ELISA與組織學檢測法檢測慢性胃炎患者大便HP抗原陽性率比較

王純明,賈東明,張寶偉

(山東省棗莊市嶧城區人民醫院 277300)

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·臨床探討·

ELISA與組織學檢測法檢測慢性胃炎患者大便HP抗原陽性率比較

王純明,賈東明,張寶偉

(山東省棗莊市嶧城區人民醫院 277300)

目的 比較酶聯免疫吸附試驗(ELISA)與組織學檢測法檢測慢性胃炎患者大便幽門螺桿菌(HP)抗原的陽性率。方法 選取2012年5月至2015年5月棗莊市嶧城區人民醫院收治的慢性胃炎患者80例，依據治療方法將這些患者分為兩組，研究組(n=40)和對照組(n=40)。對照組患者采用組織學檢測法檢測，研究組患者采用ELISA檢測，然后對兩組患者大便HP抗原陽性率進行統計分析。結果 研究組患者HP抗原的敏感度、特異度、準確率、陽性率分別為96.7%(29/30)、90.0%(9/10)、97.5%(39/40)、77.5%(31/40)，對照組患者HP抗原的敏感度、特異度、準確率、陽性率分別為90.0%(27/30)、70.0%(7/10)、90.0%(36/40)、75.0%(30/40)。兩組患者抗原陽性率之間差異無統計學意義(P>0.05)。結論 ELISA檢測慢性胃炎患者大便HP抗原陽性率比組織學檢測法略高，同時具有較高的敏感度、特異度及準確率，在普查和診斷慢性胃炎患者HP感染中極為實用。

酶聯免疫吸附試驗；組織學檢測法；慢性胃炎；大便HP抗原；陽性率

HP感染是慢性胃炎患者一個主要致病因素，同時直接而深刻地影響消化性潰瘍、胃癌[1]。很多方法均能夠有效檢測HP，介入性和非介入性是其中兩種主要的類型。介入性檢測方法包括組織檢測法、聚合酶鏈反應(PCR)及快速尿素酶試驗(RUT)等；非介入性檢測方法包括血清學試驗及尿素呼氣試驗(14C-UBT)[2]。近年來，在大便HP抗原檢測中，ELISA興起并在臨床得到了日益廣泛的應用[3]。本研究對2012年5月至2015年5月本院收治的慢性胃炎患者80例的臨床資料進行了統計分析，比較了ELISA與組織學檢測法檢測慢性胃炎患者大便HP抗原的陽性率，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年5月至2015年5月本院收治的慢性胃炎患者80例，所有患者近1個月內均沒有服用過抗菌藥物、質子泵抑制劑等干擾HP檢測的藥物，均知情同意。將有全身性嚴重疾病、胃十二指腸手術史等的患者排除在外[4]。依據治療方法將這些患者分為兩組，研究組(n=40)和對照組(n=40)。研究組男26例(65.0%)，女14例(35.0%)，年齡21～71歲，平均(46.5±10.4)歲;對照組男24例(60.0%)，女16例(40.0%)，年齡20～70歲，平均(45.2±10.3)歲。兩組患者一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法 對照組患者采用組織學檢測法檢測，具體操作為：讓患者用潔凈干燥的專用容器留取2～3 g大便，第一時間放置在-20 ℃冰箱中備用，盡可能在1 d內完成檢測。將胃竇處一份組織取出來進行組織學檢查，檢查過程中應用胃鏡，先將組織固定下來，固定過程中用福爾馬林，然后切片、Warthin-Starry染色、鏡檢，黑褐色是染HP的顏色，弧形，將背景設定為棕黃色。研究組患者采用ELISA檢測，具體操作為：檢測前從冰箱中取出試劑及標本，恢復到室溫。在一潔凈干燥的塑料試管內加入400 μL稀釋液，在其中加入0.1 g左右的大便，充分混勻，將100 μL混懸液準確吸取出來，在板孔內滴入，該板孔被抗體包被，然后將2滴酶標抗體液加入，同時將2空孔設定出來，其中一孔設定為陰性對照，另一孔設定為陽性對照。進行1 h孵育，孵育環境為室溫，進行3次洗板，洗板在自動洗板機上進行，拍干，加入2滴底物液，進行10 min孵育，孵育環境也為室溫，將2滴終止液加入其中，混勻后采用北京協和藥業有限公司生產的批號為3401036的HP抗原檢測試劑盒，在ELx-808全自動酶標儀(美國寶特儀器有限公司)上將吸光度A值讀取出來，將波長設定為450 nm。如果A值在1.50以上，則評定為陽性；如果A值在1.20～1.50，則評定為中介，需要復查；如果A值在1.20及以下，則評定為陰性。

1.3 統計學處理 統計處理結果時采用統計學軟件SPSS20.0，兩種方法陽性率差異比較采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者HP抗原陽性率比較 見表1。研究組患者HP抗原陽性率為77.5%(31/40)，對照組患者HP抗原陽性率為75.0%(30/40)，兩組患者抗原陽性率差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 兩組患者HP抗原陽性結果比較[n(%)]

2.2 兩組患者HP抗原敏感度、特異度、準確率結果 研究組患者HP抗原敏感度、特異度、準確率分別為96.7%(29/30)、90.0%(9/10)、97.5%(39/40)；對照組分別為90.0%(27/30)、70.0%(7/10)、90.0%(36/40)。

3 討 論

1982年，臨床首次發現了HP，自此，臨床不斷深入地研究和探索了HP[5]。HP對人類的危害主要體現在以下3個方面：(1)引發頑固性口臭；(2)引發胃炎及胃潰瘍；(3)引發胃癌[6]。相關醫學研究表明，慢性活動性胃炎達到了95%的HP感染率[7]。細胞在HP作用下會過度增生，將癌基因激活，引發基因突變，最終引發胃癌。同時，口腔黏膜也是HP定居的位置，促進尿素酶產生，分解口腔正常菌群產生的尿素，釋放出氧，進而促進頑固性口臭發生。為了最大限度地降低HP的危害，臨床應該盡可能早地對患者進行準確診斷和治療，而臨床病情分析結合實驗室檢查是對HP感染進行診斷的最好方法。

很多實驗室方法均能有效檢測HP，包括介入性和非介入性兩類，組織學檢測、血清抗體檢查等是臨床通常采用的檢測方法。每種方法均有自身的特點，快速尿素酶(RUT)試驗具有簡便的操作方法，臨床可以以較快的速度、在較短時間內將結果檢測出來，且結果準確，能夠在胃鏡檢查過程中取材，但是取材部位、菌量多少等均會對結果造成直接而深刻的影響。同時在細菌局灶性分布情況下極易發生假陰性，而UBT具有準確的結果和簡單的操作，有效克服掉了RUT試驗的不足，但是其在臨界值缺乏可靠的結果。流行病學調查中經常采用血清抗體檢查，所采用的試劑盒不同，測定結果也會不同。組織學檢測具有極高的敏感度和特異度，但是所采用的染色方法不同，所得到的結果也不同，其具有繁瑣的步驟和較高的費用，因和RUT試驗由于具有較高的特異度和準確率，因此,在HP實驗室檢查中被定為金標準[8]。

在大便HP抗原檢測中，ELISA屬于一種非介入性方法，該檢測方法被首次報道于1997年，報道者為美國胃腸病協會，其和14C-UBT有許多相同的優勢，因此在臨床受到了普遍認可和接受。其檢測原理為在感染HP的情況下，胃黏膜更新脫落，進入消化道，隨糞便排出，于是大便便有了HP抗原，對HP抗原進行測定，測定過程中運用酶標雙抗體夾心法，HP感染的標準為陽性。測定結果幾乎不會受到抗菌藥物、質子泵抑制劑等的干擾。其又比14C-UBT具有更多的優勢，如14C-UBT具有放射性，會對人體造成一定程度的危害，所用檢測儀器極為昂貴，患者需要承受較為沉重的經濟負擔，對呼氣動作有特殊要求。通常情況下由于該要求無法得到兒童呼氣的滿足而對結果造成極大的不良影響，而14C-UBT的這些局限性被ELISA有效克服。血清抗體檢查敏感度較高，但是由于血清中的抗體水平通常情況下不同步于病情，因此臨床診斷中很少采用該方法[9]。

和組織學檢測法相比，ELISA具有較低的特異度及準確率，但是組織學檢測法屬于介入性方法，在對標本進行采集的過程中需要行胃鏡操作，要求采集者具有較高的技術，同時還會使患者承受一定程度的身體和精神壓力，尤其是兒童，其通常無法積極有效地配合，在這種情況下，臨床就很難進行操作。在大便HP抗原檢測中，ELISA具有較高的敏感度、特異度及準確率，同時屬于非介入性方法，具有取材方便的優點，患者不需要忍受痛苦，因此易被患者所接受[10]。本研究結果表明，研究組和對照組患者抗原陽性率之間差異無統計學意義(P>0.05)，充分證實了這一點。

總之，ELISA檢測慢性胃炎患者大便HP抗原陽性率比組織學檢測法略高，同時具有較高的敏感度、特異度及準確率，在普查和診斷慢性胃炎患者HP感染中極為實用。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.23.058

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1672-9455(2015)23-3584-03

2015-04-25

2015-07-11)