痰標本中檢出一例水生拉恩菌

方 毅，趙付菊， 張景皓，趙 虎

(復旦大學附屬華東醫院檢驗科，上海200040)

水生拉恩菌(Rahnella aquatilis)屬于腸桿菌科拉恩菌屬中的一個種［1］，為條件致病菌，較少引起臨床致病，從深部咳痰標本中分離出此菌極少見。復旦大學附屬華東醫院檢驗科從1例患者痰標本中分離出1株水生拉恩菌。

一、病例資料

1.一般情況 患者女，60歲。入院前1周患者自覺全身乏力加重，有咳痰，痰量不多，于復旦大學附屬華東醫院住院治療。入院檢查顯示，血常規:白細胞12.4×109/L，中性粒細胞88%，淋巴細胞10%，單核細胞2%，血紅蛋白104 g/L，血小板208×109/L，C反應蛋白17.0 mg/L;神智清楚，體溫36.8℃，雙肺叩診呈清音，呼吸音清晰，未聞及干、濕性啰音。入院后取患者深部咳出的痰標本進行細菌培養，分離到水生拉恩菌，且從其在血瓊脂平板上的菌落生長情況來看，此菌落較純，基本抑制了痰中的正常菌群(如草綠色鏈球菌和卡他布拉漢菌等)和其它雜菌的生長。經左氧氟沙星抗感染治療，患者1周后治愈出院。

2.培養與分離 收到痰標本后，立即對痰標本質量進行檢查，涂片染色結果為合格痰標本(白細胞＞25/低倍視野，上皮細胞＜10/低倍視野)。隨即接種血平板、中國藍平板和巧克力瓊脂平板(上海科瑪嘉公司)，5%～10%CO2環境中培養24h后，血瓊脂平板上可見中等大小、灰白色、圓形稍凸起、光滑濕潤、邊緣整齊、不溶血的菌落。將第2天血瓊脂平板上的純培養菌落進行涂片和革蘭染色鏡檢，為革蘭陰性桿菌，氧化酶試驗為陰性。

3.細菌的鑒定 (1)采用VITEK 2 Compact全自動微生物分析系統及其配套的鑒定卡(GN卡，法國生物梅里埃公司)進行鑒定，根據其生化反應結果的編碼4601530513560010，鑒定為水生拉恩菌，鑒定率為90%;(2)采用質譜儀(VITEKMS)(法國生物梅里埃公司)進行鑒定，鑒定為水生拉恩菌，鑒定率為99.9%;(3)采用分子生物學方法進行鑒定(測序)，由上海桑尼生物工程有限公司合成細菌的通用引物，27F:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，1492R:5'-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3'。試驗方法:利用 16SrDNA兩端的引物聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction，PCR)擴增未知菌株的16SrRNA基因，并進行DNA測序，與NCBI GenBank中的已知序列進行同源性比較后，判定細菌種類，將細菌劃分到屬或種。鑒定結果:水生拉恩菌，鑒定率為99%。

4.藥物敏感性試驗 采用紙片擴散法進行體外藥物敏感性試驗［2］。抗菌藥物紙片由Oxoid公司提供，水解酪蛋白胨平板由科瑪嘉公司提供。試驗結果提示該菌對頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢美唑、頭孢西丁、美羅培南、亞胺培南、氨芐西林-舒巴坦、左氧氟沙星、哌拉西林-他唑巴坦、復方磺胺甲噁唑均敏感，而對一、二代頭孢菌素類(頭孢唑啉和頭孢呋新)均耐藥，對青霉素類單藥(氨芐西林)耐藥。

二、討論

拉恩菌屬為腸桿菌科中的一個菌屬，其較為重要的一個種即為水生拉恩菌。有報道從同一患者的血液中2次分離培養出同一株水生拉恩菌，此患者出現了持續1周的高熱，并伴隨右上腹疼痛［3］;還有報道從一位老年患者腦脊液中分離出1株水生拉恩菌，此患者有頭痛、發熱伴嘔吐的癥狀［4］。華東醫院的這例患者在2014年3月診斷為抗中性粒細胞抗體相關性血管炎，給予甲潑尼龍進行治療，并在4、5、6月進行了3次環磷酰胺沖擊治療，因為該藥物為免疫抑制劑，可導致患者抵抗力下降，容易引起條件致病菌繼發感染。該患者在7月下旬入院時有咳嗽、咳痰，肺部CT未見明顯炎癥，考慮急性支氣管炎，使用左氧氟沙星抗感染治療后，在住院期間咳嗽、咳痰的癥狀有所好轉。

人體內及外界環境中存在很多種類的細菌，人類和細菌是共存的，有些細菌為正常菌群，有些則是條件致病菌。細菌檢出的部位不同，其臨床意義也不同。如草綠色鏈球菌在痰標本中檢出是正常菌群，但在血標本中檢出則為致病菌，可能是亞急性細菌性心內膜炎的病原菌。此次討論的這個病例就可能是由于機體接受免疫抑制劑治療后機體抵抗力下降，導致條件致病菌引發機體感染。對于這個病例，我們的體會是微生物工作人員在對患者的標本做細菌鑒定和藥物敏感性試驗時，需要全面考慮，不放過任何一個有可能引起感染的細菌(包括一些定植菌和條件致病菌)，對所檢出的細菌做全面的藥物敏感性試驗，讓醫生及時選用合適的抗菌藥物進行有針對性的治療，有利于患者盡早康復。

［1］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京:東南大學出版社，2006:801-821.

［2］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;twenty-second Informational Supplement［S］.M100-S23，CLSI，2013.

［3］張春花，謝國艷，倪語星，等.血液培養分離出水生拉恩菌1例［J］.檢驗醫學，2004，19(2):162.

［4］鄧書杰，張京文.水生拉恩菌致腦膜炎1例［J］.臨床檢驗雜志，2002，20(2):97.