黑虎掌菌化學成分及藥理作用研究進展

徐盼菊，楊東生，滕利榮，3，申斯樂，3，孟凡欣，3

（1吉林大學珠海學院，廣東 珠海 519041;2吉林大學南方研究院;3吉林大學生命科學學院）

黑虎掌菌，學名棗翹鱗肉齒菌，其最早發現于日本，我國首次發現于云南景東，是東南亞的特有分布種［1］。黑虎掌菌極像老虎的腳爪趴在地上，菌體顯黑色為黑虎掌菌，單子果肉質，菌蓋寬度7～22 cm，圓形，中部下陷成深漏斗狀，菌蓋邊緣有波狀或瓣狀開裂，褶色呈呈淡褐色至暗紫色;有塊狀角錐形鱗片，干后呈黑褐色，中部鱗片較大。菌肉新鮮時淡褐色，干后暗褐色，柄中生或偏生，長3.0～11.5 cm，柄粗1～3 cm。具刺錐形呈褐色，延生至柄的中下部，長4～8 mm。擔子4孢，擔孢子呈淡褐色，近球形，多有瘤突，直徑5～6 mm;無囊狀體。另外，黑虎掌菌多群生于常綠闊葉林地。中醫認為，黑虎掌菌性平味甘，有追風散寒、降低膽固醇的作用，有舒筋活血之功效，益氣補氣、治風破血、和胃通便、降血壓、解食物之毒、治頭痛頭昏等作用［2］。現代醫學認為，黑虎掌菌能提高人體免疫功能，有抗癌、排毒、減肥、緩解肝硬化等功效，是理想的保健食品之一;同時該菌低脂肪、低膽固醇、低熱量，是天然的減肥食品［3］。本文就黑虎掌菌中化學成分及藥理作用作一綜述，以期為以后黑虎掌菌的開發利用奠定基礎。

1 黑虎掌菌的化學成分

1.1 基本營養成分 根據國家標準［4］對黑虎掌菌（干制品）的營養成分進行測定與評價，結果顯示黑虎掌菌子實體中含有水分7.83% ±0.14%、灰分9.56% ±0.10%、蛋白質 12.66% ± 0.06%、脂肪2.57% ±0.31%、粗纖維 4.72% ± 0.20%、總碳水化合物67.38%;常量和微量元素含量（mg/kg）:磷17 806.86、鉀 27 909.25、鈣 75.95、鎂 751.55、鐵318.07、鋅 116.77、錳 33.76、銅 22.29、硼 16.03;氨基酸含量（mg/100 g）:必需氨基酸（EAA）為3 339.85、非必需氨基酸（NEAA）為 6 548.98、氨基酸總含量（TAA）為9 888.83，氨基酸評分、化學評分、氨基酸指數分別為 7.62、3.92、48.46。EAA/TAA 為33.77%，EAA/NEAA 為51.00%，鮮味氨基酸總量含量為36.68%。黑虎掌菌多糖重均分子質量（Mw）為765 747 D和11 194 D。從以上黑虎掌菌中基本營養成分含量中可以看出，黑虎掌菌是一種高蛋白、低脂肪、高碳水化合物的真菌，并含有豐富的礦質元素，是鎂、鐵、錳、鋅等元素的良好食物來源。

1.2 多糖類成分 文獻［5，6］報道，水解黑虎掌菌多糖得到阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖，摩爾比為0.8∶4.0∶13.4∶3.4。陳健等［7］從黑虎掌菌的子實體中分離出兩種多糖（SIPa和SIPb），SIPa和SIPb的平均相對分子質量分別為 2.12 ×105、1.05 ×104，SIPa是一種葡聚糖，SIPa的糖鏈以β型吡喃糖苷為主;SIPb是一種雜多糖，含有巖藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，摩爾比為 8.93∶1.00∶4.25∶29.18。分析得出黑虎掌菌含粗多糖SIP和六個純化多糖SIP-1-1、SIP-1-2、SIP-2-1、SIP-2-2、SIP-3-1、SIP-3-2，并證明SIP中含有巖藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，以葡萄糖為主，其次是半乳糖;SIP-1-1、SIP-3-1、SIP-2-1都只含葡萄糖;SIP-1-2、SIP-2-2都只含巖藻糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖四種糖，半乳糖最多;SIP-3-2含有葡萄糖和半乳糖。Han等［8］從黑虎掌菌子實體中分離出水溶性多糖 HBP;Su?kowska-Ziaja 等［9］從黑虎掌菌子實體中分離出3個多糖組分（FOⅠ、FOⅡ、FOⅢ），從菌絲體中分離出2個多糖組分（FKⅠ、FKⅡ），其中FOⅠ、FKⅠ由半乳糖和巖藻糖組成，FOⅡ、FKⅡ由葡萄糖和巖藻糖組成，而FOⅢ僅有葡萄糖組成。Chen等［10］從黑虎掌菌菌絲體中分離出PSAN和PSAA兩種多糖。

1.3 其他成分 黃悅從黑虎掌菌子實體中分離出4種成分:①腦苷脂B:具有細胞免疫調節功能，以及抗癌、抗真菌、抗病毒等功能;②阿洛酮糖腺苷:具有抗癌和抗菌作用;③三磷酸尿苷:具有消炎、抗腫瘤和加速血小板凝聚的功效，并且是一種免疫抑制劑;④尿嘧啶［11］。Takei等［12］從黑虎掌菌子實體中提取出麥角甾醇，并經試驗驗證麥角甾醇可以抑制HL60細胞的生長和促進其調亡。才媛等從黑虎掌菌子實體中分離出3種成分:①麥角甾-5.7.22-三烯-3β-醇，相對分子質量為396，分子式為C28H44O;②麥角甾醇過氧化物，相對分子質量為428，分子式為C28H44O3;③白色無定形粉末，1-羥基-（2S.3R.4E.2＇R）-2-N-（2＇-羥基二十六烷酰），相對分子質量為669，分子式為C41H83NO5。同時檢測到20多種揮發性的物質，其中有6種是酯類物質，共占總峰面積的60.85%，使得黑虎掌菌具有一種濃濃的酯香，推測這些脂類物質可能來源于黑虎掌菌中的脂肪族類物質，因此推斷脂肪是黑虎掌菌揮發性成分的前提。

2 黑虎掌菌的藥理作用

2.1 抗腫瘤作用 馮穎等［13］發現，翹鱗肉齒菌粗多糖對小鼠肉瘤 S180有顯著的抑瘤效應，其中50 mg/kg劑量組抑瘤率達45%，抑瘤效應不與劑量呈正比。Han等［8］從黑虎掌菌子實體中分離出的水溶性多糖HBP，并證明HBP是一個很有開發前景的潛在的免疫調節機，它可以作為保健食品以及抗腫瘤藥物。研究［5］顯示，黑虎掌菌粗多糖SIP和6個純化多糖 SIP-1-1、SIP-1-2、SIP-2-1、SIP-2-2、SIP-3-1、SIP-3-2在體外對人肝癌HepG2細胞、人卵巢癌細胞HO-8910和人乳腺癌細胞BT-4743種腫瘤細胞增殖均具抑制作用，而且未純化多糖對這三種細胞的抑制率都比較低，大分子多糖 SIP-1-1、SIP-2-1、SIP-3-1都具有較強的作用;其對人乳腺癌細胞BT-474增殖的抑制作用最明顯，最高抑制率達到36.05%。Su?kowska-Ziaja 等［9］從黑虎掌菌中分離出FOI多糖和FKI多糖，均對人乳腺癌MCV-7有50%以上的抑菌活性。Chen等［10］從黑虎掌菌菌絲體中分離出PSAN和PSAA兩種多糖，對宮頸癌細胞均具有明顯的抗腫瘤活性，且對非腫瘤細胞無細胞毒性。

2.2 抗氧化作用 陳健等［7］認為，黑虎掌菌多糖具有一定的還原能力，但沒有Vc的還原能力強;清除自由基的能力較強，最高可達52.27%;清除DPPH自由基的效果較好，最高可達73.16%，抗脂質體氧化的能力不理想，最高也只達到了34.15%。鄭義等［14］分離黑虎掌菌多糖獲得了5個多糖組分，即 SAP-1、SAP-2、SAP-3、SAP-4、SAP-5，發現這 5 個組分自由基清除能力、還原力和螯合鐵離子能力均表現出一定的濃度依賴性;其中SAP-4對DPPH自由基的清除力最高，其 EC50值為0.029 g/L，與 Vc相當;而且SAP-4對鐵離子的螯合能力也最高，EC50值為1.208 g/L。才媛等對不同提取部位的黑虎掌菌抗氧化能力進行分析比較，發現各極性部位均具一定的抗氧化能力，且呈一定的濃度依賴性，抗氧能力順序比較為:乙酸乙酯萃取物＞正丁醇萃取物＞多糖＞石油醚萃取物，其中乙酸乙酯萃取物的抗氧化能力在各極性部位中最強，在最大濃度0.64 mg/mL時，清除率達 97.589%;分析原因可能與乙酸乙酯部位中含有大量的甾醇物質有關，以往報道甾醇類物質具有一定的抗氧化能力，機制有待進一步研究。黑虎掌菌多糖的抗氧化能力還具有開發潛力，不只是作為保鮮劑，也可作為具有保健功能的抗氧化劑進一步的研究和開發。

2.3 抑菌活性作用 陳龍等采用木瓜蛋白酶、纖維素酶對黑虎掌菌子實體進行酶解提取，發現不同提取方法所得粗提物都有不同程度的抑菌效果，并由正交試驗可得出虎掌菌酶解提取物最佳抑菌效果為料液比1∶60、浸提溫度70℃、浸提時間1 h、纖維素酶1%、木瓜蛋白酶2%、酶解溫度40℃、酶解時間2 h，在此工藝條件下對霉菌抑菌效果最好，青霉菌抑菌圈直徑35 mm，黑曲霉抑菌圈直徑25 mm［15］。才媛等選擇黑虎掌菌石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相對黑虎掌菌抑菌活性進行研究，發現黑虎掌菌提取液正丁醇層萃取物對金黃色葡萄球菌和谷草芽孢桿菌有一定的抑菌活性，其中對金黃色葡萄球菌的抑菌活性＞30%，抑菌圈明顯;乙酸乙酯提取物對谷草芽孢桿菌有抑菌活性;而石油醚相和水相對以上菌均無抑菌活性。

2.4 抗免疫作用 通過黑虎掌菌多糖對正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的影響發現，黑虎掌菌多糖各劑量可不同程度的提高正常（免疫抑制）小鼠的免疫器官指數，增強小鼠單核—巨噬細胞的吞噬功能，黑虎掌菌多糖高劑量組能力最強，中低劑量組效果較弱;可協同ConA誘導小鼠脾淋巴細胞增殖，提高刺激指數;并且在進行小鼠創傷愈合實驗時顯示，與正常組（模型組）相比，內服和外敷兩種給藥途徑均可不同程度提高小鼠皮膚的傷口愈合率和血清IL-2、TNF-α、IgG水平。觀察傷口組織病理切片，多糖劑量組炎癥反應強于正常組，多糖各劑量組第7天組織切片炎癥細胞減少、成纖維細胞增多、瘢痕形成、表皮結構初步形成。以上實驗結果表明黑虎掌菌多糖可提高先天性免疫功能、細胞免疫活性及刺激抗體生成，使正常小鼠的身體狀況更佳，使免疫抑制小鼠的免疫功能趨于正常水平，是一個有前途的潛在免疫調節劑，可作為保健食品或者治療病原體和腫瘤的藥物進行開發利用［16］。

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