非酒精性脂肪肝患者體內鐵代謝水平臨床分析

陳 學,龍 靜,杜梅英,張余川,韋衍莉

(1.海南省海口市第三人民醫院檢驗科 571100;2.海南省海口市人民醫院醫學檢驗科 571100)

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·論 著·

非酒精性脂肪肝患者體內鐵代謝水平臨床分析

陳 學1,龍 靜1,杜梅英2,張余川1,韋衍莉1

(1.海南省海口市第三人民醫院檢驗科 571100;2.海南省海口市人民醫院醫學檢驗科 571100)

目的 研究鐵代謝相關指標在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者中的水平及其意義。方法 選取127例NAFLD患者和130例健康人進行血清學、肝臟B超和鐵代謝指標檢查。NAFLD患者行肝臟活組織檢查。分析并評價血清鐵(SI)代謝指標在NAFLD患者的變化。結果 NAFLD患者體質量指數、腰圍、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉移酶(GGT)、總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)明顯高于健康者，差異有統計學意義(P<0.05)。NAFLD患者鐵代謝的相關指標SI、鐵蛋白(SF)高于健康者，差異有統計學意義(P<0.05)；鐵調素(HEPC)低于健康者，差異有統計學意義(P<0.05)。女性NAFLD患者血清SI和SF水平均低于男性NAFLD患者，差異有統計學意義(P<0.05)，肥胖NAFLD患者血清SI和SF均高于體質量正常的NAFLD患者，差異有統計學意義(P<0.05)，HEPC相對較低(P<0.05)。相關性分析結果顯示，SI與ALT、TG、TC呈正相關(P<0.05)，SF與ALT、TC呈正相關(P<0.05)，HEPC與ALT、GGT、TG、TC均呈負相關(P<0.05)。結論 血清SI、SF和HEPC水平與NAFLD患者的肥胖和肝功能相關，聯合相關指標檢測有助于判斷NAFLD患者肝損傷的進展。

非酒精性脂肪肝；鐵代謝；肝損傷

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是西方國家最常見的肝臟疾病，成人發病率高達30%左右，研究顯示其與肥胖、血脂紊亂和胰島素抵抗等因素有關。超過1/3的患者會引起非酒精性脂肪性肝炎，繼而發展為肝纖維化或肝硬化，而此類患者也具有發生肝細胞癌的風險[1-2]。國內NAFLD的發病率較低，但是近幾年有逐漸上升的趨勢，除病毒性肝炎之外，NAFLD的發病率位于所有肝病發病率的第2位。鐵是人體必需的微量元素，肝臟是鐵的主要代謝器官，同時，過多的鐵元素也會在肝臟內堆積，造成肝損傷。研究發現，多種肝臟疾病存在鐵代謝紊亂的現象，過量的鐵沉積會加重肝纖維化和肝硬化的進程[3]。同時鐵作為氧化劑能夠激活氧化應激反應，促進自由基生成，引起肝細胞器的損傷和肝細胞死亡。弭希峰等[4]發現鐵沉積是NAFLD的重要的危險因素。肝臟活組織檢查是診斷鐵沉積的金標準，但是由于肝臟活組織檢查是一種創傷性極大的檢查，并非所有患者均能實施，因此尋找其他能夠代替肝臟活組織檢查的無創指標更具有可行性。目前鐵代謝相關的血清學指標在中國人群中的報道相對較少。本研究通過檢測NAFLD患者體內鐵代謝的情況，并分析其與其他血清學指標的關系，旨在明確NAFLD患者體內鐵元素水平及其對NAFLD的臨床提示價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年10月至2014年10月在海口市第三人民醫院就診并確診為NAFLD的患者127例，排除年齡小于18歲、病毒性肝炎、藥物性肝炎、肝豆狀核變性和有大量飲酒史的患者。其中男71例(55.9%)、女56例(44.1%)，平均年齡(53.6±6.5)歲。所有納入對象均經常規實驗室和影像學檢查，并聯合肝臟活組織檢查后確診。納入同期海口市第三人民醫院體檢的健康者130例，其中男69例(53.1%)、女61例(46.9%)，平均年齡(52.3±8.2)歲。所有研究對象自愿簽署知情同意書，本研究經過醫院倫理委員會審核通過。

1.2 研究方法 記錄所有研究對象的一般資料：包括年齡、性別、體質量、腰圍、臀圍、血壓；對研究對象進行常規實驗室檢查：包括天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉移酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP)；總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)。所有研究對象禁食12 h后采集早晨空腹靜脈血4 mL，3 000 r/min離心10 min，取上清液。檢測血清鐵(SI)及總鐵結合力(TIBC)的試劑盒購自寧波市江北區寧波瑞源生物科技有限公司，儀器為日本東芝全自動生化儀(TBA-120FR)；鐵蛋白(SF)的檢測試劑盒(化學發光法)購自上海市浦東新區貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司，ACCESS全自動微粒化學免疫分析儀；檢測鐵調素(HEPC)的ELISA試劑盒購自上海瓦蘭生物科技有限公司，所有操作嚴格按照說明書執行。每例標本檢測2次，最后結果取2次的平均值。

1.3 診斷標準 2010年中華醫學會重新修訂的非酒精性脂肪肝病診療指南中的診斷標準：(1)無飲酒史或飲酒乙醇量男性小于140克/周，女性小于70克/周；(2)排除病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養、肝豆狀核變性、自身免疫性肝病等可導致脂肪肝的特定疾病。B超檢查征象：(1)肝區近場回聲彌漫性增強，強于腎臟，遠場回聲減弱；(2)肝內管道結構顯示不清；(3)肝臟輕至中度腫大，邊緣角變鈍[5]。脂肪肝的病理診斷標準：肝腺泡3區大泡性或以大泡為主的混合性肝細胞脂肪變，伴或不伴肝細胞氣球樣變、小葉內混合性炎性反應細胞浸潤及竇周纖維化。

2 結 果

2.1 兩組研究對象一般臨床病理參數比較 見表1。兩組在年齡、性別、ALP差異無統計學意義(P>0.05)，NAFLD患者體質量指數(BMI)、腰圍、ALT、GGT、TC和TG明顯高于健康者，差異均有統計學意義(P<0.05)。鐵代謝相關指標SI、SF高于健康者，差異均有統計學意義(P<0.05)，HEPC低于健康者，差異也有統計學意義(P<0.05)。

表1 NAFLD患者和健康者一般資料比較

續表1 NAFLD患者和健康者一般資料比較

表2 鐵代謝指標在不同臨床病理參數NAFLD患者中的比較

注：與男性患者比較，*P<0.05；與BMI<28比較，△P<0.05。

2.2 鐵代謝指標在不同臨床病理參數NAFLD患者中的比較 見表2。血清SI、SF和HEPC與NAFLD患者年齡和高血壓狀況無關(P>0.05)，女性NAFLD患者血清SI和SF水平均低于男性NAFLD患者，而HEPC與性別無關。BMI≥28的NAFLD患者血清SI和SF高于BMI<28的NAFLD患者，HEPC則相對較低。

表3 NAFLD患者其他血清學指標與鐵代謝相關性分析

2.3 NAFLD患者其他血清學指標與鐵代謝指標相關性分析 見表3。相關性分析結果顯示，SI與ALT、TG、TC呈正相關(P<0.05)，SF與ALT、TC呈正相關(P<0.05)，HEPC與ALT、GGT、TG、TC均呈負相關(P<0.05)。

3 討 論

NAFLD屬于一種代謝應激性肝損傷，與肥胖、糖尿病等密切相關，尤其與肥胖的關系密切，其在普通人群中的發病率約占30%左右，但是在肥胖患者中的發病率高達80%以上[6]。NAFLD的發病機制又稱為“二次打擊”學說，“初次打擊”指肝臟內TC或TG的堆積，“二次打擊”主要是由炎性反應相關信號通路激活、氧化應激和線粒體功能異常等引起的肝細胞的慢性炎性反應和壞死。

小腸是吸收鐵的主要器官，肝臟是儲存鐵的主要部位。由于大部分人飲食中的鐵元素水平遠遠大于機體的需要，肝臟作為代謝鐵的主要器官，其損傷很容易引起鐵在肝臟中沉積。

在NAFLD發病的“二次打擊”學說中，最常見的即是腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、核因子κB(NF-κB)等相關信號通路的激活引起的基因轉錄及其表達產物增加。TNF-α、IL-1β、NF-κB可促進SF合成，而IL-1β和IL-6的高表達可上調HEPC基因的轉錄，SF與鐵結合儲存于巨噬細胞中，SF的增高不僅加重了鐵在肝臟中的沉積，還可通過誘導炎性反應、氧化應激和抑制脂質轉運，進一步誘發肝細胞的壞死，促進肝纖維化、肝結構重塑，甚至促進肝細胞發生癌變。SI和組織鐵的平衡依賴鐵調節蛋白的調節，人體存在多種鐵調節蛋白，近十幾年發現了一種新的鐵調節蛋白——HEPC，研究發現其在鐵代謝中起至關重要的作用，尤其是在某些慢性貧血性疾病中起到重要的調節作用[7]。HEPC是肝臟分泌的小分子抗菌肽，其作用的靶細胞包括腸上皮細胞、肝細胞和巨噬細胞，HEPC能夠與此類細胞膜上的鐵轉運蛋白-1結合，抑制轉運蛋白對鐵的轉運，促進鐵在細胞內的沉積。研究發現持續的放血療法使患者處于缺鐵的狀態，可以顯著緩解肝炎患者炎性反應的程度和纖維化的進展，提示肝臟鐵負荷過多可能使肝病患者病情加重。

近期動物試驗研究結果顯示，鐵與肝細胞內堆積的脂肪可協同誘導肝細胞的損傷和死亡[8]。多數國外的研究結果顯示，SI和SF在NAFLD患者中升高，且能夠作為NAFLD患者病情嚴重程度的重要參考指標，但是關于血清HEPC在NAFLD患者中水平的研究相對較少。

本研究發現，SI和SF 2項指標在NAFLD患者組中明顯升高，與健康者比較差異有統計學意義，與前人的研究相符。同時本研究檢測了NAFLD患者HEPC水平，發現其水平低于健康人群，與潘衛華等[9]對乙型肝炎患者HEPC水平的研究結果相似。本研究繼而分析了鐵代謝指標與NAFLD患者年齡、性別和肥胖之間的關系發現，SI和SF在男性和肥胖NAFLD患者中高于非肥胖患者，由此推測鐵超載可能與內分泌激素調節有關。相關性分析結果顯示,鐵代謝的血清學指標分別與肝功能和血脂水平具有相關性，表明HEPC確實與肥胖相關，且可能同時加重患者肝功能的損害。

綜上所述，NAFLD患者鐵代謝相關的血清學指標確實異于健康人群，且與患者的性別、肥胖和肝功能相關。本研究在前人的基礎上，同時檢測了NAFLD患者HEPC水平，補充了以往針對NAFLD患者SI和SF的研究，進一步補充說明了NAFLD患者鐵代謝的情況。同時研究認為鐵代謝的情況與NAFLD患者的肥胖密切相關，二者結合分析有可能可以推測NAFLD患者肝功能損害的程度和纖維化的進展。

[1]Dowman JK，Tomlinson JW，Newsome PN.Pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease [J].QJM，2010，103(2)：71-83.

[2]White DL,Kanwal F,El-Serag HB.Association between nonalcoholic fatty liver disease and risk for hepatocellular cancer,based on systematic review[J].Clin Gastroenterol Hepatol，2012，10(1):1342-1359.

[3]趙晉英，李艷偉，李琳.鐵和鐵調素在肝纖維化中的作用[J].生理科學進展，2010，41(3)：183-186.

[4]弭希峰,黃子成,王木成,等.非酒精性脂肪肝患者血清鐵、轉鐵蛋白、血清鐵蛋白水平測定[J].上海醫藥,2006,27(11):517-518.

[5]范高建.非酒精性脂肪性肝病診療指南(2010年修訂版)[J].現代醫藥衛生，2011,27(5):641-644.

[6]劉笑雷,楊志英.非酒精性脂肪肝病與原發性肝癌關系的研究進展[J].癌癥進展，2014,12(1)：59-63.

[7]薛成蓮,錢忠明,李琳.鐵調素、炎癥因子與鐵代謝[J].山西醫科大學學報,2007,38(2):170-173.

[8]Haap M，Machann J，von Friedeburg C，et al. Insulin sensitivity and liver fat:role of iron load[J].J Clin Endocrinol Metab，2011，96(6):958-961.

[9]潘衛華，黎映芹，朱平安.乙肝病毒攜帶者鐵代謝與血清鐵調素相關性研究[J].海南醫學院學報，2014,20(10):1371-1373.

Clinical analysis of iron metabolism in patients with nonalcoholic fatty liver disease

CHENXue1,LONGJing1,DUMei-ying2,ZHANGYu-chuan1,WEIYan-li1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theThirdPeople′sHospitalofHaikouCity,Haikou,Hainan571100,China; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofHaikouCity,Haikou,Hainan571100,China)

Objective To study the iron metabolism and its significance in patients with nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD).Methods 127 cases of NAFLD patients and 130 cases of healthy people were selected and their levels of serum indexes,hepatic B-ultrasonography and biomarkers of iron metabolism were detected.NAFLD patients received liver biopsy.The changes of serum iron (SI) biomarkers of iron metabolism in NAFLD patients were analyzed and estimated.Results The levels of BMI,waist circumference,ALT,GGT,TC,TG,SI and SF of NAFLD patients were significantly higher than those of healthy people (P<0.05),while the level of HEPC was significantly lower than healthy people (P<0.05).The SI and SF levels of female NAFLD patients were significantly lower than those of male NAFLD patients (P<0.05),which of obese NAFLD patients were significantly higher than non-obese patients (P<0.05).HEPC had an inverse relationship between different genders and weights (P<0.05).The results of spearman analysis showed that SI was positively correlated with ALT,TG and TC (P<0.05); SF was positively correlated with ALT and TC (P<0.05); HEPC was negatively correlated with ALT,GGT,TG and TC (P<0.05).Conclusion Serum levels of SI,SF and HEPC are correlated with obesity situation and liver function of NAFLD patients.Combined detection related indexes would be helpful to estimate liver damage.

nonalcoholic fatty liver disease;iron metabolism;liver damage

陳學，男，本科，主管檢驗技師，主要從事生化檢驗、免疫檢驗、臨床輸血。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.23.014

A

1672-9455(2015)23-3484-03

2015-03-06

2015-06-18)