妊娠期高血壓患者血漿中NO、ET-1及MCP-1水平變化及臨床意義分析

陳 巍，周 冰，程 虹

(1.海南省海口市婦幼保健院 570100；2.海南省海口市人民醫(yī)院 570100)

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·論 著·

妊娠期高血壓患者血漿中NO、ET-1及MCP-1水平變化及臨床意義分析

陳 巍1，周 冰1，程 虹2

(1.海南省海口市婦幼保健院 570100；2.海南省海口市人民醫(yī)院 570100)

目的 探討妊娠期高血壓(HDCP)患者血漿中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)及單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)水平變化及臨床意義。方法 選取妊娠期高血壓疾病患者90例按病情輕重分為重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組，另選同期健康妊娠者30例作為對照組，比較血漿中NO、ET-1及MCP-1水平。結(jié)果 重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組收縮壓(SBP)及舒張壓(DBP)較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組較對照組NO水平明顯降低，ET及MCP-1水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組組間NO、ET-1及MCP-1水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；妊娠期高血壓患者血漿中NO、ET-1及MCP-1水平間呈明顯相關(guān)性。結(jié)論 血漿中NO、ET-1及MCP-1水平失衡在HDCP疾病發(fā)生中具有重要作用。

妊娠期高血壓疾病; 一氧化氮; 內(nèi)皮素-1； 單核細(xì)胞趨化蛋白-1

妊娠期高血壓疾病(HDCP)是妊娠期特有疾病，屬于產(chǎn)科常見病。據(jù)報(bào)道，HDCP在我國發(fā)生率高達(dá)9.4%，國外為7%～12%，病死率為46.9/100 000，是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的重要原因[1]。HDCP病因及發(fā)生機(jī)制尚未清楚，可能與血管內(nèi)皮系統(tǒng)形態(tài)及功能異常、子宮-胎盤局部缺血及缺氧、子宮螺旋動(dòng)脈生理性重塑障礙、免疫等因素有關(guān)，血管內(nèi)皮損傷則是HDCP 發(fā)生的中心環(huán)節(jié)[2-3]。研究表明，HDCP可能屬于全身炎性疾病，血管內(nèi)皮損傷是HDCP繼發(fā)心、腦、腎等臟器損害的基礎(chǔ)。因此，本研究檢測妊娠期高血壓患者血漿中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)及單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)水平變化，其中NO是最具代表性的內(nèi)源性舒張因子，ET-1是目前發(fā)現(xiàn)的較強(qiáng)的縮血管物質(zhì)，MCP-1與炎性反應(yīng)過程中單核細(xì)胞浸潤有關(guān)，是一類具有趨化功能的炎性細(xì)胞因子。本研究旨在探討其與HDCP發(fā)生及發(fā)展的關(guān)系，進(jìn)而為HDCP的臨床治療提供參考。現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年3月至2014年6月海口市婦幼保健院收治的HDCP患者90例作為研究對象，根據(jù)病情嚴(yán)重程度分為3組：重度子癇前期組29例，輕度子癇前期組33例,妊娠期高血壓組28例。其中妊娠期高血壓組年齡21～38歲，平均(26.5±3.4)歲，孕周35～39周，平均(37.2±1.3)周；重度子癇前期組年齡23～39歲，平均(27.3±2.9)歲，孕周36～39周，平均(38.1±1.4)周；輕度子癇前期組年齡22～39歲，平均(27.6±2.1)歲，孕周35～38周，平均(36.9±1.2)周。另選同期健康單胎妊娠者30例作為對照組，年齡19～38歲，平均(26.4±2.5)歲，孕周36～40周，平均(38.5±1.2)周，4組人群在年齡及孕周等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬了解所有治療方案并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：所選HDCP患者均為單胎妊娠，且符合樂杰主編《婦產(chǎn)科學(xué)》(第7版)診斷標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期首次出現(xiàn)血壓不低于140/90 mm Hg,產(chǎn)后12周恢復(fù)正常，尿蛋白陰性。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除糖尿病、原發(fā)性高血壓、血液系統(tǒng)疾病及嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙等，無前置胎盤、胎膜早破及急慢性感染等疾病。

1.2 方法 清晨抽取患者空腹外周肘靜脈血6 mL，取2 mL加入肝素抗凝，1 500 r/min離心15 min后取血漿存于-40 ℃冰箱中待測NO水平。另分別取2 mL加入備有40 μL抑肽酶和30 μL 10%乙二胺四乙酸二鈉的試管中，3 000 r/min離心20 min后分離血漿，存于-80 ℃冰箱中待測ET-1及MCP-1水平。采用硝酸還原法測定NO水平，試劑盒由南京建成生物試劑公司提供；ET-1水平測定采用放射免疫法，試劑盒購于北京晶美生物工程公司；MCP-1水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELLSA)，試劑盒由北京尚柏生物試劑公司提供，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 4組人群一般資料比較 4組人群體質(zhì)量指數(shù)(BMI)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組收縮壓(SBP)及舒張壓(DBP)較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組人群一般資料比較

2.2 4組人群血漿NO、ET-1及MCP-1水平比較 相比于對照組，重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組NO水平明顯降低，ET-1及MCP-1水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組NO水平明顯低于輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組，ET-1及MCP-1水平高于輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；輕度子癇前期組較妊娠期高血壓組NO水平降低，ET-1及MCP-1水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 NO、ET-1及MCP-1間相關(guān)性分析 妊娠期高血壓患者血漿中NO與ET-1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.224,P<0.05);NO與MCP-1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.265,P<0.05);ET-1與MCP-1呈正相關(guān)(r=0.512,P<0.05)。

表2 4組血漿NO、ET-1及MCP-1水平比較

3 討 論

HDCP屬于產(chǎn)科常見并發(fā)癥，臨床表現(xiàn)主要包括蛋白尿、水腫及高血壓等，嚴(yán)重者甚至危及孕產(chǎn)婦及圍生兒生命。HDCP發(fā)病病理基礎(chǔ)主要包括肝腎損傷、凝血異常及血管內(nèi)皮細(xì)胞廣泛損傷，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷是HDCP發(fā)生的重要因素。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷后血管內(nèi)皮細(xì)胞過多分泌縮血管因子ET，較少分泌舒血管因子NO。

ET-1是目前發(fā)現(xiàn)的活性最強(qiáng)的內(nèi)源性血管收縮肽，由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成分泌，具有促使血管平滑肌細(xì)胞增殖及收縮血管作用。研究表明，ET-1可侵入胎盤螺旋動(dòng)脈，刺激滋養(yǎng)細(xì)胞遷移，與早期胚胎著床密切相關(guān)。ET-1維持在正常水平時(shí)對正常妊娠有益，明顯升高則可使全身小動(dòng)脈痙攣，在促進(jìn)醛固酮及血管緊張素分泌的同時(shí)增加外周血管阻力，進(jìn)而升高血壓[4]。ET-1升高的可能機(jī)制為妊娠期高血壓患者體內(nèi)存在可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的內(nèi)皮細(xì)胞毒性因子，釋放大量ET-1而促進(jìn)血管收縮，局部缺血、缺氧而進(jìn)一步加重內(nèi)皮細(xì)胞損傷，進(jìn)而形成惡性循環(huán)。

NO是由血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放的一種活性很強(qiáng)的血管舒張因子，具有抑制血小板黏附、聚集及血管平滑肌細(xì)胞生長的作用，可維持健康妊娠時(shí)高血流、低血壓狀態(tài)。研究報(bào)道，健康非孕女性血漿中亞硝酸鹽水平明顯低于健康妊娠女性，NO水平在妊娠早期升高最為顯著，妊娠晚期開始下降，產(chǎn)后恢復(fù)正常，提示妊娠期NO釋放明顯增多[5]。NO亦能通過減弱妊娠大鼠子宮血管對5-羥色胺的反應(yīng)性和血管緊張素Ⅱ?qū)ρ艿氖湛s作用、抑制縮血管物質(zhì)生成間接擴(kuò)張?zhí)ケP血管而增加胎兒氧供[6]。胎盤是合成NO的主要場所，含有大量具有NO合成酶活性的滋養(yǎng)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞。HDCP患者胎盤NO合成酶基因表達(dá)降低，引起NO合成減少而使血管張力調(diào)節(jié)失衡[7]。NO水平降低使子宮、胎盤免疫失調(diào)、缺血及缺氧，進(jìn)而導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂，胎盤循環(huán)系統(tǒng)NO釋放減少，病情進(jìn)一步加重而出現(xiàn)惡性循環(huán)。

NO與ET間的動(dòng)態(tài)平衡可在很大程度上影響內(nèi)皮細(xì)胞功能的完整性，內(nèi)皮細(xì)胞損傷可導(dǎo)致NO與ET間水平失衡。因此，血清ET-1水平和NO濃度的異常改變反映出血管內(nèi)皮功能的異常，血清ET-1水平的升高與NO濃度的降低是HDCP發(fā)病的重要機(jī)制之一。本研究結(jié)果顯示，重度子癇前期組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組NO水平均明顯低于對照組，ET-1及MCP-1水平高于對照組，且NO水平隨病情的加重逐漸降低，ET-1及MCP-1水平升高，符合上述觀點(diǎn)。

MCP-1又稱小誘導(dǎo)細(xì)胞因子A2，屬于趨化因子CC亞族成員，可通過與其受體CCR2作用募集嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及T細(xì)胞至炎性部位，趨化和激活淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞參與炎性反應(yīng)，是血管炎性變化的重要因子。另外，MCP-1亦可激活巨噬細(xì)胞，促進(jìn)組胺及嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒釋放。正常妊娠時(shí)單核細(xì)胞主要分布于絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞基質(zhì)周圍及螺旋動(dòng)脈，妊娠期高血壓患者單核巨噬細(xì)胞則主要分布于螺旋動(dòng)脈周圍，在滋養(yǎng)細(xì)胞與螺旋動(dòng)脈間形成屏障而使之分離。另外，單核巨噬細(xì)胞分泌的TNF-α誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，損傷滋養(yǎng)細(xì)胞侵潤螺旋動(dòng)脈的能力，進(jìn)而影響螺旋動(dòng)脈結(jié)構(gòu)重構(gòu)[8]。因此，MCP-1分布及濃度變化可通過單核細(xì)胞影響滋養(yǎng)細(xì)胞侵入功能[9]。研究表明，動(dòng)脈血管壁細(xì)胞通過旁分泌和自分泌產(chǎn)生大量MCP-1，誘導(dǎo)單核細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜，使血管內(nèi)膜聚集大量炎性細(xì)胞，內(nèi)皮剝脫，妊娠期高血壓的炎性反應(yīng)加深而導(dǎo)致疾病向重度階段發(fā)展[10]。

錢中清等[11]采用Luminex液相芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)HDCP患者外周血中MCP-1表達(dá)明顯高于健康妊娠婦女，HDCP患者血清細(xì)胞因子呈血管受損樣改變及炎性變化。臨床病理研究顯示，異常血管內(nèi)皮細(xì)胞激活或功能障礙是子癇前期發(fā)病的主要原因，而氧化應(yīng)激增強(qiáng)是子癇前期患者內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂的潛在因素[12]。另外，抗氧化劑的使用可以減輕重度子癇前期患者M(jìn)CP-1水平升高趨勢，提示HDCP患者M(jìn)CP-1水平過高可能由氧化應(yīng)激所致。本研究得到妊娠期高血壓組患者M(jìn)CP-1水平明顯高于對照組，且MCP-1與ET-1呈正相關(guān)，提示MCP-1與HDCP發(fā)生密切相關(guān)，MCP-1過多表達(dá)可造成異常血管內(nèi)皮細(xì)胞激活或功能障礙及滋養(yǎng)細(xì)胞侵入障礙。綜上所述，NO、ET-1及MCP-1調(diào)控失衡可能參與了HDCP發(fā)生及發(fā)展過程。在拮抗內(nèi)皮素縮血管作用、促進(jìn)NO釋放的同時(shí)減少血清單核細(xì)胞趨化蛋白的始動(dòng)作用，修復(fù)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷可作為開發(fā)預(yù)防及治療HDCP藥物的新方向。

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Changes and clinical significances of plasma NO,ET-1 and MCP-1 levels in patients with hypertensive disorder complicating pregnancy*

CHENWei1,ZHOUBing1,CHENGHong2

(1.HaikouMunicipalMaternalandChildHealthCareHospital,Haikou,Hainan570100,China;2.HaikouMunicipalPeople′sHospital,Haikou,Hainan570100,China)

Objective To explore the changes and clinical significances of plasma nitric oxide(NO),endothelin-1(ET-1) and monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1) levels in the patients with hypertensive disorder complicating pregnancy(HDCP).Methods 90 patients with HDCP were selected and divided into the severe preeclampsia group,mild preeclampsia group and HDCP group according to the disease condition and contemporaneous 30 normal pregnancy women were chosen as the control group.The levels of plasma NO,ET-1 and MCP-1 were tested and conduct the comparative analysis.Results The systolic blood pressure(SBP) and diastolic blood pressure(DBP) of the HDCP group,mild preeclampsia group and severe preeclampsia group were significantly higher than those of the control group,the differences were statistically significant(P<0.05)；the NO level of the HDCP group,mild preeclampsia group and severe preeclampsia group were significantly lower than that of the control group,while the levels of ET-1 and MCP-1 were decreased,the differences were statistically significant(P<0.05)；the levels of NO,ET-1 and MCP-1 had statistically significant difference among 3 groups(P<0.05)；the levels of plasma NO,ET-1 and MCP-1 in the patients with HDCP showed the obvious correlation.Conclusion The imbalance of plasma NO,ET-1 and MCP-1 plays an important role in the occurrence of HDCP.

hypertensive disorder complicating pregnancy; nitric oxide; endothelin-1; monocyte chemoattractant protein-1

海南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(812178)。

陳巍，女，主治醫(yī)師，本科，主要從事產(chǎn)科方面的研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.15.004

A

1672-9455(2015)15-2148-03

2015-02-18

2015-04-16)