維生素B6凝膠劑中維生素B6的含量測定

紀萬里 要 輝 沈定文

湖北科技學院藥學院，湖北 咸寧 437000

維生素B6凝膠劑中維生素B6的含量測定

紀萬里 要 輝 沈定文

湖北科技學院藥學院，湖北 咸寧 437000

目的：建立維生素B6凝膠劑中維生素B6的含量測定方法。方法：采用卡波姆940為基質，以維生素B6為主藥，制備成維生素B6凝膠劑，采用紫外分光光度法測定維生素B6的含量。結果：卡波姆為基質制備的凝膠劑質地均勻細膩、質量穩定；采用紫外分光光度法，以291nm作為維生素B6檢測波長，含量測定方法可行，維生素B6在5～25μg/ml濃度范圍內，線性關系良好，平均回收率為98.79%，RSD為0.46%。結論：采用紫外分光光度法測定維生素B6凝膠劑中維生素B6含量方法簡單可行，結果準確。

維生素B6凝膠劑；紫外分光光度法；含量測定

維生素B6(Vitamin B6)又稱吡哆素、鹽酸吡哆辛，化學名為2-甲基-3-羥基-4,5-二羥甲基吡啶鹽酸鹽，本品固體在空氣中穩定，但受熱可升華，是一種水溶性維生素，體內主要與蛋白質結合存在，包括吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺三種形式[1]。近年來，維生素B6被廣泛應用于皮膚科疾病，在體內參與蛋白質的合成、脂質的代謝[2]，用于治療凍瘡、皮膚紅腫、干燥皺裂、脂溢性皮炎、舌炎等疾病。維生素B6軟膏劑已在臨床上使用，本文將維生素B6制備成以卡波姆為基質的凝膠劑，將解決其乳膏劑存在質地不均勻、吸收減慢、涂布不均、污染衣物等問題，并研究維生素B6凝膠劑中維生素B6含量測定方法，為進一步工業化生產凝膠劑的質量控制提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 UV-2401PC紫外分光光度計(日本島津)。

1.2 材料 維生素B6對照品(批號：100116-201103，中國藥品生物制品檢定所)；卡波姆940(藥用級，批號：20140711，廣州市漢普醫藥有限公司)；丙二醇、乙醇、鹽酸為分析純，其余原料均為藥用規格。

2 處方與制備

2.1 處方 維生素B612g，卡波姆940 10g，丙二醇120g，甘油100g，羥苯乙酯12g，三乙醇胺12g，加純化水至1000g。

2.2 制備 稱取處方量的卡波姆于水中靜置，溶脹過夜，加入丙二醇與甘油，滴加三乙醇胺，不斷地攪拌成凝膠基質；將維生素B6溶于水中；將羥苯乙酯溶于乙醇，緩緩加入上述凝膠基質中，加水至足量，攪勻，即得透明均一的維生素B6凝膠劑。

3 含量測定

3.1 空白基質對照溶液的制備 按處方比例，配制空白基質，稱取0.1g,加0.1mol/L的鹽酸溶液適量至100ml的容量瓶中，振搖，并稀釋至刻度，過濾后，取濾液作為空白基質對照溶液。

3.2 維生素B6對照品溶液的制備 取維生素B6對照品適量，用0.1mol/L的鹽酸溶液溶解并配制成每1ml溶液中含10μg的維生素B6溶液，作為對照品溶液。

3.3 樣品溶液的制備 稱取樣品0.1g加0.1mol/L的鹽酸溶液適量至100ml的容量瓶中，振搖，并稀釋至刻度，搖勻，過濾后，取濾液作為樣品溶液。

3.4 波長的選擇 分別取上述三種溶液，于200～400nm波長范圍內掃描，結果見圖1。結果發現對照品和樣品溶液在291nm波長處有最大吸收，空白基質對照液在此波長處無吸收，由此可以采用0.1mol/L鹽酸溶液作空白，在291nm處測定維生素B6的含量，其空白基質無干擾吸收。

3.5 標準曲線的繪制 精密稱取維生素B6對照品25mg，置于100ml的容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液適量溶解稀釋至刻度，作為對照品貯備液，分別取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml的對照品貯備液于50ml容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液適量溶解稀釋至刻度，搖勻。以空白基質的0.1mol/L鹽酸溶液作空白，在291nm波長處測定吸光度，結果表明在5～25μg/ml范圍內，吸光度(A)與濃度(C)呈良好的線性關系，回歸方程為：A=0.025C+0.07，r=0.9990(n=5)，表明該方法符合含量方法學驗證的要求。

3.6 精密度試驗 取“3.2”項下的維生素B6對照品溶液，照紫外分光光度法連續測6次，以吸光度計算，維生素B6吸光度的RSD為0.50%。結果表明該方法重復性較好。

3.7 回收率試驗 為了考察該含量測定方法的準確度，進行了回收率試驗，按處方量的80%、100%、120%，精密稱取維生素B6對照品，分別加入空白基質按照樣品的制備方法制成供試品，按“3.3”項下樣品的制備方法，同法測定，計算回收率，結果回收率良好(見表1)。表明采用該方法測定維生素B6的含量準確度高，含量可控。

表1 回收率實驗結果

3.8 樣品含量測定 取自制樣品3批(20140901、20140902、20140903)，按“3.3”項下樣品的制備方法，同法測定，含量分別為98.32%、98.41%、98.37%。

3.9 樣品的穩定性試驗

3.9.1 離心試驗 取制備好的3批樣品10g，分別裝入離心管中，以3000rpm離心，結果該凝膠劑無分層現象，穩定性較好。

3.9.2 加速試驗[3]將樣品置于將樣品置于40℃，75%RH的藥品穩定性試驗箱中，放置6個月，采用紫外分光光度法測定其三批樣品含量，含量未發生變化，性狀透明均勻，未發生分層現象。

3.9.3 長期試驗[3]將樣品置于25℃，60%RH的藥品穩定性試驗箱中，放置6個月，其含量、性狀也未發生變化。表明該凝膠劑在6個月內穩定。

4 討論

凝膠劑作為新型的外用制劑，具有良好的生物相容性、易于涂布/局部給藥后易于吸收、不污染衣物、穩定性好的特定[4]。卡波姆是丙烯酸與烷基蔗糖交聯而成的丙烯酸聚合物，是一種廣泛應用的高分子基質材料。卡波姆含有大量的羧基，可被堿性物質中和，當羧基游離時，由于負電荷相互排斥作用，使分子鏈呈現彌散伸展的狀態，隨后呈極大的膨脹狀態，具有強大的粘性和良好的載藥功能，同時具有良好的增稠性、成膜性[5]。研究表明，當羧基游離時，凝膠劑才具有較強的黏附能力[6]。本文采用水溶性的卡波姆作為基質，制成維生素B6凝膠劑后并采用了紫外分光光度法測定其含量，由于空白基質溶液在291nm處出無吸收，排除了干擾，使含量測定具有專屬性，同時進行含量方法學驗證，表明該方法重復性好，準確度高。在處理樣品時，由于卡波姆為高分子材料，溶液出現渾濁現象，最后采用0.1mol/L的鹽酸溶液作為溶劑，溶液較為澄清，利于紫外法的測定，從而排除了干擾。通過以上試驗，表明采用紫外分光光度法測定該凝膠劑中維生素B6的含量，簡單可行，質量可控，結果準確，可為工業化生產凝膠劑的質量控制提供依據。

[1]徐勇智,范衛東,黨登峰,等.維生素B6的合成研究進展[J].廣東化工,2012,40(12):50.

[2]Ahmad I,Qadeer K Nazim U.Vitamin B6:deficiency diseases and methods of analysis[J].Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences,2013,26 (5):1057-1069.

[3]國家藥典委員會.中國藥典(二部)[S].北京:化學工業出版社,2005:附錄178-179.

[4]王敏,薛曉東.卡波姆凝膠劑的臨床應用研究進展[J].醫學綜述,2013,19(6):1078-1079.

[5]梁斌,朱丹燕.新型凝膠劑研究進展[J].海峽藥學,2012,24(3):13-15.

[6]Al-Malah,Kamal I Azzam,Mohammed O J.Carbomer Dispersions:A New Calibration Method for Quantifying Shear-Thinning and Shear-Thickening Effects[J].Journal of Dispersion Science & Technology,2012,33(9):1274-1283.

The content determination of Vitamin B6in Vitamin B6gels

JI Wan-li,YAO Hui,SHEN Ding-wen

HuBei University of science And Technology school of pharmacy,Xian ning 437000，China

Objective To establish the method for the content determination of vitamin B6gels.Method Using the matrix of Carbopol 940 and vitamin B6-based medicine to prepare vitamin B6gels,and using the UV to evaluate content determination of vitamin B6.Results Using carbopol gels as matrix to prepare the gels which is uniform,exquisite and stable quality.Using the UV spectrophotometry to 291nm as wavelength to detect the content determination of vitamin B6,which is feasible and the calibration curve are linear within a well range of vitamin B6in 5-25μg/ml,the average recovery is 98.79%,RSDis 0.46%.Conclusion Using the UV spectrophotometry to detect the ointmen of vitamin B6,which is simple,feasible and accurate.

Vitamin B6gels;UV spectrophotometry;Content determination

紀萬里(1987-)，江蘇徐州人，主要從事新藥研發及分析研究。E-mail：snjiwanli@163.com

R927.2

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1007-8517(2015)09-0022-02

2015.02.12)