372例腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗研究

張軍艷，何啟強，陸明海，任慧玲

(1.湖北省十堰市中醫醫院檢驗科 442012；2.武漢大學醫學部公共衛生學院，武漢 430072;3.湖北汽車工業學院校醫院，湖北十堰 442012)

?

·論 著·

372例腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗研究

張軍艷1,2，何啟強2，陸明海1，任慧玲3△

(1.湖北省十堰市中醫醫院檢驗科 442012；2.武漢大學醫學部公共衛生學院，武漢 430072;3.湖北汽車工業學院校醫院，湖北十堰 442012)

目的 探討糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物的耐藥性。方法 十堰市中醫院2010年1月至2014年1月檢出的372例腸球菌(280例糞腸球菌和92例屎腸球菌)，對青霉素、紅霉素、氯霉素、萬古霉素、利奈唑胺等16種抗菌藥物的藥敏試驗結果進行統計分析。結果 糞腸球菌和屎腸球菌耐藥率最高的均是紅霉素，分別為86.07%和92.39%，差異無統計學意義(P>0.05)，耐藥率最低的均是利奈唑胺，分別為0.36%和1.09%，差異無統計學意義(P>0.05)。在青霉素、氨芐西林、他唑巴坦、奈替米星、環丙沙星和呋喃妥因等6種抗菌藥物中，糞腸球菌的耐藥率明顯高于屎腸球菌，差異有統計學意義(P<0.05)，而在氯霉素和高濃度鏈霉素中，糞腸球菌的耐藥率明顯低于屎腸球菌，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物有不同程度的耐藥性，且耐藥率有差異。

屎腸球菌； 糞腸球菌； 耐藥； 抗菌藥物； 藥敏試驗

腸球菌廣泛存在于人體腸道內，當廣泛應用免疫抑制劑或手術等創傷時，容易出現腸球菌的感染[1]。由于抗菌藥物的大量應用，腸球菌也逐漸成為一類多重耐藥性致病菌。腸球菌中最常見的就是糞腸球菌和屎腸球菌，現通過2種腸球菌對16種抗菌藥物進行藥敏試驗分析。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至2014年1月在十堰市中醫院就診的患者尿液、傷口分泌物、體液、血液等檢出的402株腸球菌，其中分離出糞腸球菌和屎腸球菌共372例。2011年120株，糞腸球菌96株，屎腸球菌24株；2012年129株，糞腸球菌98株，屎腸球菌31株；2013年123株，糞腸球菌86株，屎腸球菌37株。糞腸球菌共有280例，屎腸球菌共有92株。

1.2 儀器與試劑 瓊脂平板、血平板等。青霉素、氨芐西林、奈替米星、環丙沙星、他唑巴坦、替考拉寧、利福平、高濃度慶大霉素(500 μg/mL)、呋喃妥因、高濃度鏈霉素(2 000 μg/mL)、萬古霉素、利奈唑胺、四環素、氯霉素、紅霉素、亞胺培南16種抗菌藥物，將糞腸球菌ATCC 29212作為質控菌株。

1.3 方法 每次檢出的菌株均經冷凍保存，進行試驗時將其融化，接種于涂抹新鮮羊血的瓊脂平板上，并將溫度調節至35 ℃，先培育18～24 h，再轉種血平板上進行孵育，時間18～24 h。將培養好的待測菌株制成菌細胞懸液接種在帶藥液的瓊脂平板上，35 ℃恒溫，培育18 h觀察結果，如有細菌生長，則判定為耐藥。若未見細菌生長，需繼續培養至24 h,如有細菌生長，則判定為耐藥，反之，則判定為對該抗菌藥物敏感[2]。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件進行分析，計數資料使用百分率，組間比較應用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 16種抗菌藥物藥敏試驗結果比較 糞腸球菌耐藥率從高到低依次為：紅霉素、高濃度鏈霉素、利福平、奈替米星、高濃度慶大霉素、四環素、環丙沙星、青霉素、氨芐西林、亞胺培南、他唑巴坦、氯霉素、呋喃妥因、替考拉寧、萬古霉素、利奈唑胺。紅霉素耐藥率最高，為86.07%，利奈唑胺最低，為0.36%。屎腸球菌耐藥率從高到低依次為：紅霉素、奈替米星、環丙沙星、利福平、他唑巴坦、氨芐西林、亞胺培南、高濃度慶大霉素、青霉素、高濃度鏈霉素、四環素、呋喃妥因、氯霉素、萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺。紅霉素耐藥率最高，為92.39%，利奈唑胺最低，為1.09%。

2.2 糞腸球菌和屎腸球菌藥敏試驗結果比較 青霉素、氨芐西林、他唑巴坦、奈替米星、環丙沙星、呋喃妥因等6種抗菌藥物中，糞腸球菌的耐藥率明顯高于屎腸球菌，差異有統計學意義(P<0.05)，而氯霉素和高濃度鏈霉素中，糞腸球菌的耐藥率明顯低于屎腸球菌，差異有統計學意義(P<0.05)。3年中2種腸球菌的耐藥率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 2種腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗結果比較[n(%)]

3 討 論

近年來抗菌藥物的濫用，由腸球菌引起的院內感染特別嚴重。腸球菌的檢出率以糞腸球菌和屎腸球菌較高，約90.00%以上。本組糞腸球菌和屎腸球菌的總檢出率為92.54%，與其他研究文獻有一致性[3-4]。

藥敏試驗是檢驗科工作中最常見的基礎檢驗手段，也是指導臨床合理用藥的一種重要檢驗方法。本研究通過對16種常見抗菌藥物的藥敏試驗結果表明，糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物均有不同程度的耐藥性。最高耐藥率和最低耐藥率差異較大。最高耐藥率是紅霉素等大環內酯類以及阿米卡星等氨基糖苷類抗菌藥物，對萬古霉素和利奈唑胺等“特殊級”抗菌藥物的耐藥率則很低。本組結果顯示，該院近3年內抗菌藥物的耐藥情況與全國其他地區有相似之處[5]。但也有研究報道，腸球菌屬中糞腸球菌對絕大多數抗菌藥物(氯霉素除外)的耐藥率均顯著低于屎腸球菌[6]。

除藥敏試驗外，近年來對耐藥細菌還進行基因方面的檢測，耐藥基因檢測能為細菌的耐藥機制以及流行病學提供更多的實驗室數據[7-10]。由于設備的限制，很多實驗室都不具備基因檢測手段，因此，藥敏試驗因其簡單、操作可行性大依然成為大多數實驗室進行耐藥試驗的檢驗手段。

正常臨床檢驗中，藥敏試驗通常不需要選擇較多的抗菌藥物。美國臨床實驗室標準委員會建議的標準是慶大霉素、青霉素(半合成類青霉素，如氨芐西林)、萬古霉素。有關研究認為，根據腸球菌檢出部位的不同而有所不同，如泌尿系統進行磺胺類藥物和呋喃妥因等，而非泌尿系統則進行青霉素類的藥敏試驗；如對青霉素耐藥，則進行萬古霉素藥敏試驗[11]。本研究細菌藥敏試驗具有臨床意義，可為抗菌藥物耐藥性的研究提供一定的實驗室依據。

[1]高屹.腸球菌的耐藥特點及藥敏試驗方法[J].中華醫學檢驗雜志，1998，21(2)：119-121.

[2]李爽,張正.糞腸球菌與屎腸球菌藥敏表型和耐藥基因的比較[J].臨床檢驗雜志，2005,23(3):174-176.

[3]劉敏，董躍明，徐愛群，等.腸球菌臨床感染情況和藥物敏感性分析及耐萬古霉素腸球菌耐藥基因研究[J].國際檢驗醫學雜志，2013,34(18)：2392-2393.

[4]孫淑紅,胡曉峰,馮尚彩,等.尿路感染患者腸球菌的分布特征及耐藥性分析[J].中華泌尿外科雜志,2014,35(3):216-221.

[5]劉靜,楊靖嫻,王樹琴,等.2007～2010 年糞腸球菌、屎腸球菌耐藥性變遷分析[J].國際檢驗醫學雜志，2011,32(8)：838-840.

[6]胡付品,朱德妹,汪復,等.2013年中國CHINET細菌耐藥性監測[J].中國感染與化療雜志,2014,21(5):365-374.

[7]張俠家,沈繼錄,賈偉華,等.耐萬古霉素腸球菌耐藥表型檢測和基因型分析[J].安徽醫科大學學報,2014,15(5):662-664.

[8]熊輝,鄭波,王珊,等.急診科分離的萬古霉素耐藥腸球菌的耐藥性與同源性研究[J].中國臨床藥理學雜志,2011,27(11):819-821.

[9]楊靖嫻,劉靜,邵冬華,等.耐萬古霉素腸球菌的耐藥與毒力基因檢測[J].實用醫學雜志,2014,30(1):132-136.

[10]徐韞健,梁權輝,劉長連,等.氨基糖苷類高水平耐藥腸球菌的耐藥及分子機制的研究[J].中國實驗診斷學,2013,17(10):1845-1849.

[11]Qi C,Zheng X,Obtas A,et al.Comparision of testing methods for detection of decreased linezolid susceptibilitydue to G2576T mutation of the 23S rRNA gene in Enterococcus faecium and Enterococcus faecalis[J].J Clin Microbiol,2006,44(3):1098-1110.

Drug Sensitive Analysis of Enterococcus towards Sixteen Antibacterials of Our Institute in Nearly Three Years

ZHANGJun-yan1,2,HEQi-qiang2,LUMing-hai1，RENHui-ling3△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory，HospitalofTraditionalChineseMedicineofShiyanCity,Shiyan,Hubei442012,China;2.DepartmentofPublicHealth,SchoolofMedicine,WuhanUniversity,Wuhan,Hubei430072,China;3.DepartmentofSchoolHospital,HubeiAutomotiveIndustriesInstitute,Shiyan,Hubei442012,China)

Objective Discuss drug resistance of enterococcus faecium and enterococcus faecalis to sixteen antibiotics.Methods Experiment with drug sensitivity of 372 types of entrococcus (including 280 enterococcus faecium and 92 enterococcus faecalis) were detected to sixteen antibiotics such as penicillin,erythrocin,chloramphenicol,vancomycin,linezolid etc.from Jan.2010 to Jan.2014.The data were analized.Results In nearly three years,the highest resistance rate of enterococcus faecium on erythrocin is 86.07%,the lowest on linezolid is 0.36%.The highest resistance rate of enterococcus faecalis on erythrocin is 92.39%,the lowest on linezolid is 1.09%.The resistance rate of enterococcus faecium is significantly higher than the enterococcus faecalis (P<0.05) among six antibiotics such as penicillin,ampicillin,tazobactam,netilmicin,ciprofloxacin and macrodantin,however,the resistance rate of enterococcus faecium is significantly lower than the enterococcus faecalis (P<0.05) among chloramphenicol and high concentrations of streptomycin.Conclusion Enterococcus faecium and enterococcus faecalis have varying degrees of multi-antibiotic resistance for sixteen antibiotics.

enterococcus faecium; enterococcus faecalis; antibiotic resistance; antimicrobial susceptibility test

張軍艷，女，碩士，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。△

，E-mail:475077981@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.037

A

1672-9455(2015)14-2063-02

2014-12-25

2015-02-22)