抗-HCV聯合丙型肝炎病毒核酸檢測在丙型肝炎患者中的臨床價值

張軍艷(湖北省十堰市中醫醫院檢驗科 442012)

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抗-HCV聯合丙型肝炎病毒核酸檢測在丙型肝炎患者中的臨床價值

張軍艷(湖北省十堰市中醫醫院檢驗科 442012)

目的 探討抗-HCV陽性和抗-HCV陰性與丙型肝炎核酸(HCV-RNA)載量關系及其在丙型肝炎檢測中的應用價值。方法 回顧性分析2010年9月至2013年10月該院236例丙型肝炎患者，抽取所有患者血清標本，采用化學發光微粒子免疫法檢測抗-HCV，實時熒光定量聚合酶鏈反應法檢測HCV-RNA，并對檢測結果進行比較。結果 抗-HCV總檢出率為83.4%(197/236)，HCV-RNA總檢出率為87.1%(207/236)，兩者比較差異有統計學意義(P=0.00)，抗-HCV和HCV-RNA聯合檢測的準確率為98.7%(233/236)。HCR-RNA陽性和陰性患者ALT陽性率比較，差異有統計學意義(P=0.00)。HCR-RNA和ALT相關系數為r=0.86(P=0.00)。結論 聯合檢測抗-HCV和HCV-RNA，可早期確診HCV感染患者。

抗-HCV； HCV核酸； 丙氨酸氨基轉移酶； 聯合檢測

丙型肝炎病毒(HCV)以輸血和血制品的使用作為主要傳播途徑，HCV感染后臨床表現并不明顯，如不及時采取有效治療，患者極易發展成肝硬化，甚至肝癌[1-2]。因此，如何準確快速診斷HCV患者，對HCV患者治愈率和生活質量有很大影響[3]。選取本院236例丙型肝炎患者，以分析早期發現HCV患者的方法，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析本院2010年9月至2013年10月236例丙型肝炎患者，其中男122例，女114例，年齡15～83歲，平均年齡(45.25±3.48)歲。其中24例患者表現為感冒發燒、體虛、惡心、嘔吐、肌肉痛、頭昏、頭痛、腹痛，而且常有黃疸。按照中華醫學會肝病學分會和中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會發布的《丙型肝炎防治指南》診斷標準，明確臨床診斷。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 儀器 貝克曼DXC800全自動生化分析儀，最大測試速度為每小時1 440測試。測定原理：離子選擇性電極(ISE)法、比色法、速率法、糖氧化電極法、免疫透射比濁法、電導電極法、酶免疫法、終點法等。

1.2.2 試劑 丙氨酸氨基轉移酶(ALT)測定試劑盒，北京利德曼公司生產，產品性能結構及組成試劑組成：*試劑1：L-丙氨酸(600 mmol/L)；乳酸脫氫酶(≥1.2 kU/L)；疊氮鈉(0.09%)*試劑2：a-酮戊二酸(90 mmol/L)；煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)為1.08 mmol/L；疊氮鈉(0.09%)，縮寫：ALT，檢測方法：IFCC速率法。

1.3 檢測方法

1.3.1 抗-HCV的檢測方法 貝克曼DXC800全自動生化分析儀檢測血清中的抗-HCV，檢測試劑為Abbott 公司生產，HCV抗體測定免疫試劑盒(化學發光微粒子免疫檢測法)，產品批號：08013LI01，嚴格按照說明書上操作規范進行，判斷標準為：S/CO 值大于或等于1.000。

1.3.2 HCV核酸的檢測方法 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)檢測(廈門新創科技有限公司制作)。嚴格按試劑盒中說明書進行操作。標本在進行PCR擴增前要進行反轉錄。對數據相關性進行分析，采用求對數法同時定量計算HCV-RNA的平均拷貝數。所用試劑檢測下限為小于80 Copies/mL。

1.3.3 ALT的檢測方法 采用生化方法，用貝克曼DX800全自動生化分析儀結合ALT測定試劑盒進行檢測。

1.4 統計學處理 使用SPSS17.0對數據進行統計學處理，計數資料用百分率表示，使用χ2檢驗。檢驗水準設定為0.05，P<0.05說明差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 抗-HCV和HCV-RNA檢出結果比較 抗-HCV(+)患者197例，檢出HCV-RNA171例，檢出率為89.5%；抗-HCV(-)患者39例，檢出HCV-RNA 36例，檢出率為92.3%。抗-HCV總檢出率為83.4%(197/236)，HCV-RNA總檢出率為87.1%(207/236)，兩者比較差異有統計學意義(P=0.00)。抗-HCV和HCV-RNA聯合檢測的準確率為98.7%(233/236)。

2.2 HCV-RNA和ALT關系 在HCV-RNA陽性標本中，ALT陽性203例(98.0%)，ALT陰性4例(2.0%)。29例HCV-RNA陰性患者中，ALT陽性0例，陰性率為100.0%；HCR-RNA陽性和陰性患者ALT陽性率比較，差異有統計學意義(P=0.00)。HCR-RNA和ALT相關系數為r=0.86 (P=0.00)。

2.3 抗-HCV和ALT關系 在抗-HCV(+)標本中，ALT陽性率為81.7%(161/197)，ALT陰性36例(18.2%)。抗-HCV(-)標本中，ALT陽性26例(26/39，66.6%)。抗-HCV陽性組和陰性組ALT陽性率比較，差異無統計學意義(P=0.07)。

3 討 論

人群中HCV感染檢出率為0.8%～5.2%，如不及時治療，約40%慢性HCV患者將發展為肝硬化，甚至肝癌[4-5]。為了提高患者治愈率和生活質量，對早期HCV患者應及早診斷與治療。但早期HCV患者在臨床癥狀及外在表現上并不明顯。因此，如何早期診斷HCV患者成為必先解決的問題[6-7]。

抗-HCV是HCV感染或既往感染的指標，不能作為HCV感染期的指標，無法知曉體內HCV病毒活動及復制情況。在HCV感染早期即可檢測出血清中存在HCV-RNA，其靈敏度好，可作為HCV感染的可靠指標[8-9]。抗-HCV陽性而HCV-RNA陰性是既往感染的征象，但抗-HCV陰性而HCV-RNA陽性，可能有以下幾點原因：(1)HCV感染窗口期。HCV感染早期，病毒復制量大，RNA陽性，但抗體仍未產生[10]；(2)HCV基因異源性高，抗-HCV檢測試劑盒不含有檢測基因的抗原，或試劑盒本身靈敏度造成[11]；(3)人類免疫缺陷病毒可攻擊感染者自身的免疫細胞，導致機體HCV抗體產生延遲或缺乏，出現抗-HCV假陰性[12]。導致HCV-RNA假陰性的原因主要是由于HCV為單鏈RNA病毒，自然界中廣泛存在的RNA酶能降解RNA[13-14]。

本研究結果表明，抗-HCV檢出HCV患者陽性率為83.4%，HCV-RNA為87.1%。說明采用單一檢測抗-HCV或HCV-RNA進行丙型肝炎診斷時，無法完全確診患者。而聯合抗-HCV和HCV-RNA檢測方法，準確率可達98.7%。Pereira等[9]和Calvaruso和Crani[10]的研究結果顯示，抗-HCV與HCV-RNA檢出HCV患者陽性率分別為90.2%和91.5%，而當結合兩種檢測方法后檢出率可達到99.8%，這與本結論基本相符。說明聯合檢測可提高丙型肝炎的診斷率，同時也可以了解肝臟損傷的情況，具有十分重要的臨床治療和指導意義[15]。在207例HCV-RNA陽性患者中，ALT陽性患者為203例，占了98.0%，其相關系數為0.86(P<0.01)，說明ALT與HCV 核酸之間有很大相關性[8]。

綜上所述，ALT與HCV-RNA間有極高的相關性，采用抗-HCV和HCV-RNA聯合檢測，能夠有效確診丙型肝炎患者，對早期診治和提高生活質量有重要意義。

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The clinical value of combined test of anti-HCV and HCV-RNA in patients with hepatitis C

ZHANGJun-yan

(DepartmentofClinicalLaboratory,TraditionalMedicineHospitalofShiyanCity,Shiyan,Hubei442012,China)

Objective To explore the relationship between the positive result of Hepatitis C virus antibody (anti-HCV),negative result of anti-HCV and HCV-RNA loads and its application in detecting patients with HCV.Methods A retrospective analysis was performed 236 patients with HCV from September 2010 to October 2013.The anti-HCV was detected by the method of Chemiluminescence Immunoassay.HCV-RNA was tested by real-time fluorescencequantitative polymerase chain reaction.Results The detection rate of anti-HCV was 83.4%(197/236)，and that of HCV-RNA was 87.1% (207/236),the difference in the two groups was statistical different(P=0.00).The accuracy rate of combined detection of Anti-HCV and HCV-RNA in diagnosis of HCV was 98.7%(233/236).The difference of alanine aminotransferase(ALT) level between the patients with positive result of HCV-RNA and patients with negative result of HCV-RNA was statistical significant (P=0.00)，HCR-RNA and ALT were positively correlated (r=0.86，P<0.05).Conclusion The combined detection of anti-HCV and HCV-RNA is value for early diagnosis for HCV.

hepatitis C virus antibody； hepatitis C virus RNA； alanine aminotransferase; combined detection

張軍艷，女，碩士，主管檢驗師，主要從事醫學檢驗方法學與臨床研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.10.024

A

1672-9455(2015)10-1395-02

2014-10-01

2015-01-22)