HPLC法測定復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量

梁 萍

云南省紅河州食品藥品檢驗(yàn)所，云南 蒙自 661199

HPLC法測定復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量

梁 萍

云南省紅河州食品藥品檢驗(yàn)所，云南 蒙自 661199

目的:建立HPLC法測定復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林含量的方法。方法:采用sinochrom ODS-AP(4.6mm×200mm，5μm)色譜柱；流動相：甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55);流速：0.8ml/min；檢測波長：259nm；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：10μl。結(jié)果:安替比林濃度在0.4～2μg/ml時，線性關(guān)系良好(r=0.9999)；平均加樣回收率為98.95%(n=9)。結(jié)論:該法簡便、快速、專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高，適用于復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定。

高效液相色譜法；安替比林；含量

復(fù)方氨林巴比妥注射液收載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第十四冊，由氨基比林、安替比林、巴比妥和注射用水組成，為解熱鎮(zhèn)痛藥，臨床用于急性高熱時的緊急退熱，對發(fā)熱時的頭痛癥狀也有緩解作用。本文通過實(shí)驗(yàn)，建立了高效液相色譜法測定復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定方法，并對方法進(jìn)行了驗(yàn)證[1]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1260高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；BP211D電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)。

1.2 試藥 安替比林對照品(批號：100506-200301，中國藥品生物制品檢定所)；復(fù)方氨林巴比妥注射液(批號：1401212A、1401014A ，鄭州某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；批號：13091904，貴州某藥業(yè)有限公司);甲醇為色譜純；水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Sinochrom ODS-AP (4.6mm×200mm，5μm)；流動相：甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55)；流速：0.8ml/min；檢測波長：259nm；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：10μl。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取安替比林對照品10.49mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密量取復(fù)方氨林巴比妥注射液1ml，置200ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按復(fù)方氨林巴比妥注射液處方，不加安替比林制成陰性對照，同“2.2.2”項(xiàng)下的制備方法制成陰性樣品溶液。

2.3 陰性對照試驗(yàn) 取對照品溶液、樣品溶液和陰性溶液，在上述色譜條件下準(zhǔn)確進(jìn)樣10μl，分別記錄色譜圖，色譜圖見圖1。結(jié)果表明，安替比林的測定不受其他雜質(zhì)峰的干擾。

2.4 線性關(guān)系試驗(yàn) 分別精密量取上述對照品溶液各4、8、12、16、20μl，在上述色譜條件下進(jìn)樣，記錄峰面積，以峰面積A為縱坐標(biāo)，濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=3.57748C+1.16032，r=0.9999，安替比林在濃度0.4～2μg/ml的范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn) 取上述對照品溶液，準(zhǔn)確進(jìn)樣10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別測定峰面積，RSD為0.30%。表示儀器的精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密量取同一批號樣品(批號：1401212A)，按“2.2.2”項(xiàng)下的方法配制溶液，在上述色譜條件下，依法測定，記錄峰面積，6份樣品按標(biāo)示量計(jì)算的平均含量為99.04%，RSD為0.35%(n=6)。表明該方法重現(xiàn)性較好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取重復(fù)性試驗(yàn)項(xiàng)下的第一份樣品分別于0、2、4、8、12、24h取樣測定，結(jié)果安替比林的RSD為0.81%(n=6)。表明該樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的樣品(批號：1401212A ) 4、5、6ml各3份分別置10ml量瓶中，精密加入“2.2.1”的對照溶液各6、6、6、5、5、5、4、4、4ml，搖勻。照上述色譜條件，進(jìn)樣測定9份，結(jié)果平均回收率為98.95%，RSD為0.72%(n=9)。

2.9 樣品中安替比林的含量測定 精密稱取安替比林對照品適量，照“2.2.1”項(xiàng)下方法制備對照品溶液，另取復(fù)方氨林巴比妥注射液三批，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μl，在上述色譜條件下，注入液相色譜儀，記錄峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果見表1。

表1 復(fù)方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量測定(n=3)

3 討論

3.1 《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第十四冊中，安替比林的含量測定采用紫外法進(jìn)行定量分析[2]，其操作繁瑣，反應(yīng)時間長。本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測定其含量，具有操作簡便、專屬性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn)，有利于在實(shí)際工作中對藥品質(zhì)量的控制。

3.2 檢測波長的選擇 精密量取對照品溶液適量，用水溶解并稀釋制成0.1mg/ml的溶液，以水為空白，用TU-1901紫外-可見分光光度計(jì)在200～300nm的波長范圍內(nèi)分別掃描其紫外吸收圖譜，在259nm的波長處有最大吸收，所以確定其為檢測波長。

3.3 經(jīng)試驗(yàn)，流動相用甲醇-1%醋酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.7)(45∶55)[3]，流速為0.8ml/min；柱溫為40℃時，安替比林峰的保留時間適宜(5.7min)，理論版數(shù)按安替比林峰計(jì)算達(dá)到7093 。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄194-195.

[2]國家藥典委員會．國家藥品標(biāo)準(zhǔn)(第十四冊)[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010:81.

[3]國家藥典委員會. 國家藥品標(biāo)準(zhǔn)(第十六冊)[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010:396.

Determination of antipyrine compound Amionprine and Antipyrine injection by HPLC method

LIANG Ping

Honghe prefecture institute for food and drug control,Mengzi 661199,China

Objective:To establish an HPLC method for determination of antipyrine Compound Amionprine and Antipyrine injection.Method: An sinochrom ODS-AP column(4.6mm×200mm，5μm)was used with the temperature of 40℃.The mobile phase consisted of methanol:1%acetic acid solution(adjusted to pH 3.7 with TriethyLamine)(45∶55)and the flow rate was 0.8ml/min.The detection wavelength was 259nm,sample amount to 10μl.Results： the linearity was good in the range of 0.4～2μg/ml(r=0.9999);The average sample recovery rate was 98.8% (n=9).Conclusion： This Method is simple,rapid,specific and accurate ,and can be used for determination of compound Amionprine and Antipyrine injection.

HPLC；antipyrine；content

梁萍,E-mail: 634144277@qq.com

R927.2

A

1007-8517(2015)09-0010-02

2015.01.29)