蒙藥材懸鉤子木黃酮類成分的研究

朝木日麗格等

【摘 要】 目的：研究庫葉懸鉤子正丁醇層的化學成分。方法：采用反相HPLC分離純化，通過核磁共振分析鑒定其化學結構。結果：從庫頁懸鉤子正丁醇層分離得到槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV）4個化合物。結論：以上化合物均首次從該種植物中分離得到。

【關鍵詞】 蒙藥材；懸鉤子木；正丁醇層；黃酮

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）04-0019-02

蒙藥材懸鉤子木為薔薇科懸鉤子屬植物庫葉懸鉤子（Rubus sachalinensis Leveille）的去皮去心干燥莖枝，具有促熟疫、清除騷熱、止咳、調元之功效[1]，是蒙醫基礎方四味土木香散組方藥材之一，但其化學成分和生物活性未見報導。為探索該植物的有效活性成分，對庫葉懸鉤子的乙醇提取物正丁醇萃取部位進行化學成分分離研究，薄層結果顯示正丁醇部位含有黃酮類化合物，通過進一步的色譜分離，鑒定4個化合物，分別為：槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV）。

1 儀器與材料

1.1 植物來源 蒙藥材懸鉤子木采自內蒙古通遼市扎旗罕山自然保護區，由內蒙古醫科大學藥學院包保全教授鑒定為薔薇科懸鉤子屬庫頁懸鉤子（R. Sachalinensis Leveille），除去外皮，切段，曬干。

1.2 儀器半制備 HPLC：Shim-pack PRC-ODS、制備柱250mm（20mm，15μm）、YMC-pack ODS A 250mm（10mm，5μm）、SHIMADZU RID-10A檢測器、LC-6AD泵、CTO-20A柱溫箱、C-R8A積分儀；高效液相色譜儀：Inertsil ODS-SP柱 250mm（4.6mm，5μm）、SHMADZU RID-20A檢測器、SIL-20A自動進樣器、LC-20AT泵、CTO-10AS柱溫箱、CBM-20A控制器）；核磁共振儀（BRUKER公司AVANCE-600）；EYELAN-1100旋轉蒸發儀（上海愛郎儀器有限公司）；電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司）；HP-20大孔樹脂；Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠。

2 提取分離

取庫葉懸鉤子干燥莖枝5.05kg粉碎，用95%乙醇回流提取1次，75%乙醇回流提取3次，每次2h；減壓回收乙醇溶劑，得浸膏924g，以上浸膏加水懸浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等溶劑等比萃取，回收溶劑，得正丁醇提取物224g；取正丁醇提取物經過HP-20柱，依次用水、40%乙醇、55%乙醇、70%乙醇、85%乙醇、95%乙醇洗脫，得到6個洗脫部分；回收洗脫乙醇溶劑，得浸膏分別為90.6g、121.7g、48.2g、4.3g、3.2g、3.6g；40%乙醇浸膏、55%乙醇浸膏分別取2g，加甲醇溶解，經LH-20柱甲醇洗脫，每5ml為一個流分，點薄層硅膠板，顯色，合并相同斑點，回收甲醇，經反相HPLC分離，從40%乙醇流分中分離得到化合物I（23mg）、II（10.7mg）、III（3mg）；從55%乙醇流分中分離得到化合物IV（10.93mg）。

3 化合物結構解析

Compound 1 黃色無定型粉末。1H-NMR給出黃酮母核上的氫信號信號，δ： 6.18 （1H，s）、 6.36 （1H，s）、7.57 （2H，d，8.4）、6.82 （1H，dd，8.4），判斷是黃酮類化合物，δ： 5.21 （1H，d，7.8）、3.47 （1H，t，9.0）、3.51 （1H，t，9.0）、3.56 （1H，t，9.0）、3.76 （1H，dd，9.6）為糖上氫信號，δ5.21 （1H，d，7.8） 表明β糖端基氫信號連在黃酮母核三位上，δ3.63 （3H，s） 給出氧甲基氫信號；13C-NMR給出2個羰基碳信號δ： 179.2和170.7，糖端基碳信號δ： 104.8和糖鏈上的其他碳信號75.3、77.0、72.7、77.3、170.7，δ： 52.8為氧甲基碳信號，故鑒定為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（quercetin-3-O-β-D-glucuronide methylester）。分子式為C22H20O13。其波譜數據與文獻[2]中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯，基本一致。

Compound 2 黃色無定型粉末，鹽酸-鎂粉反應呈陽性。1H-NMR給出黃酮母核上的氫信號δ： 7.92 （2H，d，8.4）、6.76 （2H，d，8.4）、6.10 （1H，s）、6.29 （1H， s），糖端基氫信號δ： 5.13 （1H，d，7.2）。13C-NMR給出2個羰基碳信號δ： 179.2、179.2，黃酮母核上的碳信號δ： 159.4、135.3、163.0、100.2、158.6、95.0、161.6、105.4、122.5、132.3、116.0、161.6糖端基碳信號δ： 104.8和糖上的其它碳信號δ： 75.3、77.0、72.7、77.3、170.5，故鑒定為山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（kaempferol-3-O-β-D-glucuronide methylester）。該化合物結構式為C22H20O12，其波譜數據與文獻[3]中與山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯基本一致。

4 結果與討論

從庫頁懸鉤子正丁醇層分離得到4個黃酮類化合物，經結構鑒定分別為槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（I）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯（II）、槲皮素（III）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯（IV），以上化合物均首次從本種植物庫頁懸鉤子中分離得到。庫頁懸鉤子臨床應用歷史悠久，資源豐富，是一個極具開發潛力的蒙藥材。以上研究為蒙藥材懸鉤子木生物活性、質量標準研究提供了科學依據。

參考文獻

[1]蒙古學百科全書編輯委員會《醫學卷》編輯委員會編.蒙古學百科全書·醫學卷[M].呼和浩特：內蒙古人民出版社，2002，4：305-306.

[2]高麗梅，吳立軍，黃健.板栗花的化學成分[J].沈陽藥科大學學報，2010，27（7）：544-562.

[3]郭啟雷，楊俊山，劉建勛.掌葉覆盆子的化學成分研究[J].中國藥學雜志，2007，42（15）：1141.

[4]趙超，陳華國，龔小見.杠板歸的化學成分研究[J].中草藥，2010， 41（3）：365-367.

（收稿日期：2014.11.19）