傣藥雅解沙把對高脂血癥小鼠降脂作用研究

王磊等

【摘 要】 目的：觀察雅解沙把對蛋黃乳致高脂血癥小鼠血清的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白-膽固醇（HDL–C）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL–C）的影響。方法：健康ICR小鼠100只，隨機分為5組：正常對照組、模型組、辛伐他丁陽性組（0.02g/kg）、雅解沙把高劑量組、雅解沙把低劑量組。除正常組、模型組灌胃給予相同體積蒸餾水外，其余組灌胃給予相應藥物。蛋黃乳劑復制小鼠高脂血癥模型，觀察小鼠血清TC、TG、HDL–C、LDL–C水平變化。結果：與模型組比較，雅解沙把組能顯著降低小鼠血清TC、TG水平。結論：雅解沙把對高脂血癥模型小鼠具有一定的降血脂作用。

【關鍵詞】 傣藥；雅解沙把；高脂血癥；解脂毒

【中圖分類號】R285.5 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）04-0021-03

The effect research of Dai medicine Yajieshaba on solving lipid toxicity in the hyperlipemia model mice

WANG Lei DUAN Xiao-hua YIN Hong CHEN Pu CHEN Qing-hua ZHANG Chao*

Yunnan University of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650500， China

Abstract：Objective To investigate the effects of Yajieshaba on egg yolk milk induced hyperlipemia mice serum total cholesterol（TC）， triglyceride（TG）， high-density lipoprotein cholesterol（HDL-C）， low density lipoprotein cholesterol （LDL-C）. Methods Healthy 100 ICR mice are randomly divided into 5 groups： normal control group， model group， simvastatin positive group （0.02g/kg）， high dose group of Yajieshaba， low dose group of Yajieshaba. In addition to the normal group， model group are intragastrically administered the same volume of distilled water， the other group are intragastrically administered with corresponding drugs. Egg yolk emulsion replicate mice hyperlipidemia model and observe the mice serum TC， TG ， HDL–C， LDL–C level changes. Results Compared with model group， Yajieshaba group can significantly reduce serum TC， TG level in mice. Conclusion Yajieshaba has a certain reducing blood lipid in hyperlipidemia model mice.

Keywords：Dai medicine； Yajieshaba； Hyperlipidemia； Solving lipid toxicity

傣醫認為“雅解（解藥）”具有調節人體生理功能、解除人體的各種毒素、保持體內功能的平衡和協調的功效。雅解，即解藥之意，是傣醫常用的特色藥物之一，是傣族醫學中最具特色的藥物及治療方法之一，已成為傣族醫學體系中的重要組成部分[1]。在長期醫療實踐經驗的積累過程中，傣族人民發現上百種解除各種毒物及有害物質的藥物及方劑，統稱為“雅解”[2]。雅解方藥在臨床應用十分廣泛[3]。“解藥”在傣族地區具有使用面廣、療效較好、家喻戶曉、歷史悠久的特點，從古至今，在傣族民間家家都備有不同的“解藥”。幾千年來傣族人在應用“解藥”方面總結了許多的經驗，認為解藥具有調節人體的生理功能，解除人體的各種毒素，保持體內“四塔”（風、火、水、土）、“五蘊”（色、識、受、想、行）功能的平衡和協調，解毒養顏之功[4]。“未病先解”、“先解后治”是傣醫獨特的治療疾病的“解毒”理論，是歷代傣醫經過長期的臨床探索與實踐的經驗總結[5]。通過實地調研、收集、整理西雙版納州傣醫院等單位進行的初步臨床研究，結果表明：雅解沙把有解食物毒、藥物毒、酒毒、煙毒、毒蟲毒、熱毒等作用。本實驗在傣醫雅解理論的指導下，主要是以蛋黃乳復制急性高脂血癥模型為研究對象，擬探討“雅解沙把”對蛋黃乳所致小鼠脂毒是否有解毒的作用，為其解毒機制研究奠定基礎，以期為臨床安全、合理用藥提供理論依據，同時為雅解理論及雅解臨床應用提供實驗依據。

1 實驗材料

1.1 藥物與試劑 “雅解沙把”（百解膠囊），滇藥制字（Z）20082252K，0.2g×60粒/瓶，5粒/次，每日3次；云南省西雙版納州傣醫院院內制劑，由西雙版納州傣醫院提供；辛伐他汀片（杭州默沙東制藥有限公司，批號：20090001）；總膽固醇測定試盒TC（南京建成生物工程研究所，批號：140551）；甘油三酯測定試劑盒TG（南京建成生物工程研究所，批號：140551）；高密度脂蛋白測定試劑盒 HDL–C（南京建成生物工程研究所，批號：140551）；低密度脂蛋白測定試劑盒 LDL–C（南京建成生物工程研究所，批號：140551）；蛋黃乳液（75%）。

1.2 動物 健康ICR小鼠，雌雄各半，體重（20±2g），由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供，合格證號：SCXK（川）2008-24，合格批號：OO14345；飼養以鼠糧、自來水，置于動物飼養箱內，以鋸末作籠墊，室溫（21±1）℃，光周期12L∶12D條件下飼養；適應一周后開始實驗。

1.3 儀器 酶標儀（Infinite M200 PRO，瑞士Tecan公司）；分析天平（型號：AL104METTLER TOLEDO，Switzerland，0.0001g）；高速低溫離心機（CF16 RXⅡseries，HITACHI公司）；電動玻璃勻漿機（DY89-Ⅱ型，寧波新芝生物科技股份有限公司）；數字恒溫水浴鍋（HH-S28S，金壇市大地自動化儀器廠）。

2 方法

2.1 雅解沙把提取物的制備 取“雅解沙把”生藥粉末500g放置于不銹鋼鍋中，分三次加入5倍、3倍、2倍體積的70%乙醇50℃水浴溫浸24h，過濾，將三次濾液合并，旋轉蒸發儀上濃縮成稠浸膏，置于4℃冰箱中冷藏保存備用，臨用前按劑量現配至所需濃度。

2.2 試劑劑量設置與配制 蛋黃乳液的配制：取1～2d的新鮮雞蛋，除去蛋清，用消毒生理鹽水攪拌混勻，配成75%的蛋黃乳液備用，4 ℃ 貯藏備用[6]。

原雅解沙把的濃度為：“雅解沙把”70%醇煎提取、過濾制備稠浸膏，其中含有生藥2g/ml溶液，臨用時稀釋成不同質量濃度備用。動物注射蛋黃乳后最佳取血點的確認：取體重（20±2）g的健康ICR小鼠30只，按體重與性別隨機分到5組，每組6只，正常對照組腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只），其余4組腹腔注射75%蛋黃乳（0.5ml/只），每組分別于注射后0、6、12、18、24、48h后小鼠眼眶靜脈叢取血，離心后測定血清TC、TG，找尋小鼠注射蛋黃乳液后膽固醇升高到極大值所對應的時間點[7]。

2.3 高脂血癥模型復制 參考文獻方法[8-10]，除正常對照組腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只）外，其余4組腹腔注射75%蛋黃乳（0.5ml/只），注射后雄性小鼠20h或者雌性小鼠5h后，末次給藥后1h，摘取眼球取血，取血前禁食不禁水12h。

2.4 實驗分組與給藥 取100只（體質量18～22g，雌雄兼用）健康ICR小鼠，適應性喂養1周后，隨機分成5組。分組為：正常對照組、模型對照組、陽性對照組（辛伐他汀片20mg/kg）、雅解沙把高劑量組、雅解沙把低劑量組，每組20只。每只小鼠按0.2ml/10g灌胃給藥，正常對照組和模型組灌胃給予等體積蒸餾水；給藥組灌胃于相應組的藥物，給藥前禁食不禁水12h，連續給藥7d。

2.5 實驗用藥劑量的選定 雅解沙把劑量組的配制：雅解沙把（百解膠囊）臨床用量：0.2g*5粒*3次=3g/人-1·d-1藥物濃度設置為等效量、9倍等效量兩個劑量。根據人和動物的體表面積折算法，計算得出“雅解沙把”小鼠口服給藥的等效量為0.39g/kg，再參考實驗組前期所完成的“雅解沙把”抗炎實驗的有效劑量（P<0.05）為9倍臨床等效劑量，故本實驗小鼠選擇3.51g/kg、0.39g/kg為高、低劑量。

2.6 指標檢測

2.6.1 一般情況 實驗期間每天稱體重，觀察小鼠食欲行為、糞便、毛發及死亡情況，做好記錄，實驗結束時處死小鼠，稱量體重。

2.6.2 血清樣品制取 末次給藥后1h，小鼠摘取眼球取血，以3600r/min離心10min分離血清，離心溫度設置為4℃，樣本放置于4～8℃可穩定7d，-20℃可穩定一個月。

2.6.3 實驗樣品測定 按總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒說明書，依次測定血清中總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇含量，并做好記錄。

2.7 數據統計與處理 采用SPSS16.0數據軟件進行分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，數據方差齊進行組間t檢驗；方差不齊進行組間t′檢驗。組間差異比較采用t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

3 結果

不同劑量雅解沙把醇提物對蛋黃乳致高脂血癥小鼠血脂水平的影響，分別測定各組實驗小鼠血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），實驗與分析結果如下。

3.1 雅解沙把對蛋黃乳致小鼠高脂血癥TC、TG含量影響比較 模型組與正常組相比，模型組小鼠血清的TC、TG濃度均升高且差異具統計學意義（P<0.05），說明高脂血癥小鼠模型復制成功。與模型組相比，雅低組、陽性組，TC均降低且差異具有統計學差異（P<0.05）；與模型組相比，雅高組、辛伐他汀陽性組，TG均降低且差異具有統計學意義（P<0.05）。說明雅解沙把在降TC、TG水平方面具有一定的作用，且雅高、雅低組降低TC、TG的側重點有所不同。見表1。

3.2 雅解沙把對蛋黃乳致小鼠高脂血癥TC、TG含量影響比較 模型組與正常組相比，模型組小鼠血清的LDL-C、HDL-C濃度水平均分別升高、降低且差異具有統計學意義（P<0.05），說明高脂血癥小鼠模型復制成功。與模型組比較，雅高組、陽性組、雅低組的LDL-C有降低的趨勢，但與模型組相比差異均無統計學意義（P>0.05）。表明雅解沙把對該模型的降血脂作用不是很明顯。見表2。

4 討論

“雅解”學說是傣醫學最具民族特色的理論之一，它以四塔、五蘊為理論核心，“未病先解，先解后治”的解毒理論是其核心內容，雅解能解除人體內各種毒素，調節因精神因素所導致體內“四塔、五蘊”功能失調而發生的各種疾病，達到防病治病，保持人體健康之目的[11]。在長期醫療活動中傣族人民陸續發現了上百種具有解毒功效的藥物及方劑，統稱為雅解。雅解功能以解毒為主，針對各種食物、藥物、動物叮咬及各種原因過敏等所致的體內毒素而設，它屬于傣醫“解”理論的重要組成部分[12]。傣醫廣義的“解藥”包括的內容非常廣泛；狹義的“解藥”內容包括：解除食物毒性、解除毒性動物叮咬毒、解除毒熱、解除藥物毒性和解除藥物作用五個方面[13]。目前，從國人飲食的發展趨勢來看，飲食結構已發生了較大改變，特別是高脂飲食的攝入明顯增加，脂肪攝入過量則產生“脂毒”（高脂血癥）。“雅解沙把”是傣醫廣泛用于治療煙、酒、藥物、食物中毒行之有效的方藥，臨床上除用于解“酒毒”外，更多的是用于解“食物毒”，包括解脂毒等。項目組成員前期和西雙版納州傣醫院臨床研究均表明多種傣醫解藥具有明顯的解毒、保肝、促進消化功能的作用，臨床主要用于消化系統疾病、代謝性疾病等。

雞蛋黃中的膽固醇和脂肪含量十分豐富，腹腔注射75%的蛋黃乳后，外源性脂質通過腹膜迅速進入血液循環，從而快速升高實驗動物的血脂。所以本實驗采取腹腔注射75%蛋黃乳方法成功復制急性高脂血癥模型。本實驗主要是以蛋黃乳復制急性高脂血癥模型為研究對象，擬探討“雅解沙把”對蛋黃乳所致的脂毒（高脂血癥）是否有解毒的作用。實驗結果表明：總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）是判定高脂血癥的重要指標，雅解沙把灌胃7d后，對實驗小鼠血清TC、TG 濃度水平均顯著降低，且雅高、雅低組降低TC、TG有所側重。提示：雅解沙把對高脂血癥模型小鼠具有降血脂的作用，也即是具有解脂毒的作用。

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（收稿日期：2014.11.28）