人輪狀病毒疫苗的研究進展

張改梅,魏文進,付作申

人輪狀病毒疫苗的研究進展

張改梅,魏文進,付作申

輪狀病毒(RV)是引起全球5歲以下嬰幼兒腹瀉最重要的病原之一，普遍流行于發達國家和發展中國家，然而在發展中國家該病的病死率較高。由于目前RV腹瀉尚無有效治療藥物，并且改善衛生條件對預防RV感染并無明顯的效果。因此，疫苗是目前證實能預防和控制RV腹瀉唯一有效的手段。盡管RV疫苗研制已取得很大的進展，由于輪狀病毒毒株的多樣化和流行分布很廣，故而繼續研制一種新的適合的安全、有效的RV疫苗顯得尤為重要。本文針對人RV疫苗的研究進展、質量控制、保護效力及安全性評價作一綜述，以期促進后期相關研究。

人輪狀病毒；疫苗進展；質量控制;保護效力;安全性

輪狀病毒(Rotavirus, RV)是全球嬰幼兒嚴重腹瀉的重要病原因子，主要感染3月齡到5歲的兒童，其感染率可達30%～65%[1]，其中6月齡到2歲的兒童中發生中度和重度感染最多。該病無季節性，全年均可發生感染，據世界衛生組織(WHO)報告顯示，在2008年時全球約有45.3萬兒童死于輪狀病毒胃腸炎(RVGE)，約占全部死亡兒童的5%，5歲以下兒童的死亡率為86/10萬[3]。約90%的輪狀病毒死亡者來自亞非等經濟、衛生欠發達國家，其中中國輪狀病毒腹瀉死亡率占全球8%。此外，我國各省、市均有報道輪狀病毒暴發流行的記載[4]。輪狀病毒腹瀉不僅危害人類生命健康，也對社會和家庭造成了巨大的經濟損失。因此，在2009年，WHO建議所有成員國將RV疫苗納入其兒童計劃免疫程序中，尤其是腹瀉死亡率占5歲以下兒童總死亡率達到10%以上的國家[3]。目前，市售的RV疫苗雖然能對重癥腹瀉起到良好的保護作用，但卻不能很好地預防RV感染。本文對RV、RV疫苗的研究進展及疫苗的保護效率和安全性評價作一綜述。

1 輪狀病毒的結構特征

RV是一種雙鏈RNA病毒，屬于呼腸孤病毒科。病毒顆粒由3層組成，由VP2作為內層骨架，VP1和VP3裝配其中，并且包裹著11個基因片段，分別編碼6個結構蛋白(VP1～VP4、VP6和VP7)和5個非結構蛋白(NSP1～NSP5)。中殼由VP6構成22～24個輻條狀結構。根據VP6的抗原特異性，輪狀病毒可分為A、B、C、D、E、F、G7個抗原群，而人類可被前3個群感染，其中A群是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原。不同群之間并沒有交叉保護作用。光滑外殼由VP7和VP4組成，它們是輪狀病毒最重要的抗原成分，因此與輪狀病毒感染免疫和研制疫苗直接相關。VP7血清型稱為G型，A群目前有14個G型，其中G1、G2、G3、G4、G5、G6、G8、G9、G10、G12共10個G型均在嬰幼兒輪狀病毒腹瀉糞便中檢出。VP4血清型稱為P型，P型超過20個，其中8個P型與人類有關。到目前為止，G1～G4型仍然是發病人群中的優勢流行株[1-2]。近年來，在亞洲、澳洲和南美洲，G9和G10型在人群中有增多趨勢，并且混合感染非常嚴重。

2 VP7的遺傳變異情況

VP7由第9基因片段編碼，是一種N-高甘露糖型糖蛋白，約占病毒蛋白總量的30%。VP7是決定型特異性和誘導中和抗體的主要抗原，在病毒進入宿主細胞過程中發揮重要作用。VP7基因變異主要表現為堿基替換，在58、97、302、458、699、742、882和930處容易發生變異。研究表明，同一血清型中變異較小，而不同血清型間存在較大的變異。由于RV血清型別多樣，并且優勢流行株在不斷更新和變化，目前尚沒有研究顯示在受到一種血清型RV感染后能夠激發免受其它血清型病毒的再次感染。因此，研制一種包括人輪狀病毒最常見的幾個型別的多價RV疫苗是目前的主流方向。

3 國內外輪狀病毒疫苗的發展概況

3.1 人用動物輪狀病毒單價活疫苗 關于輪狀病毒疫苗的研究始于20世紀70年代中期，最早的RV疫苗是牛RIT4237株疫苗(NCDV)，鑒于該疫苗在不同國家和地區的保護效果非常不一致，故被停用[1,3]。此外，Clark等用G6型牛輪狀病毒WC3株研發的WC3疫苗和Kapikian等用G3型猴輪狀病毒株MMU18006(RRV)研發的RRV株疫苗進行臨床試驗后發現其保護效果迥異，均被停用[7]。之后，白植生等用羊輪狀病毒株G10P[12]型LLR株研發的人用口服輪狀病毒活疫苗，該疫苗可誘導產生廣泛的中和抗體，陽轉率高達60%，對RV腹瀉的保護效果為78%，并且在使用中尚未發生嚴重的不良反應[1,7]。故LLR株疫苗成為世界上第1個獲得批準生產的以動物輪狀病毒株制備的人用輪狀病毒活疫苗。

3.2 人-動物輪狀病毒基因重配株多價活疫苗

3.2.1 人-猴輪狀病毒基因重配株四價活疫苗 1985年kapikian等以猴輪狀病毒RRV株為親本，將人輪狀病毒G1、G2和G4型的VP7基因片段插入親本組成重配株即四價活疫苗(RRV-TV)[8]。RRV-TV經7次臨床觀察結果表明，對所有輪狀病毒腹瀉的保護效果達到47%～69%，對重度腹瀉保護率可達70%～100%。于1998年經FDA批準可以正式生產上市，并被列入兒童常規預防接種計劃。RRV-TV成為世界上經批準注冊的第一個用于嬰幼兒的RV重配株活疫苗。后期由于腸套疊事件的發生，故被停止生產。

3.2.2 人-牛輪狀病毒基因重配株四價活疫苗 美國Wistar學者以牛輪狀病毒WC3株為親本，通過基因重配獲得人-牛輪狀病毒基因重配株四價活疫苗(WC-QV)。臨床觀察表明，該疫苗對輪狀病毒腹瀉的保護效率達到67%，對重型輪狀病毒腹瀉達到69%[6-8]。另外，有學者以牛輪狀病毒UK株為親本，通過基因重配獲得人輪狀病毒VP7單基因片段基因重配株組成人-牛輪狀病毒四價活疫苗(UK-QV)[7]，在美國對不同年齡人群進行了臨床觀察，結果顯示該疫苗可以與其它疫苗聯合使用[9]。

3.2.3 人-羊輪狀病毒基因重配株三價活疫苗 蘭州生物制品研究所以LLR疫苗為基礎，采用G2、G3和G4型人RV分別與LLR株進行重配，從而獲得人-羊基因重配株三價活疫苗。該疫苗于2007年5月獲SFDA批準進入臨床試驗階段，目前正在進行Ⅲ期臨床試驗[8-9]。

3.2.4 人-牛輪狀病毒基因重配五價活疫苗 美國FDA批準默沙東(MSD)公司的五價人-牛重配RV疫苗(RotaTeq)，該疫苗是以WC3為親本的重配株，包括人(G1，VP7)、(G2，VP7)、(G3或G4，VP7)、牛(P7[5]，VP4)，以及人(P1A[8]型，VP4)或牛(G6，VP7)。該疫苗可以有效預防G1～G4型RV引起的嬰幼兒胃腸炎，保護率為74%。對嚴重腹瀉的免疫效率為98%[6,9]。

3.3 人源輪狀病毒口服活疫苗 由澳大利亞學者用RV3株研發的疫苗， II 期臨床結果顯示，在服完3劑疫苗后，血清中IgA 的水平比較低，但受試者能在下一年度免受輪狀病毒感染[11]。1998年，Bernstein等報告的89-12株(G1型)疫苗，經臨床觀察，19%的受試者在第1次服用后會發生發熱等副反應，但口服2次后，疫苗的免疫效果高達94%，成為目前輪狀病毒疫苗中的高效疫苗[12]。2005年葛蘭素史克(GSK)公司生產的單價人RV減毒活疫苗(Rotarix)(G1P[8])，對大多數血清型RV可產生交叉保護作用[10,12]。越南研制的單價人輪狀病毒疫苗RotavinTM(G1P[8])具有良好的免疫原性并在2012年4月獲準使用[12-13]。

另外，IGV-80-3冷適應株人輪狀病毒(G1型)，傳代培養溫度已降低至25 ℃，此侯選珠正在進行Ⅰ期臨床觀察[1]。

3.4 輪狀病毒新型疫苗

3.4.1 基因工程亞單位疫苗與病毒樣顆粒(VLP) Meccrea等于1987年成功獲得了重組蛋白VP7，免疫動物后能夠產生特異的高滴度的免疫抗血清[14]。目前通過基因重組技術已制備出RV主要結構蛋白VP2、VP4、VP6、VP7。其優勢在于使用過程中無病毒復制，更加安全，但亞單位疫苗最大的缺點是起不到內生性抗原的免疫效果；其次，不能有效地刺激機體產生粘膜免疫，而預防輪狀病毒感染恰恰需要腸道的局部免疫。

病毒樣顆粒(VLPs)由于沒有感染性，作為免疫原，通過遞呈免疫細胞，能有效誘導機體的免疫系統產生免疫保護反應[15]。目前，已運用重組腺病毒表達載體和重組桿狀病毒載體，成功表達產物自組裝成VLPs，如人類乳頭瘤病毒樣顆粒(HPV-VLPs)四聯苗(HPV6/11/16/18)已于2006年在歐洲上市，具有廣泛的交叉保護作用[15,17]。輪狀病毒猴SA11-2/6株用桿狀病毒表達載體最終組裝成功VP2/6病毒樣顆粒，可以刺激機體產生血清中和抗體[18]。另外，還可以組裝含有VP4和VP7的雙層病毒空殼顆粒。VLPs疫苗沒有感染性，穩定性好，不易失活，具有廣闊的發展前景[19-20]。VLPs通常與佐劑共用，以獲得最好的免疫應答，研究發現，VLP與QS21佐劑共用時，血清中和抗體滴度顯著高于SA11株免疫效果[1,14]。

3.4.2 核酸疫苗 Greenberg等將編碼鼠RV VP4、VP6、VP7基因插入表達質粒pCMV中，成功構建了重組串聯質粒，作為多價核酸疫苗，注入機體后，能夠在活體中成功表達RV重要抗原，并具有較好的交叉免疫保護作用，這表明DNA疫苗可能是控制RV腹瀉的一種新方法[7,14]。核酸疫苗能夠規避減毒活疫苗的致病風險，但其缺點是免疫原性較低，且過程復雜，技術難度大，成本費用較高。

3.4.3 轉基因植物疫苗 自20世紀90年代起，隨著高效基因載體和基因轉化技術的發展，以植物特別是農作物作為表達系統生產人用疫苗或功能蛋白，打破了傳統疫苗或功能蛋白的生產方式[21-22]。這種將抗原基因整合于植物體上或重組于載體后轉染于植物體上，利用植物體自身的生命活動，生產出相應的抗原蛋白，即為轉基因植物疫苗。此外，免疫途徑也將采用直接食用或加工后口服植物(果實)，即可食性疫苗(口服疫苗)。目前，該項研究多處于臨床前研究階段，僅有少數進入了臨床期試用[23]。由于利用轉基因植物生產重組蛋白，轉化為植株的種子易于儲存，還解決了以往大腸桿菌系統、酵母系統和哺乳動物細胞系統生產疫苗所面臨的難題，故而擁有著潛在的優勢和廣闊的發展前景。

目前已建立了煙草、馬鈴薯、番茄、香蕉等多種轉基因植物表達系統，并且乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、鏈球菌屬突變株表面蛋白(spaA)等多種疫苗已成功獲得了表達[21-25]。其中乙型肝炎表面抗原在煙草中的表達為可溶性的，表達量為總蛋白的0.01%。經過免疫小鼠后體內產生高水平的乙肝病毒特異性抗體，人食用后體內也產生抗乙肝病毒特異的IgG抗體。Richter等用商業來源的乙肝疫苗對小鼠進行初免后，再用轉基因馬鈴薯表達的乙肝疫苗經腹腔注射加強免疫，結果顯示免疫應答得到高度加強[23,25]。但是，如何提高轉基因植物的抗原蛋白產量，是目前該技術的一大難題。如通過改進表達調控系統，采用強啟動子、增強子來促進抗原蛋白表達。再者，進一步擴大可食性轉基因植物疫苗的植物范圍，也是一條很好的途徑[26-27]。

運用轉基因植物生產疫苗，不需要昂貴的設備，在獲得高效表達的轉基因植株后，擴大耕地面積，就能獲得大量的疫苗，該種生產疫苗的方式不僅安全可靠，而且成本低廉，對于第三世界國家是一大福音，人類和動物可避免免疫注射之苦，同時也節省了大量人力、物力。生產并接種這種“可食用疫苗”為輪狀病毒疫苗的研究和發展開拓了更廣闊的前景。

3.4.4 其它新型疫苗 研究表明非結構蛋白NSP4是一種病毒性腸毒素，與RV腹瀉有直接關系，故研制出抗NSP4的單克隆抗體，可以作為靶標，對RV治療具有重要意義。另外，通過表達的重組NSP4蛋白免疫機體，可以產生特異性的抗NSP4 IgG和IgA抗體，為RV新疫苗研制提供一種新的途徑[28]。

4 輪狀病毒疫苗的質量控制評價

在輪狀病毒疫苗質量控制中，病毒滴度測定是關鍵性評價指標，如疫苗的生產工藝、保護效果、有效期、安全性和批內批間穩定性評價都依賴于病毒滴度的測定。但由于輪狀病毒疫苗效價與抗原濃度無關，目前尚無非常準確規范的方法來進行評價[28-29]。并且輪狀病毒細胞病變不典型，無法用國際通用的病毒滴度測定方法——蝕斑法，我國唯一上市的輪狀病毒疫苗LLR采用CCID50法和ELISA法聯合使用來代替肉眼判斷病變情況，但其重復性和可靠性尚有待考證，該產品上市十多年，但目前尚未入我國藥典。另外，實時熒光定量PCR技術、熒光灶法、CCID50結合免疫染色法也已用于病毒滴定測定，但尚未得到廣泛認可。因此，亟需進一步摸索來確定輪狀病毒滴度測定的通用標準方法，為疫苗的質控提供重要評價標準。

5 輪狀病毒疫苗的保護效力評價

RotarixTM對大多數其他血清型RV可產生交叉保護。在北美的臨床觀察顯示，RotarixTM預防嚴重RV胃腸炎的保護率為84.7%，嚴重胃腸炎住院率下降了85%。RotaTeqTM對G1～G4型RV導致的胃腸炎和嚴重胃腸炎的保護效率分別為74%和98%[28,30]。在美國的臨床觀察中，RotaTeqTM對嚴重的輪狀病毒腹瀉保護率達到85%～95%，并且自上市以來，過去的幾個流行季輪狀病毒活躍度均在下降，表明RotaTeqTM可能具有潛在的群體免疫效應。我國生產上市的LLR可誘導產生G1～G4型血清中和抗體，陽轉率達40%～60%，對RV腹瀉的保護率達78%[28,33]。截止2011年9月，全球已有28個國家將輪狀病毒疫苗納入了計劃免疫中，其中16 個國家使用RotarixTM，8個國家使用RotaTeqTM，有4 個國家同時使用兩種疫苗，但是還沒有亞洲國家將其納入計劃免疫[29-30]。全球調查資料顯示，輪狀病毒疫苗接種可以保護非計劃免疫適齡兒童，對于欠發達地區實行計劃免疫將有利于保證疫苗群體效力和覆蓋率[29,32]。

6 安全性評價

6.1 腸套疊風險 1999年7月，美國疾病預防控制中心(CDC)在首次服用RotashieldTM疫苗的兒童中監測到15例腸套疊病例[34]。同年，美國FDA停止了RotashieldTM的生產和應用。目前大量臨床觀察表明，墨西哥和澳大利亞報告接種首劑后腸套疊風險會增加，而巴西報告在第2次接種后該風險會增加，但美國卻沒有監測到此風險[34-36]。然而，RotashieldTM與腸套疊相關聯，可能僅與其自身結構相關，而并非所有口服RV活疫苗的共性。盡管腸套疊的問題尚未解決，但RV疫苗的好處遠遠大于腸套疊的風險帶來的弊端。另外，WHO已建議發展中國家取消對輪狀病毒疫苗接種的年齡限制，使得這些國家在提高疫苗覆蓋率方面運作更加靈活便捷，但同時也強烈建議這些地區實行對腸套疊的監測，從而有效提升RV疫苗的安全性[37-38]。

6.2 外源物質的污染 2010年，美國FDA稱RotarixTM中檢出豬圓環病毒Ⅰ型的DNA片段。同年，FDA也證實在RotaTeqTM中也存在豬圓環病毒Ⅰ型和Ⅱ型的DNA片段[39]。盡管PCV1不會對人類生命造成威脅，卻使得疫苗生產質量難以控制。此外，RotaTeqTM疫苗中還發現了猴逆轉錄病毒的DNA片段[39-40]。對外源因子進行監測，是疫苗的質量和安全的重要保障。實行毒(菌)種關鍵基因的測序和降低在細胞培養中抗生素的使用量是控制疫苗安全的有效手段。

7 展 望

自輪狀病毒被發現四十多年來，相關的疫苗研究進展迅速，但是已經獲得批準注冊的RV疫苗和有望研制成功的RV疫苗都是口服RV活疫苗。由于輪狀病毒的感染免疫機制尚未完全闡明[41]，不同血清型之間缺乏有效的交叉保護作用，同時，新流行毒株的不斷出現，這些都為新疫苗的研發與應用提出了挑戰。隨著輪狀病毒各領域研究的不斷發展及新技術、新方法的不斷涌現，輪狀病毒疫苗的研究方向也將更加廣闊?？诜啝畈《净钜呙绲难芯咳匀皇墙谘芯康闹饕较颉Ｒ呙鐚⑾蚋鄡r發展，可能包括G5、G8、G9、G10、G12等一些近年來呈優勢流行趨勢的血清型[41-42]。對輪狀病毒疫苗接種途徑和接種方法的研究可能對輪狀病毒疫苗的研究產生重要影響。輪狀病毒亞單位疫苗及病毒樣顆粒疫苗的研究將越來越受到重視。其它新型疫苗的研究，如基因工程疫苗、核酸疫苗、NSP4的作用等為未來輪狀病毒疫苗的研發開辟了新途徑。

[1]Zhang YL, Zhang H. Vaccinology[M]. Beijing: Science Press, 2004: 1351-1363. (in Chinese) 張延齡,張暉.疫苗學[M].北京:科學出版社,2004:1351-1363.

[2]Wang JZ. Vaccine quality control and evaluation[M]. Beijing: People's Medical Press, 2013: 578-593. (in Chinese) 王軍志.疫苗的質量控制與評價[M].北京:人民衛生出版社,2013:578-593.

[3]Tate J, Burton A, Boschi-Pinto C, et al. WHO-coordinated Global Rotavirus Surveillance Network. 2008 estimate of worldwide rotavirus-associated mortality in children younger than 5 years before the introduction of universal rotavirus vaccination programmes: a systematic review and meta-analysis[J]. Lancet Infect Dis, 2012, 12(2): 136-141. DOI: 10.1016/S1473-3099(11)70253-5

[4]Tilson L, Jit M, Schmitz S, et al. Cost-effectiveness of universal rotavirus vaccination in reducing rotavirus gastroenteritis in Ireland[J]. Vaccine, 2011, 29(43): 7463-7473. DOI: 10.1016/j.vaccine. 2011.07.056

[5]Aidelsburger P, Grabein K, Bohm K, et al. Cost-effectiveness of childhood rotavirus vaccination in Germany[J]. Vaccine, 2014, 32(17): 1964-1974. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.01.061

[6]Vesikari T, Matson DO, Dennehy P, et al. Safety and efficacy of a pentavalent human-bovine (WC3) reassortant rotavirus vaccine[J]. N Engl J Med, 2006, 354(1): 23-33. DOI: 10.1056/NEJMoa052664

[7]Lewis K, Jiang B, Gentsch J, et al. Rotavirus vaccines[J]. Hum Vaccine, 2011, 7(12): 1282-1290. DOI: 10.1016/S0140-6736(06)68815-6

[8]Cotes-Cantillo K, Paternina-Caicedo A, Coronell-Rodr guez W, et al. Effectiveness of the monovalent rotavirus vaccine in Colombia: A case-control study[J]. Vaccine, 2014, 32(25): 3035-3040. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.03.064

[9]Paul A, Babji S, Sowmyanarayanan T, et al. Human and bovine rotavirus strain antigens for evaluation of immunogenicity in a randomized, double-blind, placebo-controlled trial of a single dose live attenuated tetravalent, bovine-human-reassortant, oral rotavirus vaccine in Indian adults[J]. Vaccine, 2014, 32(25): 3094-3100. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.03.013

[10]Mandile MG, Esteban LE, Arg elles MH, et al. Surveillance of group A Rotavirus in Buenos Aires 2008-2011, long lasting circulation of G2P [4]strains possibly linked to massive monovalent vaccination in the region[J]. J Clin Virol, 2014, 60(3): 282-289. DOI: 10.1016/j.jcv.2014.04.022

[11]Al Awaidy ST, Gebremeskel BG, Al Obeidani I, et al. Cost effectiveness of a pentavalent rotavirus vaccine in Oman[J]. BMC Infect Dis, 2014, 14(1): 334-343. DOI: 10.1186/1471-2334-14-334

[12]Krishnarajah G, Landsman-Blumberg P, Eynullayeva E. Rotavirus vaccination compliance and completion in a Medicaid infant population[J]. Vaccine, 2015, 33(3): 479-486. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.06.059

[13]Payne DC, Boom JA, Staat MA, et al. Effectiveness of pentavalent and monovalent rotavirus vaccines in concurrent use among US children< 5 years of age, 2009-2011[J]. Clin Infect Dis, 2013, 57(1): 13-20. DOI: 10.1093/cid/cit164

[14]Glass RI, Parashar UD. The promise of new rotavirus vaccines[J]. N Engl J Med, 2006, 354(1): 75-77. DOI: 10.1056/NEJMe058285

[15]Kushnir N, Streatfield SJ, Yusibov V. Virus-like particles as a highly efficient vaccine platform: diversity of targets and production systems and advances in clinical development[J]. Vaccine, 2012, 31(1): 58-83. DOI: 10.1016/j.vaccine.2012.10.083

[16]Garcea RL, Gissmann L. Virus-like particles as vaccines and vessels for the delivery of small molecules[J]. Curr Opin Biotechnol, 2004, 15(6): 513-517. DOI: 10.1016/j.copbio.2004.10.002

[17]Rodriguez-Limas WA, Sekar K, Tyo KE. Virus-like particles: the future of microbial factories and cell-free systems as platforms for vaccine development[J]. Curr Opin Biotechnol, 2013, 24(6): 1089-1093. DOI: 10.1016/j.copbio.2013.02.008

[18]Grgacic EV, Anderson DA. Virus-like particles: passport to immune recognition[J]. Methods, 2006, 40(1): 60-65. DOI: 10.1016/j.ymeth.2006.07.018

[19]Ludwig C, Wagner R. Virus-like particles--universal molecular toolboxes[J]. Curr Opin Biotechnol, 2007, 18(6): 537-545. DOI: 10.1016/j.copbio.2007.10.013

[20]Vicente T, Rold o A, Peixoto C, et al. Large-scale production and purification of VLP-based vaccines[J]. J Invertebr Pathol, 2011, 107: S42-S48. DOI: 10.1016/j.jip.2011.05.004

[21]Rybicki EP. Plant-made vaccines for humans and animals[J]. Plant Biotechnol J, 2010, 8(5): 620-637. DOI: 10.1111/j.1467-7652.2010.00507.x

[22]Stoger E, Fischer R, Moloney M, et al. Plant molecular pharming for the treatment of chronic and infectious diseases[J]. Annu Rev Plant Biol, 2014, 65: 743-768. DOI: 10.1146/annurev-arplant-050213-035850

[23]Aswathi PB, Bhanja SK, Yadav AS, et al. Plant based edible vaccines against poultry diseases: a review[J]. Adv Anim Vet Sci, 2014, 2(5): 305-311. DOI: 10.14737/journal.aavs/2014/2.5.305.311

[24]Penney CA, Thomas DR, Deen SS, et al. Plant-made vaccines in support of the Millennium Development Goals[J]. Plant Cell Rep, 2011, 30(5): 789-798. DOI: 10.1007/s00299-010-0995-5

[25]Hern ndez M, Rosas G, Cervantes J, et al. Transgenic plants: a 5-year update on oral antipathogen vaccine development[J]. Expert Rev Vaccines, 2014, 13(12): 1523-1536. DOI: 10.1586/14760584.2014.953064

[26]Ahmad P, Ashraf M, Younis M, et al. Role of transgenic plants in agriculture and biopharming[J]. Biotechnol Adv, 2012, 30(3): 524-540. DOI: 10.1016/j.biotechadv.2011.09.006

[27]Yusibov V, Streatfield SJ, Kushnir N. Clinical development of plant-produced recombinant pharmaceuticals: vaccines, antibodies and beyond[J]. Hum Vaccin, 2011, 7(3): 313-321. DOI: 10.4161/hv.7.3.14207

[28]Buttery JP, Lambert SB, Grimwood K, et al. Reduction in rotavirus-associated acute gastroenteritis following introduction of rotavirus vaccine into Australia's National Childhood vaccine schedule[J]. Pediatr Infect Dis J, 2011, 30(1): S25-S29. DOI: 10.1097/INF.0b013e3181fefdee

[29]Patel M, Glass R, Jiang B, et al. A systematic review of anti-rotavirus serum IgA antibody titer as a potential correlate of rotavirus vaccine efficacy[J]. J Infect Dis, 2013: 1-36. DOI: 10.1093/infdis/jit166

[30]Premkumar P, Lopman B, Ramani S, et al. Association of serum antibodies with protection against rotavirus infection and disease in South Indian children[J]. Vaccine, 2014, 32: A55-A61. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.04.077

[31]Steele AD, Madhi SA, Louw CE, et al. Safety, reactogenicity, and immunogenicity of human rotavirus vaccine RIX4414 in human immunodeficiency virus-positive infants in South Africa[J]. Pediatr Infect Dis J, 2011, 30(2): 125-130. DOI: 10.1097/INF.0b013e3181f42db9

[32]Clements-Mann ML, Dudas R, Hoshino Y, et al. Safety and immunogenicity of live attenuated quadrivalent human-bovine (UK) reassortant rotavirus vaccine administered with childhood vaccines to infants[J]. Vaccine, 2001, 19(32): 4676-4684. DOI: 10.1016/S0264-410X(01)00242-0

[33]Bayard V, DeAntonio R, Contreras R, et al. Impact of rotavirus vaccination on childhood gastroenteritis-related mortality and hospital discharges in Panama[J]. Int J Infect Dis, 2012, 16(2): e94-e98. DOI: 10.1016/j.ijid.2011.09.003

[34]Patel MM, L pez-Collada VR, Bulh es MM, et al. Intussusception risk and health benefits of rotavirus vaccination in Mexico and Brazil[J]. N Engl J Med, 2011, 364(24): 2283-2292. DOI: 10.1056/NEJMoa1012952

[35]Shui IM, Baggs J, Patel M, et al. Risk of intussusception following administration of a pentavalent rotavirus vaccine in US infants[J]. JAMA, 2012, 307(6): 598-604. DOI: 10.1001/jama.2012.97

[36]Buttery J, Danchin M, Lee K, et al. Intussusception following rotavirus vaccine administration: post-marketing surveillance in the National Immunization Program in Australia[J]. Vaccine, 2011, 29(16): 3061-3066. DOI: 10.1016/j.vaccine.2011.01.088

[37]Haber P, Patel M, Pan Y, et al. Intussusception after rotavirus vaccines reported to US VAERS, 2006-2012[J]. Pediatrics, 2013, 131(6): 1042-1049. DOI: 10.1542/peds.2012-2554

[38]Carlin JB, Macartney KK, Lee KJ, et al. Intussusception risk and disease prevention associated with rotavirus vaccines in Australia's national immunization program[J]. Clin Infect Dis, 2013, 57(10): 1427-1434. DOI: 10.1093/cid/cit520

[39]Kumar D, Beach NM, Meng XJ, et al. Use of PCR-based assays for the detection of the adventitious agent porcine circovirus type 1 (PCV1) in vaccines, and for confirming the identity of cell substrates and viruses used in vaccine production[J]. J Virol Methods, 2012, 179(1): 201-211. DOI: 10.1016/j.jviromet.2011.10.017

[40]Ichihara MY, Rodrigues LC, Teles Santos CA, et al. Effectiveness of rotavirus vaccine against hospitalized rotavirus diarrhea: A case-control study[J]. Vaccine, 2014, 32(23): 2740-2747. DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.01.007

[41]Payne DC, Baggs J, Zerr DM, et al. Protective association between rotavirus vaccination and childhood seizures in the year following vaccination in US children[J]. Clin Infect Dis, 2014, 58(2): 173-177. DOI: 10.1093/cid/cit671

[42]Patel MM, Haber P, Baggs J, et al. Intussusception and rotavirus vaccination: a review of the available evidence[J]. Expert Rev Vaccine, 2009: 1555-1564. DOI: 10.1586/erv.09.106

Fu Zuo-shen; Email: fuzuoshen@163.com

Progresses on human rotavirus vaccine

ZHANG Gai-mei,WEI Wen-jin,FU Zuo-shen

(BeijingMinhaiBiotechnologyCO.LTD,Beijing102600,China)

Rotavirus is a primary pathogen of infantile diarrhea under the age of five. Rotavirus infection is very popular in developed and developing countries, with similar morbidity, but the mortality is higher in developing countries. There has been no effective treatment at present and further improvement in hygiene to control the spread of rotavirus. So developing safe and effective vaccine is the best way for prevention of rotavirus diarrhea, in order to effectively reduce the morbidity and mortality. Although great progress has been achieved in rotavirus vaccine development, there are still many problems (such as the diversity and wide distribution of rotavirus) in the current rotavirus vaccines industry. Therefore, it's of great importance to develop sequentially navel rotavirus vaccine. The research progresses in human RV vaccine, quality control, protective efficiency and safety evaluation are reviewed in this paper for the pathogenic characteristics and the immune mechanism of the rotavirus.

human rotavirus vaccine; progress of vaccine research; quality control, protective efficiency; safety

歡迎訂閱《中國人獸共患病學報》郵發代號：34-46 全年訂價：96元

國家國際科技合作項目(No.2011DFA30750)和北京市科技計劃項目(No.Z141100000514010)聯合資助

付作申，Email:fuzuoshen@163.com

北京民海生物科技有限公司，北京 102600

Supported by the National International Technology Cooperation Projects (No. 2011DFA30750), and the Beijing Science and Technology Plan Projects (No. Z141100000514010)

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.06.019

R186

A

1002-2694(2015)06-0583-06

2014-08-25；

2015-03-12