假性濕疣和尖銳濕疣組織中VEGF、Bcl-2蛋白表達變化及臨床意義

張楠，周炳娟，李玲(保定市第一中心醫院，河北保定071000)

假性濕疣和尖銳濕疣組織中VEGF、Bcl-2蛋白表達變化及臨床意義

張楠，周炳娟，李玲
(保定市第一中心醫院，河北保定071000)

摘要:目的觀察假性濕疣( PC)和尖銳濕疣( CA)組織中血管內皮生長因子( VEGF)、Bcl-2蛋白表達變化，并探討其臨床意義。方法采用免疫組化SP法檢測100例份PC組織( PC組)、100例份CA組織( CA組)、50例份健康女性外陰皮膚(對照組)中VEGF、Bcl-2蛋白。結果PC組、CA組、對照組中VEGF陽性率分別為80%、90%、40%，PC組、CA組分別為與對照組比較，P均＜0.05; Bcl-2陽性率分別為78%、98%、40%，兩兩比較，P均＜0.05。結論PC和CA組織中VEGF、Bcl-2蛋白表達升高，且檢測Bcl-2有助于PC和CA的鑒別診斷。

關鍵詞:假性濕疣;尖銳濕疣;血管內皮生長因子; Bcl-2蛋白

假性濕疣( PC)是一種發生于女性陰部的顆粒狀突起性淡紅色丘疹，有時輕癢，其與尖銳濕疣( CA)在臨床表現上非常相似，所以常給患者帶來不必要的負擔。PC的發病機制尚不明確，國內外學者的研究亦各不相同。2008年10月～2010年6月，我們觀察了PC和CA組織中血管內皮生長因子( VEGF)、Bcl-2蛋白表達變化，并探討其意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2008年10月～2010年6月保定市第一中心醫院收治的PC患者100例，均為女性，年齡22～48歲( 30.35±5.22)歲，病程7 d～6個月。CA患者100例，均為女性，年齡20～50 ( 30.35±5.79)歲，病程2 d～4個月。均經臨床和組織病理檢驗確診，且排除患有其他系統疾病，3個月內未曾接受任何免疫治療。手術留取PC真皮和表皮組織100例份( PC組)、CA真皮和表皮組織100例份( CA組)，另選50例份子宮肌瘤手術女性患者的健康外陰皮膚作為對照組。

1.2組織VEGF、Bcl-2蛋白檢測采用免疫組化SP法，嚴格按照試劑說明步驟進行。切片脫蠟至水化，經3%過氧化氫甲醇固定后分別加入第一抗體鼠抗人VEGF單克隆抗體、Bcl-2單克隆抗體，然后加入第二抗體進行染色，使得著色細胞染成棕黃色，最后沖洗復染，中性樹膠封固。結果分析方法根據改良Shimzu法。VEGF和Bcl-2蛋白陽性細胞染成棕黃色，陰性細胞未著色，= 1.9為陰性，2～2.9為弱陽性，3～3.9為陽性，=4為強陽性。兩種蛋白的陽性率為以弱陽性、陽性、強陽性細胞的總和所占的比例。

1.3統計學方法采用SPSS11.0統計軟件。兩兩比較采用Kruskal-wallis H秩和檢驗方法。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

PC組、CA組、對照組中VEGF蛋白陽性率分別為80%、90%、40%，PC組、CA組分別與對照組比較，P均＜0.05; Bcl-2蛋白陽性率分別為78%、98%、40%，兩兩比較，P均＜0.05。

3　討論

VEGF又稱為血管滲透因子，是目前被認為與創傷組織的修復、缺血、炎癥及腫瘤的發生等密切相關的因子之一［1］，也是目前已知最強的促血管生成因子［2］。VEGF主要功能為增加血管通透性，促進血管生成等［3］。角質形成細胞是皮膚中VEGF的主要來源，而角質形成細胞來源的VEGF是真皮微血管內皮細胞特異性的有絲分裂原，可促進內皮細胞生長［4］。曾抗等［5］認為CA組織可能產生某種促血管物質，并認為這種物質是某種形式的血管生成因子。Beqquet等［6］通過HPV16陽性細胞株體外培養發現，成纖維細胞生長因子( bFGF)對VEGF的表達具有上調作用，從而使VEGF發揮促進血管生成和表皮細胞增殖分化的作用。國外有研究［7］表明，HPV16 E6可刺激p53基因誘導VEGF基因的表達增加。本研究顯示，PC、CA組VEGF蛋白表達高于對照組，提示PC和CA角質形成細胞在一定因素刺激下能產生和分泌過量的VEGF，在促進PC和CA真皮血管生成方面可能起重要作用。CA的發生機制可能是由于患者HPV病毒感染后，誘導機體產生VEGF，而在CA組織中bFGF有可能誘導上調了VEGF的表達，使VEGF增加了皮損區血管通透性，促進了血管形成，從而導致黏膜和皮膚呈現疣狀增生性損害。PC的發病機制是直接還是間接參與尚不明確，可能是由于PC上皮組織增生造成局部缺氧刺激引起的結果，或是由于PC本身分泌一種促血管生成物質上調VEGF，也可能是PC皮損部位角質形成細胞通過旁分泌作用分泌的大量VEGF與其受體結合，發揮促血管生成作用。而是否存在HPV感染仍有待于進一步研究。總之，VEGF在組織中的過度表達參與了促進PC和CA增殖及血管增多的病理過程，構成了二者發病的病理學基礎。

Bcl-2是目前最受關注的與細胞凋亡關系密切的基因之一。Bcl-2對細胞凋亡具有明顯的抑制作用，但不影響細胞增殖［8］。凋亡的影響因素很多，其中病毒可能延遲或抑制細胞凋亡的發生。Tsao等［9］在HPV陽性的宮頸癌細胞株凋亡的研究中也同樣發現，Bcl-2過度表達對凋亡有明顯抑制作用。本研究結果表明，Bcl-2可能通過一定的形式參與了PC皮損組織細胞的凋亡調控，使皮損的凋亡受到抑制。PC的臨床和病理特點顯示該疾病處于增殖旺盛狀態，抑凋亡基因Bcl-2又呈現過度表達，增殖與凋亡在PC組織中處于失衡狀態，從而導致疾病的發生。本研究發現，CA組Bcl-2表達高于對照組，說明凋亡亦參與了CA的發病機制。病毒感染可以降低人體免疫功能，HPV使CA患者的免疫功能受到不同程度的損傷，造成其免疫力低下，臨床表現為病毒清除困難，造成疾病的活動性與宿主的傳染性。在病理狀態下，正常細胞凋亡會受到異常調控而使“非法身份”的細胞存活，導致機體病理過程進一步發生和發展。由此推測，HPV在CA發病過程中可能促進了Bcl-2的表達。本研究還發現，PC組Bcl-2表達低于CA組，說明Bcl-2對PC與CA的影響有明顯差別。這可能是大量HPV感染的結果，也可能是臨床上CA比PC增長速度快、增生更加活躍的原因之一。總之，細胞凋亡參與了這兩種增生性疾病的發生、發展。

參考文獻:

［1］劉雯蓓，馬小玲，季必華.過敏性紫癜患者血管內皮生長因子含量測定［J］.中國皮膚性病學雜志，2003，17( 4) : 232-261.

［2］Dvorak AM，Feng D.The vesiculo-vacuolar organelle( VVO).A new endothelial cell permeability organelle［J］.J Histochem cytochem，2001，49( 4) : 419-432.

［3］張潤歧.腫瘤血管生成因子的研究進展［J］.國外醫學:生理、病理科學與臨床分冊，1999，19( 6) : 447-449.

［4］Bhushan M，McLaughlin B，Weiss JB，et al.Levels of endothelial cell stimulating angiogenesis factor and vascular endothelial growth factor are elevated in psoriasis［J］.Br J Dermatol，2013，141( 6) : 1054-1060.

［5］曾抗，陳炎，王瑞善，等.尖銳濕疣與基底細胞癌的促血管生長作用的比較研究［J］.第一軍醫大學學報，1996，16( 1) : 16-18.

［6］Beqquet RM，Lopez OO.Angiogenesis modulators expression in culture cell lines positives for Hpv-16 oncoproteins［J］.Bioche m Biophys Res Commun，2000，277( 1) : 55-61.

［7］López-Ocejo O，Viloria-Petit A，Bequet-Romero M，et al.Oncogenes and tumor angiogenesis: the Hpv-16 E6 oncoprotein activates the vascular endothelial growth factor ( VEGF) gene promoter in a p53 independent manner［J］.Oncongene，2000，19( 40) : 4611-4620.

［8］張誼之，張敏，徐利.尖銳濕疣Fas、Bcl-2、Ki-67的表達［J］.中國麻風皮膚病雜志，2012，16( 2) : 74-76.

［9］Tsao YP，Huang SJ，Chang JL，et al.Adenovirus mediated P21 ( WAFI/SDH/CIPI) gene transfer induces apoptosis of human cervical cancer cell lines［J］.J Virol，1999，73( 6) : 4983-4985.

收稿日期:( 2015-04-22)

文章編號:1002-266X( 2015) 31-0064-02

文獻標志碼:B

中圖分類號:R752.5

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.31.026