than those of the 3-item combined detection in the same group,the differences were statistically significant (P<0.05).Conclusion Vim and ER have high positive expression in endometrial adenocarcinoma tissue,while CEA and P16 have high positive expression in cervical adenocarcinoma.p16 protein combined with traditional triple combination detection could improve the differential diagnostic accuracy of endometrial adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma.

endometrioid adenocarcinoma； cervical adenocarcinoma; vimentin； carcinoembryonic antigen； estrogen receptor

黃敬皓，男，碩士，研究員，主要從事女性生殖系統(tǒng)病理學(xué)研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.06.023

A

1672-9455(2015)06-0778-02

2014-09-12

2014-12-18)