貓須草水提取工藝研究

楊江媛

【摘 要】 目的：考察貓須草的最佳提取工藝。方法：以貓須草提取物中總黃酮的含量為指標，對提取工藝進行考察，以確定貓須草的最佳提取工藝。結果：15倍量的水浸泡藥材10h后，80℃加熱提取2次，每次3h。結論：收率較好，該工藝條件可行。

【關鍵詞】 貓須草；總黃酮；提取；收率

【中圖分類號】R284.2 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）04-0024-02

貓須草Clerodendranthus spicatus （Thunb.）C. Y. Wu又名腎茶、牙努秒、貓須公，為唇形科腎茶屬植物。該屬植物全世界僅有5種，產于東南亞的印度尼西亞、馬來西亞等東南亞國家，澳大利亞有少量分布。我國僅有貓須草一種，主要分布于廣東、海南、廣西南部、云南南部、臺灣及福建，常生于林下潮濕處。從上世紀起，我國多地引種栽培，其中以云南種植最多[1]。貓須草清涼消炎，可全草入藥，味苦，性涼。書中記載貓須草用以治療小便熱、澀、疼痛等泌尿系統疾病。民間認為貓須草具有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石和抗腫瘤作用，用于治療急慢性腎炎、膀胱炎、尿路結石、風濕下肢關節炎和咽炎有特殊療效[2]。有文獻報道貓須草中的主要化學成分為黃酮類化合物，為控制貓須草的質量，提高貓須草中有效成分的含量，對貓須草的提取工藝進行研究和優化，為貓須草的優質開發利用提供理論依據。

1 材料

1.1 試驗器材 電子天平（十萬分之一，賽多利斯科學儀器有限公司）、電子天平（萬分之一，賽多利斯科學儀器有限公司）、NKSY型智能恒溫水浴鍋（常州諾基儀器有限公司）、3695-Ⅱ型紫外分光光度計（菲爾伯恩實業發展有限公司）、昆山超聲清洗儀（安徽東南儀誠試驗室設備有限公司）

1.2 對照品 蘆丁（中國食品藥品檢驗所，批號：121268-200904）

1.3 藥材 貓須草（采購自昆明市菊花村中藥材市場）

2 方法與結果

2.1 總黃酮含量測定方法

2.1.1 對照品溶液制備 精密稱取蘆丁對照品16.42mg，加甲醇適量置水浴上微熱使溶解，放冷，甲醇定容至50ml，搖勻，即得濃度為0.3284mg/ml的蘆丁對照品溶液。

2.1.2 標準曲線的制備 精密量取對照品溶液0.5、1、1.5、2、3、4、5、6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min，以相應的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅤA），在509nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，結果見表1。

以蘆丁含量（μg/ml）為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制出總黃酮的標準曲線為：Y=0.0107X+0.0012，R2=0.9993，線性范圍為6.568～78.816μg/ml。

2.1.3 供試品制備 稱取浸膏適量，精密稱定，置25 ml錐形瓶中，精密稱定，加甲醇10 ml超聲處理10 min，放冷，精密稱定，甲醇補足重量，搖勻。精密量取5 ml，置10 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取3ml，置25 ml量瓶中，照標準曲線制備項下的方法，自“加水至6ml”起依法測定吸收度從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的濃度（μg/ml），計算即得。

2.1.4 水提液供試品溶液的制備 稱取各個單因素考察后的干浸膏約0.5g至錐形瓶中，精密稱定，50%甲醇水30ml浸泡1h，超聲提取30 min，放冷，過濾，回收濾液至5ml，用0.45μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

2.2 藥材含量測定

2.2.1 樣品制備 稱取貓須草藥材2份，每份5g，加入100ml甲醇浸泡4h，80℃加熱提取1h，過濾，濾渣再加入100ml甲醇同法提取1h，反復提取4～5次至提取完全，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮液轉移至蒸發皿中，揮干溶劑至恒重，稱定浸膏重量，待測。

2.2.2 藥材中總黃酮的含量 按照2.1.3 項下總黃酮含量測定的方法，測定藥材中總黃酮的含量，測定結果見表2。

2.3 提取工藝考察

2.3.1 浸泡時間 取藥材10g，按照提取工藝，加入10倍量水分別浸泡藥材1、2、4、6、10h后，70℃溫浸提取2h，過濾，收集濾液，濾渣同法提取1次，合并濾液，減壓回收溶劑至干，測定浸膏出膏率及總黃酮含量，濾渣烘干備用，結果見表3。

加權評分=干浸膏含量×50%+總黃酮含量×50%

表3數據表明，當藥材提取前浸泡10h，浸膏含量及總黃酮含量均較高，加權評分最大，因此藥材浸泡時間為10h。

2.3.2 提取溫度 取藥材10g，按照提取工藝，加入10倍量水浸泡藥粉10h后，分別于40、50、60、70、80℃浸漬提取2h，過濾，收集濾液，濾渣同法提取1次，合并濾液，減壓回收溶劑至干，測定浸膏出膏率及總黃酮含量，濾渣烘干備用，結果見表4。

3 結論

對貓須草藥材進行水提取后，對提取物中的總黃酮含量進行測定后發現提取物中總黃酮含量提高了2～3倍。但是由于黃酮苷類易溶于水，而黃酮類化合物大多易溶于醇類，為進一步提高貓須草中總黃酮的提取率，下一步實驗擬對水提取后的貓須草藥渣進行低溫干燥處理后再次進行醇提工藝的考察，以提高藥材的利用率。

貓須草是我國西南地區特有的少數民族藥，經過長期實踐，貓須草在治療泌尿系統疾病方面具有顯著的療效。然而，由于缺乏系統完整的研究，大多數民族藥還停留在地區甚至更小的范圍內用藥，一些具有顯著療效的民族藥還沒有得到充分的推廣使用。對貓須草提取工藝的研究，不僅有利于民族醫藥的推廣使用，而且也對民族醫藥的發展起到極大的推動作用。

參考文獻

[1]許娜，許旭東，楊峻山. 貓須草的研究進展[J].中草藥，2010，41（5）：12-16.

[2]任文輝，洪儷芳.貓須草的藥理作用研究進展[J].中草藥，2013，44（20）：2946-2950.

[3]高增平，王寶華，江佩芬.不同產地貓須草化學成分預試及熊果酸含量對比[J]. 北京中醫藥大學學報，1999，22（5）：78-79.

[4]顏文祝，呂于謀，沈文通.貓須草主要化學成分初步預試[J].海峽藥學，1995，7（3）：3-4.

（收稿日期：2014.11.20）