1 123株銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥性分析*

張 婧，孫恒彪，潘祖漢，尤 旭，陳佑明

(南方醫科第三附屬醫院檢驗科，廣州 510630)

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·論 著·

1 123株銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥性分析*

張 婧，孫恒彪，潘祖漢，尤 旭，陳佑明△

(南方醫科第三附屬醫院檢驗科，廣州 510630)

目的 了解2012～2014年該院銅綠假單胞菌臨床感染分布及耐藥性情況。方法 對分離得到的銅綠假單胞菌進行鑒定及抗菌藥物敏感性試驗，數據使用WHONET5.6軟件進行統計分析。結果 2012～2014年共分離得到1 123株銅綠假單胞菌，標本來源主要為痰(753株，67.1%)、傷口分泌物(179株，15.9%)、中段尿(95株，8.5%)，科室來源主要為神經外科(255株，22.7%)、呼吸內科(238株，21.2%)、ICU(177株，15.8%)、創傷骨科(84株，7.5%)。1 123株銅綠假單胞菌對哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、頭孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷類(15.8%～25.8%)具有較低的耐藥率，對氨曲南(47.7%)耐藥率最高。分離自痰標本的銅綠假單胞菌耐藥率明顯高于總耐藥率。2012～2014年多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌檢出數量逐年增加。結論 日常工作中應加強銅綠假單胞菌的耐藥監測，減少及預防多重耐藥和泛耐藥菌的產生。

銅綠假單胞菌； 耐藥性； 多重耐藥； 泛耐藥； 經驗用藥

銅綠假單胞菌是一種廣泛存在于自然環境中的革蘭陰性非發酵菌，對各種環境具有很強的適應性，是引起院內感染最為重要的病原菌之一[1]。同時銅綠假單胞菌與肺囊性纖維化有著密切的關系，是引起肺囊性纖維化患者病情加重及肺功能衰竭的重要原因[2]。2013年CHINET監測顯示銅綠假單胞菌與大腸埃希菌、克雷伯菌、鮑曼不動桿菌占據了致病性革蘭陰性菌前4位，銅綠假單胞菌已成為臨床分離最常見的病原菌之一[3]。近年來隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用導致銅綠假單胞菌感染，尤其多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌在世界范圍流行，往往導致臨床治療失敗，已成為全球性的難題[4-5]。因此分析銅綠假單胞菌臨床分布、耐藥性及呼系統來源耐藥性對指導臨床合理使用抗菌藥物有著重要的指導意義，本文對2012～2014年南方醫科大學第三附屬醫院分離到的1 123株銅綠假單胞菌進行了回顧性分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 2012～2014年從本院臨床送檢標本中共分離得到1 123株銅綠假單胞菌，剔除同一患者多次重復送檢標本中的分離株。

1.2 質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC29213、糞腸球菌ATCC29212均購自廣東省臨床檢驗中心。

1.3 菌株鑒定及藥敏試驗 所有分離菌株菌均采用西門子Microscan Walkaway 40 plus型全自動微生物鑒定及藥敏試驗系統進行鑒定及藥敏試驗。藥敏試驗藥物包括：哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉維酸、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、亞胺培南、美羅培南(2012年未檢測)、阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素、環丙沙星、左氧氟沙星，共13種。抗菌藥物敏感性采用美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)文件2013版進行判斷。

1.4 多重耐藥及泛耐藥菌判斷 根據多重耐藥菌、泛耐藥菌術語國際專家提議的暫行標準中關于多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌判斷標準，即青霉素類/β內酰胺酶抑制劑復合類、抗假單胞菌頭孢菌素類、單環β內酰胺類、抗假單胞菌碳青霉烯類、氨基糖苷類、抗假單胞菌氟喹諾酮類、磷霉素類、多黏菌素類共8類抗菌藥物中3類或以上(每類中1種或以上)不敏感為多重耐藥銅綠假單胞菌，6類或以上(每類中1種或以上)不敏感為泛耐藥銅綠假單胞菌[6-7]。

1.5 統計學處理 采用世界衛生組織發布的耐藥性統計分析軟件WHONET5.6版對數據進行統計分析。

2 結 果

2.1 標本分布 2012～2014年1 123株銅綠假單胞菌臨床標本分布情況，見表1。

表1 2012～2014年1 123株銅綠假單胞菌臨床 標本分布[n(%)]

2.2 科室分布 2012～2014年1 123株銅綠假單胞菌臨床科室分布情況，見表2。

表2 2012～2014年1 123株銅綠假單胞菌臨床 科室分布[n(%)]

2.3 銅綠假單胞菌耐藥性分析 2012～2014年13種抗菌藥物中有9種抗菌藥物耐藥率呈逐漸上升趨勢。1 123株銅綠假單胞菌對哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、頭孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷類(15.8%～25.8%)具有較低的耐藥率，對氨曲南(47.7%)耐藥率最高。分離自痰標本的銅綠假單胞菌耐藥率明顯高于總耐藥率，對阿米卡星(16.8%)、哌拉西林/他唑巴坦(25.2%)、慶大霉素(27.9%)、妥布霉素(24.5%)具有較低的耐藥率。見表3。

表3 1 123株銅綠假單胞菌耐藥性分析(%)

注：-表示未檢測。

2.4 多重耐藥及泛耐藥菌檢出情況 2012年共檢出多重耐藥菌104株，占43.2%，泛耐藥銅綠假單胞菌17株，占7.1%。2013年共檢出多重耐藥銅綠假單胞菌173株，占46.4%，泛耐藥銅綠假單胞菌34株，占9.1%。2014年共檢出多重耐銅綠假單胞菌239株，占47.0%，泛耐藥銅綠假單胞菌69株，占13.6%。

3 討 論

銅綠假單胞菌是人類重要的條件致病菌，可引起多種類型的急、慢性感染，如肺部感染、傷口感染、尿路感染、血流感染[8]。2012～2014年分別分離銅綠假單胞菌241、373、509株，分離率呈逐年增加趨勢，這可能和近3年本院門診及住院量逐年增高有關。回顧性分析顯示2012～2014年銅綠假單胞菌主要分離自痰(753株，67.1%)、傷口分泌物(179株，15.9%)、中段尿(95株，8.5%)等，說明銅綠假單胞菌主要引起肺部感染、傷口感染、尿路感染、漿膜腔感染、血流感染。

2013～2014年銅綠假單胞菌主要來源于神經外科(255株，22.7%)、呼吸內科(238株，21.2%)、ICU(177株，15.8%)等科室。神經外科、ICU及神經內科多以重癥患者為主，多數患者接受了呼吸機輔助通氣、手術治療、靜脈置管、廣譜抗菌藥物的使用；呼吸內科患者主要以肺部感染多見，而銅綠假單胞菌是引起肺部感染最重要的病原菌之一；傷口感染在創傷骨科較為常見；血液內科患者多數因血液系統疾病而導致免疫力低下容易感染，以上可能是這些科室銅綠假單胞菌分離率較高的原因。

銅綠假單胞菌耐藥機制復雜多樣，主要有染色體表達的頭孢菌素酶、外排泵系統、產β內酰胺酶、氨基糖苷修飾酶、產生生物被膜滲透率減低等[9]。2012～2014年哌拉西林、替卡西林/克拉維酸、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、美羅培南(2012年未檢測)、阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素耐藥率呈逐年增加趨勢，這可能與本院2012～2014年重癥患者收治量逐年增多導致抗菌藥物使用量增加有關。哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、頭孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷類(15.8%～25.8%)具有較低的耐藥率，對氨曲南(47.7%)耐藥率最高，故經驗用藥推薦使用哌拉西林、氨基糖苷類、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟及左氧氟沙星。分離自痰標本的銅綠假單胞菌耐藥率明顯高于總耐藥率，除哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、妥布霉素3種抗菌藥物外，其他抗菌藥物的耐藥率均超過30%，說明呼吸系統銅綠假單胞菌感染耐藥機制更為復雜。結合本院耐藥監測情況及《國家抗微生物治療指南》，肺部感染建議使用哌拉西林/他唑巴坦聯合阿米卡星進行治療。

2012～2014年耐亞胺培南銅綠假單胞菌總檢出率為36.3%，略低于國內報道的39.8%[10]，銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗菌藥物主要耐藥機制為外膜孔道蛋白OprD的缺失及金屬β內酰胺酶的產生[11]。2012～2014年多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌檢出數量及檢出率逐年增加，多重耐藥菌總檢出率為45.9%，明顯高于國外的報道的14.8%，這可能與國外判斷多重耐藥菌選擇多黏菌素有關，而臨床分離的銅綠假單胞菌對多黏菌素耐藥率較低[12]。多重耐藥菌主要分離自神經外科及ICU，這2個科室患者多數存在住院時間較長，也是本院抗菌藥物使用量最大的科室，這可能是導致本院多重耐藥菌分離率較高的另外一個原因。

鑒于本院2012～2014年碳青霉烯耐藥及多重耐藥銅綠假單胞菌檢出數量逐年增加，且檢出率明顯高于文獻報道，這就一方面要求臨床嚴格按照規定合理使用抗菌藥物，加強臨床微生物標本送檢，另一方面要做好多重耐藥菌的監控與管理工作，預防多重耐藥及泛耐藥菌在院內暴發流行。

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Distribution and drug resistance of 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa*

ZHANGJing,SUNHeng-biao,PANZu-han,YOUXu,CHENYou-ming△

(DepartmentofClinicalLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalofSouthernMedicalUniversity，Guangzhou,Guangdong510630,China)

Objective To investigate clinical distribution and drug resistance of Pseudomonas aeruginosa isolated from 2012 to 2014.Methods All of the isolated Pseudomonas aeruginosa strains were identified and tested drug susceptibility.Data were analyzed by using the software WHONET5.6.Results 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa were isolated from 2012 to 2014,most of which isolated from sputum (n=753,67.1%),wound secretion (n=179,15.9%),urine (n=95,8.5%).And the Pseudomonas aeruginosa strains were mainly distributed in neurosurgery (n=255,22.7%),respiratory medicine (n=238,21.2%),ICU (n=177,15.8%),orthopedic trauma (n=84,7.5%).All of the 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa had low drug resistance rates to piperacillin (29.4%),piperacillin/tazobactam (20.9%),cefepime (27.8%),levofloxacin (29.9%),aminoglycosides (15.8%-25.8%),and had the highest drug resistance rate to aztreonam (47.7%).The drug resistance rates of Pseudomonas aeruginosa isolated from sputum samples were significantly higher than the overall resistance rate.The numbers of multi-drug resistant and pan-drug resistant Pseudomonas aeruginosa significantly increased from 2012 to 2014.Conclusion Monitoring drug resistance of Pseudomonas aeruginosa should be strengthened in daily work,so as to reduce and prevent multiple drug resistance and pan-resistant bacteria.

Pseudomonas aeruginosa; drug resistance; multi-drug resistant; pan-drug resistant; rational drug use

廣東省廣州市科技計劃資助項目(2012Y5-00004)。

張婧，女，本科，檢驗技師，從事臨床微生物檢驗工作。△

，E-mail：cym38432@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.20.015

A

1672-9455(2015)20-3009-03

2015-03-14

2015-06-18)