連花急支片治療急性支氣管炎藥效學(xué)研究

谷春華，王宏濤， 朱慧明， 魏 剛，何奇龍

(1.河北以嶺醫(yī)藥研究院，河北 石家莊 050035；2.河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)藥研究院 藥理實(shí)驗(yàn)室，河北 石家莊 050035)

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連花急支片治療急性支氣管炎藥效學(xué)研究

谷春華1，王宏濤2*， 朱慧明2， 魏 剛2，何奇龍2

(1.河北以嶺醫(yī)藥研究院，河北 石家莊 050035；2.河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)藥研究院 藥理實(shí)驗(yàn)室，河北 石家莊 050035)

目的：評(píng)價(jià)連花急支片治療急性氣管-支氣管炎的藥效學(xué)作用。方法：采用氨水、枸櫞酸所致小鼠咳嗽模型觀察止咳作用；采用氣管段酚紅法、毛細(xì)玻管法觀察化痰作用；采用二甲苯所致小鼠耳腫脹模型、角叉菜膠所致大鼠足腫脹模型觀察抗炎作用；采用干酵母所致大鼠發(fā)熱模型、內(nèi)毒素誘發(fā)家兔發(fā)熱模型觀察退熱作用。結(jié)果：連花急支片對(duì)咳嗽有顯著的抑制作用，有明顯化痰、抑制急性炎癥的作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)性發(fā)熱具有明顯的抑制作用，且藥物作用隨劑量增加而增強(qiáng)。結(jié)論：連花急支片可通過止咳、化痰、抗炎、解熱等方面改善氣管炎-支氣管炎癥狀。

連花急支片；急性支氣管炎；藥效學(xué)

連花急支片是中藥6類復(fù)方制劑，由麻黃、石膏、連翹、桑白皮、黃芩、苦杏仁、前胡、制半夏、陳皮、浙貝母、牛蒡子、山銀花、大黃、桔梗、甘草組成，具有清宣肺熱、化痰止咳的功效，用于急性支氣管炎的治療。本研究根據(jù)其功能主治進(jìn)行了藥效學(xué)研究，為本品臨床治療急性氣管-支氣管炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物

連花急支片，由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)：070601；鹽酸氯哌丁片，江源百康藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，070310；氨茶堿片，石家莊歐意藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：040070602；沐舒坦，上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：784047；醋酸地塞米松，天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：20061121；鹽酸左旋咪唑片，湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：050305；阿司匹林腸溶片(ASA)，石藥集團(tuán)中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：07065001；細(xì)菌內(nèi)毒素精品，中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：2005-11。

1.2 儀器與試劑

超聲霧化器，WH-801數(shù)碼型，汕頭粵華儀器廠；酶標(biāo)分析儀，型號(hào)：XD 711，上海迅達(dá)醫(yī)療儀器公司；電子天平，AL204，METTLER POLEDO；氯化乙酰膽堿，北京化學(xué)試劑公司，批號(hào)：070402；磷酸組織胺，上海三杰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：070101；苯酚紅，上海三愛斯試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20001009。其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.3 動(dòng)物

健康KM小鼠，許可證號(hào)：SCXK(冀)2003-1-003，合格證號(hào)：710090、707200。健康Wistar大鼠，許可證號(hào)：SCXK(冀)2003-1-003，合格證號(hào)：708051。健康DH豚鼠，清潔級(jí)，許可證號(hào)SCXK(冀)2003-1-003，合格證號(hào)：710088、712083。健康SD大鼠，購于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證編號(hào)SCXK(京)2002-0003。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 連花急支片鎮(zhèn)咳作用[1][2]

采用氨水所致小鼠咳嗽模型，觀察連花急支片的止咳作用。KM小鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、咳平組、連花急支片高、中、低劑量組。灌胃給藥，連續(xù)3天。末次給藥后30min，氨水造模，觀察記錄小鼠咳嗽潛伏期和3min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

采用枸櫞酸所致豚鼠咳嗽模型，觀察連花急支片的止咳作用。DH豚鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、咳平組、連花急支片高、中、低劑量組。灌胃給藥，連續(xù)3天。末次給藥后30min，枸櫞酸造模，觀察記錄豚鼠咳嗽潛伏期和5min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

2.2 連花急支片化痰作用[3]

采用氣管段酚紅法，觀察連花急支片對(duì)小鼠的化痰作用，50只KM小鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、沐舒坦組、連花急支片高、中、低劑量組。連續(xù)灌胃給藥3天。酶標(biāo)儀545nm測(cè)OD值，酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酚紅含量，與對(duì)照組比較。

采用毛細(xì)玻管法，觀察連花急支片對(duì)大鼠排痰量的影響。50只160～170g雌雄各半SD大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、沐舒坦組、連花急支片高、中、低劑量組。觀察給藥后平均每小時(shí)分泌量是否有所增加。

2.3 連花急支片抗炎作用[3-4]

采用二甲苯所致小鼠耳腫脹模型，KM小鼠60只隨機(jī)分為模型組、醋酸地塞米松組、連花急支片高、中、低劑量組，連續(xù)灌胃給藥5天，于末次給藥后30min將100%二甲苯0.02mL涂在小鼠左耳前后兩面，右耳作對(duì)照，15min后將小鼠斷頸處死，用9mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，用電子天平稱重。

采用角叉菜膠所致大鼠足腫脹模型，健康Wistar大鼠50只隨機(jī)分為模型組、醋酸地塞米松組、連花急支片高、中、低劑量組，連續(xù)灌胃給藥3天，于末次給藥后30min將1%角叉菜在大鼠右后足跖部皮下注射0.05mL/只致炎，測(cè)定致炎前、致炎后0.5、1、2、4、6h大鼠右后足的容積(mL)，以致炎前后差值進(jìn)行組間比較。

2.4 連花急支片解熱作用[5-6]

采用干酵母所致大鼠發(fā)熱模型，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日對(duì)已經(jīng)適應(yīng)測(cè)肛溫刺激的大鼠，連續(xù)測(cè)肛溫2次，取其平均值為基礎(chǔ)體溫，篩選合格大鼠按體溫隨機(jī)分模型對(duì)照組、阿司匹林組、連花急支片高、中、低劑量組。用20%酵母懸液制備發(fā)熱模型，記為0h后，造模4h后給藥，記錄 2、4、6、8、10、12h的體溫。

采用內(nèi)毒素誘發(fā)家兔發(fā)熱模型，健康家兔隨機(jī)分為模型對(duì)照組、阿司匹林組、連花急支片高、中、低劑量組。給藥1h，耳緣靜脈注射細(xì)菌內(nèi)毒素，制備發(fā)熱模型，連續(xù)觀察造模6h動(dòng)物體溫變化。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 連花急支片鎮(zhèn)咳作用

連花急支片對(duì)氨水所致小鼠咳嗽的影響，與模型組比較，連花急支片低、中、高劑量組的咳嗽潛伏期與咳嗽次數(shù)均有明顯改善，對(duì)氨水所致小鼠咳嗽有一定的抑制作用。見表1。對(duì)枸櫞酸所致豚鼠咳嗽的影響，與模型組比較，連花急支片低、中、高劑量組的咳嗽潛伏期與咳嗽次數(shù)均有明顯改善，對(duì)枸櫞酸所致小鼠咳嗽有一定的抑制作用。見表2。

表1 連花急支片對(duì)氨水所致小鼠咳嗽的影響 (±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3.2 連花急支片的化痰作用

連花急支片低、中、高劑量組小鼠氣管段酚紅濃度與模型組比較均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，連花急支片有化痰作用，且藥物作用隨劑量增加而增強(qiáng)。見表3。連花急支片大鼠毛細(xì)管排痰量高、中劑量組每小時(shí)排痰量、每小時(shí)排痰量變化(差值)與對(duì)照組比較均有非常顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，低劑量組上述指標(biāo)只在藥后2h明顯變化(P<0.05、P<0.01)，表明連花急支片有明顯增加呼吸道分泌、促進(jìn)痰液的排出作用。見表4。

表2 連花急支片對(duì)枸櫞酸所致豚鼠咳嗽的影響 (±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

表3 連花急支片干膏粉小鼠排痰量的影響 (±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

表4 連花急支片對(duì)大鼠毛細(xì)管排痰量的影響 (±s，n=10)

注：與本組給藥前比較，*P<0.05，**P<0.01；與對(duì)照組比較；△P<0.05；△△P<0.01。

3.3 連花急支片抗炎作用

與模型組相比，連花急支片各劑量組對(duì)鼠耳腫脹度有顯著的降低作用(P<0.01),連花急支片對(duì)二甲苯所致的急性炎癥有抗炎作用。與模型組相比，連花急支片高劑量組、中劑量組、低劑量組在致炎后明顯降低大鼠致炎右后足的容積(P<0.05～P<0.01)，表明連花急支片對(duì)角叉菜膠所致大鼠足腫脹急性炎癥有抑制作用。見表5。

3.4 連花急支片解熱作用

對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響，連花急支片低、高劑量組造模6h體溫明顯降低、溫度變化幅度較小，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，連花急支片對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱有一定的解熱作用，見表6。對(duì)內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的影響，連花急支片高劑量組2、3、4、5h體溫均明顯下降(P<0.05或P<0.01)，溫度變化幅度較大(P<0.05)；中劑量組3、4h體溫均明顯下降(P<0.01、P<0.05)，溫度變化有明差異(P<0.05)；連花急支片對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱具有明顯的降溫作用，且藥物作用隨劑量的增加而增強(qiáng)。見表7。

表5 連花急支片對(duì)小鼠耳腫脹度與抑制率及大鼠足跖腫脹的影響 (±s，n=10)

注：與模型組相比，**P<0.01；與自身比較：#P<0.05；##P<0.01；與對(duì)照組比較，△P<0.05；△△P<0.01。

表6 連花急支片對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)測(cè)體溫比較 (℃，±s，n=10)

注：與模型組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，*P<0.05，**P<0.01；與給藥前比較，△P<0.05，△△P<0.01。

表7 連花急支片對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱不同時(shí)間點(diǎn)實(shí)測(cè)體溫比較 (℃，±s，n=8)

注：與模型組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

急性氣管炎和支氣管炎因素復(fù)雜，可以由病毒、細(xì)菌直接感染，或急性上呼吸道感染的病毒或細(xì)菌蔓延而來；也可能由過冷空氣、粉塵、刺激性氣體或煙霧的吸入而對(duì)氣管-支氣管黏膜的急性刺激而引起；或由致敏原引起氣管-支氣管的過敏炎癥反應(yīng)。針對(duì)多種病因進(jìn)行多途徑干預(yù)，而且可避免耐藥性，是中藥治療這類疾病的優(yōu)勢(shì)。

結(jié)果顯示，連花急支片對(duì)氨水、枸櫞酸所致小鼠咳嗽有顯著的抑制作用，有明顯化痰作用，且藥物作用隨劑量的增加而增強(qiáng)，觀察連花急支片抗炎活性，結(jié)果顯示連花急支片有抑制急性炎癥的作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)性發(fā)熱具有明顯的抑制作用，且藥物作用隨劑量的增加而增強(qiáng)。綜上所述，連花急支片可通過止咳、化痰、抗炎、解熱等方面改善氣管炎-支氣管炎癥狀，符合本方清宣肺熱、化痰止咳的功效，而且在多個(gè)環(huán)節(jié)改善癥狀，體現(xiàn)出中藥治療該類疾病的優(yōu)勢(shì)。

[1] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996.

[2] 田軍,黃世福,張毅，等.鎮(zhèn)咳滴丸鎮(zhèn)咳祛痰作用研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006, 17(11):2225-2226.

[3] 徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2003.

[4] 李金華,張惠琴,鄭克智，等.奧克丁(SOD)對(duì)角叉菜膠誘發(fā)大鼠足爪腫脹的抑制作用[J].蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，22(4)：386-388.

[5] 譚大琦，李秋華，李衛(wèi)星.銀葛雙解沖劑解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎和免疫作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1998,14(1):41-49.

[6] 覃筱燕，張淑萍，楊林，等.復(fù)方雙花口服液的解熱、抗炎、抑菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，12(4)：315-317.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-10-31

北京市科委“十病十藥專項(xiàng)”(Z121102001112002)

谷春華(1966-)，男，河北以嶺醫(yī)藥研究院主治醫(yī)師，研究方向?yàn)樾滤幣R床研究。

王宏濤(1972-)，男，博士，河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)藥研究院高級(jí)工程師，研究方向?yàn)樗幬锇踩栽u(píng)價(jià)。E-mail：wanghongtao@yiling.cn

R285.5

A

1673-2197(2015)09-0009-03

10.11954/ytctyy.201509004