乳腺癌預后及術后化療中免疫組化檢測的應用體會

摘要：目的 研究乳腺癌預后及術后化療中免疫組化檢測的應用。方法 選取我院2013年1月～2014年10月間診治的乳腺癌患者60例，采用免疫組化聯合檢測ER、PR、C-erbB-2，綜合分析其在乳腺癌組織中的表達及相互關系。結果 ER陽性表達率為66.7%，PR陽性表達率為73.3%，二者同時陽性表達率為63.3%，同時陰性表達率為23.3%；C-erbB-2陽性表達率為36.7%，陰性表達率為63.3%。結論 對于乳腺癌患者而言，采用免疫組化染色檢測其ER、PR、C-erbB-2的表達不僅利于全面了解乳腺癌組織對激素的依賴特性及耐藥基因，而且可以了解患者的耐藥情況，以及各種抗癌藥物的交叉藥性及預后，值得臨床推廣使用。

關鍵詞：乳腺癌；預后；化療；免疫組化；陽性表達率

作為當今世界威脅女性生命健康的第一大殺手，乳腺癌可謂最為常見的惡性腫瘤，由于人體乳腺內的淋巴管較為豐富，所以腋下淋巴結的轉移率為50%左右[1]。就目前臨床改善乳腺癌患者生存率來講，其主要途徑便是對乳腺癌的預后推斷及術后是否使用內分泌治療或其它化學藥物輔助治療，本文就我院60例乳腺癌患者為研究對象，回顧性分析免疫組化檢測在預后及術后化療中的應用，現將研究結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取我院2013年1月～2014年10月診治的乳腺癌患者60例，所有患者術前均無化療史與放療史，并確診乳腺癌腫瘤標本。其中包括其中42例乳腺浸潤性導管癌，8例乳腺髓樣癌，4例乳腺單純癌，6例乳腺粘液癌。

1.2方法

1.2.1處理標本 使用10.0%中性福爾馬林固定所有標本，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋。將每個蠟塊切為6片，組織切片厚4μm左右，貼裱在涂有防脫片劑清潔載玻片上。63℃烤片1h，二甲苯脫蠟，梯度乙醇浸泡至水，使用PH6.0檸檬酸鞋服液高壓修復切片后備用。

1.2.2試劑 ER、PR、C-erbB-2抗體、免疫組化超敏S-P試劑盒、DAB顯色試劑盒。

1.2.3免疫組化染色 將已知的陽性病例當做陽性對照，采用PBS取代一抗當做陰性對照。具體程序如下：①3.0%H2O250μl室溫孵育10min，采用緩沖液沖洗PBS；②5.0～10.0%正常山羊血清50μl封閉10min；③滴加一抗ER、PR、C-erbB-2各50μl；④保持37℃孵育1h，采用緩沖液沖洗PBS；⑤滴加生物素化二抗工作液50μl室溫孵育10min，采用緩沖液沖洗PBS；⑥滴加辣根酶標記鏈霉卵白素工作液50μl，室溫孵育10min；⑦DAB顯示液100μl，在顯微鏡下觀察顯色效果；⑧蘇木精襯染30s；⑨無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片[2]。

1.3結果判斷 陽性表達定位：ER：胞核，PR：胞核，C-erbB-2：胞膜或者胞漿。

1.4免疫組化結果判斷標準 細胞陽性表達超過5%為（±），位于10%～25%為（+），位于25%～75%為（++），超過75%為（+++）。

2結果

2.1在ER、PR檢測方面，ER陽性表達率為66.7%，PR陽性表達率為73.3%，二者同時陽性表達率為63.3%，二者同時陰性表達率為23.3%。

2.2在C-erbB-2檢測方面，C-erbB-2陽性表達率為36.75，陰性表達率為63.3%，見表1。

3討論

3.1 ER、PR在乳腺癌組織中表達及意義 作為乳腺癌的重要預測激素參數，如果ER、PR呈陽性則表明其分化程度較高，惡性度低，淋巴結轉移慢，預后較好，治療效果較為顯著，特別是內分泌治療敏感性較高[3]。在本文實驗中，ER檢測的陽性表達率為66.7%，PR檢測的陽性表達率為73.35%，二者同時陽性表達率為63.3%，由于這些都屬于激素依賴性腫瘤，對內分泌治療較為敏感，所以可以選擇抗雌激素藥物三苯氧胺、甲地孕酮、純抗雌激素藥物、孕激素制劑甲孕酮等內分泌藥物。另外，本文實驗中，ER、PR檢測的同時陰性表達率為23.35%，這類屬于非激素依賴性腫瘤，選擇內分泌治療無效的轉移性乳腺癌患者可以使用化療。研究表明，ER陰性的腫瘤對于化療更加敏感，特別是對于含蒽環類藥物的化療[4]。如果轉移性乳腺癌患者接受過非蒽環類藥物治療，那么最為標準的治療方案則是采用蒽環藥物治療的化療方案，在眾多含蒽環類聯合化療方案中，應用最為廣泛的是CAF、CNF、CTF方案，紫杉類或者蒽環類方案的療效更好，但是毒性也更大，對于進展較為快的內臟轉移、淋巴道轉移、局部晚期乳腺癌應該考慮應用。本文實驗中，ER、PR檢測的陽性表達率與患者的年齡與月經變化并無直接關系，而ER、PR中86.7%表達一致，13.3%表達不一致，這表明二者的一致性情況較多，而二者的檢測對于乳腺癌患者意義重大，其陽性直接關系到患者化療方案的選擇、腫瘤的復發、轉移及預后。

3.2 C-erbB-2在乳腺癌組織中表達及作用 C-erbB-2與乳腺癌的關系最為密切，其過度陽性表達通常見于分化差、浸潤型乳腺癌。這一類乳腺癌的早期復發轉移傾向較為明顯，淋巴結的存在與否都對預后產生不利影響[5]。ER、PR陽性，C-erbB-2陰性表達患者的預后較好。在乳腺癌組織中，如果C-erbB-2過度表達，則表明患者預后較差，對于內分泌藥物的盒子里效果不佳，對于無蒽環類藥物的化療具有抗藥性。本文實驗中，C-erbB-2的陽性表達率為36.7%，陰性表達率為63.3%， C-erbB-2的陽性表達越高，則ER、PR的陽性表達越低。自從2000年起，美國食品藥物管理局開始用于C-erbB-2過表達轉移性乳腺癌的治療，相對于單項化療或者單項靶向治療，赫賽丁靶向治療聯合化療的治療方案效果較為顯著。由此可見，C-erbB-2的檢測對于乳腺癌患者異常重要，ER、PR陽性，C-erbB-2陰性表達患者預后較好。

綜上所述，對于乳腺癌患者而言，采用免疫組化染色檢測其ER、PR、C-erbB-2的表達不僅利于全面了解乳腺癌組織對激素的依賴特性及耐藥基因，而且可以了解患者的耐藥情況，以及各種抗癌藥物的交叉藥性及預后，值得臨床推廣使用。

參考文獻：

[1]管小青，江小玲，袁牧，等.不同方案新輔助化療對乳腺癌C-erbB-2及ER、PR表達的影響[J].腫瘤基礎與臨床，2012，18（03）：147-152.

[2]鄧再興，謝貝，俞文菊.乳腺癌P-gp、GST-π及TopoⅡ的表達及意義[J].腫瘤研究與臨床，2011，07（01）：467-471.

[3]張祥盛，張金鈴.細胞調亡及nM 170、ER 基因產物表達與乳腺癌生物行為的相關性[J]. 臨床與實驗病理學雜志，2013，15（06）：495-495.

[4]管小青，江小玲，袁牧，等.不同方案新輔助化療對乳腺癌C-erbB-2及ER、PR表達的影響[J].腫瘤基礎與臨床，2010，19（03）：245-248.

[5]狄根紅，沈鎮宙，邵志敏.赫賽汀在轉移性乳腺癌治療中臨床應用和進展[J].實用癌癥雜志，2003，18（06）：664-666.

編輯/孫杰