回藥復(fù)方軟化動脈膠囊對糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化大鼠血脂、血流變的影響

時(shí) 沛 南 一 袁 玲 張?jiān)?陳怡萌 李 鑫 黨毓起

寧夏醫(yī)科大學(xué),寧夏 銀川 750001

回藥復(fù)方軟化動脈膠囊對糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化大鼠血脂、血流變的影響

時(shí) 沛 南 一 袁 玲 張?jiān)?陳怡萌 李 鑫 黨毓起*

寧夏醫(yī)科大學(xué),寧夏 銀川 750001

目的：研究回藥復(fù)方軟化動脈膠囊對糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化大鼠血脂、血流變的影響。方法：將40只糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、陽性對照組、回藥低劑量組、回藥高劑量組。治療后，觀察各組大鼠體重、飲食、血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)。結(jié)果：回藥復(fù)方軟化動脈膠囊可降低模型大鼠的飲食、體重，降低TC、TG、LDL-C(P<0.05)；升高HDL-C(P<0.05)；結(jié)論：回藥復(fù)方軟化動脈膠囊可以控制攝食量、體重的增加，降低血脂、全血粘度水平。

糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化；血脂；血流變

糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化是糖尿病并發(fā)癥中最常見的一種，已有調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者發(fā)生大血管病變的危險(xiǎn)性約是正常人的3倍，且動脈粥樣硬化占61.2%[1]。糖尿病患者往往伴有高血糖代謝紊亂，患者血中的總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白B(APOLB)均增高，內(nèi)分泌失調(diào)，嚴(yán)重影響患者的身心健康[2-3]。

回藥復(fù)方軟化動脈膠囊是臨床用于治療糖尿病合并動脈粥樣硬化且療效明顯的回藥方劑[4]。本課題通過觀察該藥對血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)的影響，進(jìn)一步探討回藥復(fù)方軟化動脈膠囊治療糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化的干預(yù)作用，為臨床推廣回藥復(fù)方軟化動脈膠囊提供依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 SD大鼠40只，均為SPF級，雄性，8周齡，體重(240±20)g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。動物許可證編號：SyXK(寧)2011-0001。

1.2 實(shí)驗(yàn)條件 SD大鼠每籠4只，飼養(yǎng)于寧夏醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)室，飼養(yǎng)溫度(21±1)℃，濕度：41%～51%，壓差：(20±2)Pa，每天光照與黑暗時(shí)間各12h。實(shí)驗(yàn)期間動物自由進(jìn)食、飲水。

1.3 儀器 獨(dú)立通氣籠IVC(型號：97，蘇州市蘇杭科技器材有限公司)；DS-671電子計(jì)重秤(器號：11387921，日本獨(dú)資上海寺岡電子有限公司)；冰箱(型號：BCD-236CKX 河南新飛電器有限公司)；自動雙重純水蒸饋器(上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)，型號SZ93)；AU400全自動生化分析儀(日本奧林巴斯公司)；LBY—N6K型全自動血流變儀(普利生科貿(mào)集團(tuán))；潔凈工作臺(蘇凈集團(tuán)蘇中安泰空氣技術(shù)有限公司)；

1.4 藥物與試劑 鏈脲佐菌素(STZ)為美國 Sigma公司；回藥復(fù)方軟化動脈膠囊由寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬銀川市中醫(yī)醫(yī)院制劑中心提供，為院內(nèi)制劑；血脂康膠囊由北京北大威信生物科技有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字 Z10950029，產(chǎn)品批號：20140912。

2 方法

2.1 模型的建立及評價(jià)[5-6]

2.1.1 糖尿病大鼠模型制備 ①除正常對照組喂食普通飼料，其余大鼠喂食高脂高糖飼料(由基礎(chǔ)飼料64%加入羊油15% 、蔗糖18% 、蛋黃3%，經(jīng)輻照處理)，誘導(dǎo)胰島素抵抗。②一周后，造模大鼠禁食，不禁水，隔夜空腹18h。STZ按45mg/kg體重腹腔注射，之后繼續(xù)喂以高糖高脂飼料，共8周。正常對照組大鼠在同等條件下腹腔注射檸檬酸鈉緩沖液，并繼續(xù)喂以普通飼料，共8周。

2.1.2 糖尿病大鼠模型的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 糖尿病判定標(biāo)準(zhǔn)：注射后第3日測定血糖，如連續(xù)測3次隨機(jī)血糖≥16.7mmol /L，或者出現(xiàn)多飲、多尿、消瘦、乏力等糖尿病癥狀，并且連續(xù)2次隨機(jī)血糖>11.1mmol /L，即視為糖尿病建模成功。

2.1.3 糖尿病合并動脈粥樣硬化大鼠模型制備 糖尿病模型成功大鼠繼續(xù)喂食高脂高糖飼料，均自由進(jìn)食、飲水，共8周。

2.1.4 糖尿病合并動脈粥樣硬化模型的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 隨機(jī)數(shù)字表法選取3只大鼠處死并取胸主動脈，HE染色提示動脈粥樣硬化形成，視為造模成功。

2.2 分組與給藥 SD大鼠按體重隨機(jī)分組，正常對照組8只：[蒸餾水1ml·(kg·d)-1，ig]；造模成功大鼠隨機(jī)分為4組：模型對照組8只：[蒸餾水1ml·(kg·d)-1，ig]，陽性對照組8只：[血脂康0.1g·(kg·d)-1，ig]，回藥低劑量組8只：[回藥復(fù)方軟化動脈膠囊0.2g·(kg·d)-1，ig]，回藥高劑量組8只[回藥復(fù)方軟化動脈膠囊0.6g·(kg·d)-1，ig]，連續(xù)灌服8周。

2.3 標(biāo)本采集與處理 每組大鼠在給藥8周后處死，處死前禁食不禁水12h，按2ml/kg體重腹腔注射8%戊巴比妥鈉麻醉，麻醉后，固定四肢，取腹部正中切口，分離下腔靜脈。在下腔靜脈插入無菌空針采血8～10ml。血液標(biāo)本以3000r/min離心5min，取上清液，置于-20℃冰箱內(nèi)保存待測。

2.4 測試指標(biāo)及方法 ①每天觀察并記錄各組大鼠的毛色、體態(tài)、行為活動等并記錄攝食量與體重。②血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)指標(biāo)的測定：分別測定血液流變學(xué)指標(biāo)及血脂四項(xiàng)指標(biāo)[血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]。

3 結(jié)果

3.1 一般情況 除正常組外，其他各組大鼠均出現(xiàn)多飲、多食癥狀，體質(zhì)量增加緩慢或減輕，少動，反應(yīng)遲鈍，皮毛干枯無光澤，并有不同程度的脫毛、眼病及尾部潰爛等。回藥復(fù)方軟化動脈膠囊各組及對照組上述一般情況較模型組有明顯改善。

3.2 各組大鼠攝食量情況 給藥期間，模型組攝食量均明顯高于其余各組；回藥組，陽性對照組攝食量減少，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；回藥高劑量組與陽性對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表3-1。

3.3 各組大鼠體重水平的變化 造模前各實(shí)驗(yàn)組大鼠體重差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；造模后體重正常對照組大鼠高于各治療組大鼠(P<0.01)；實(shí)驗(yàn)期間，正常組體重平穩(wěn)增加，各組大鼠體重均緩慢增加或減輕，體重減輕程度由大至小依次為：模型組>陽性對照組>回藥低劑量組>回藥高劑量組；8周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，回藥組和陽性對照組大鼠體重明顯高于模型組(P<0.05)。見圖3-1。

表3-1 每只大鼠每天攝食量

注：與正常對照組比較，△△P<0.01；與模型對照組比較，▲▲P<0.01；與陽性對照組比較，○○P<0.01；與回藥低劑量組比較，●●P<0.01。

3.4 各組大鼠血脂四項(xiàng)水平的變化 正常對照組血清TC水平明顯低于模型對照組；回藥組與模型組相比，TC水平明顯降低(P<0.01)；回藥高劑量組、陽性對照組TC水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型組大鼠與正常對照組相比血清TG水平明顯升高(P<0.01)；經(jīng)治療，回藥高劑量組與陽性對照組血清TG較模型對照組降低(P<0.05)；回藥組與陽性對照組之間TG水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；正常對照組HDL-C水平明顯高于模型對照組(P<0.01)，治療后，回藥高劑量組HDL-C水平明顯高于模型對照組(P<0.01)；模型組與回藥低劑量組、陽性對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；空白對照組LDL-C水平明顯低于其他各組；治療后，回藥組、陽性對照組LDL-C水平較模型對照組明顯升高(P<0.01)，高劑量組、陽性對照組LDL-C水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P>0.05)見表3-2。

3.5 各組大鼠血液流變學(xué)水平的變化 與正常對照組比較，模型對照組全血粘度高切變率、全血粘度中切變率、全血粘度高切變率、血漿粘度明顯升高(P<0.01)，治療后，各組全血粘度值較模型對照組明顯降低(P<0.01)，其中以回藥高劑量組作用明顯(P<0.01)；其中回藥高劑量組、陽性對照組全血粘度高切變率、全血粘度低切變率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3-3。

表3-2 各組大鼠血脂四項(xiàng)水平的變化

注：與正常對照組比較，△△P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01；與陽性對照組比較，○○P<0.01；與回藥低劑量組，●●P<0.01。

表3-3 各組大鼠血液流變學(xué)水平的變化(mPs.±s)

注：與正常對照組比較，△△P<0.01；與模型對照組比較，▲▲P<0.01；與陽性對照組比較，○P<0.05，○○P<0.01；與回藥低劑量組比較，●●P<0.01。

4 討論

回族醫(yī)學(xué)側(cè)重于從功能角度、整體角度、變化角度把握生命規(guī)律，其基本理論的“四元”、“三子”(七行)學(xué)說，各行氣組分之間充滿了各種聯(lián)系，真一陰陽七行系統(tǒng)在不斷地演化過程中，必須保持其內(nèi)部的相對穩(wěn)定，以適應(yīng)不斷變化的外部環(huán)境[7]。當(dāng)自身的調(diào)控能力降低，即生態(tài)失衡時(shí)，這些異常的病理產(chǎn)物，無法及時(shí)“成熟”而“清除”，將會成為損傷人體正氣、阻礙氣機(jī)的主要因素，同時(shí)又將傷陽、化熱、成瘀，成為疾病發(fā)展的主要病理環(huán)節(jié)[8]。這種觀點(diǎn)同樣也符合糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化產(chǎn)生時(shí)其內(nèi)外環(huán)境發(fā)生不平衡性的改變。

回藥復(fù)方軟化動脈膠囊是在回藥基本方基礎(chǔ)上結(jié)合中醫(yī)基礎(chǔ)理論指導(dǎo)下組方而成。在中醫(yī)理論中消渴病病機(jī)主要在于脾腎兩虛、痰濁瘀滯，病理性質(zhì)為本虛標(biāo)實(shí)，而以陰虛為本，痰瘀毒互結(jié)阻滯為標(biāo)，治當(dāng)補(bǔ)脾益腎、消瘀散濁為原則，因此在回醫(yī)理論指導(dǎo)下結(jié)合中醫(yī)基礎(chǔ)理論以獲得更好療效。方中以回藥方“消渴、肝脾腫硬、胸膈滿悶方”的“修合諸般帖藥方”為基礎(chǔ)，滴乳(乳香)、木兒(沒藥)、也而撒(知母)、胡咱則(枸杞)幫助人體自身的調(diào)控力，使病理產(chǎn)物得到清除，補(bǔ)脾益腎，活絡(luò)散瘀，恢復(fù)健康的穩(wěn)態(tài)稟性。而在此基礎(chǔ)上根據(jù)中醫(yī)理論加人參、黃芪、黃精、茯苓、阿福體汀(菟絲子)、婆固脂(補(bǔ)骨脂)、何首烏等補(bǔ)脾益腎，生津止渴；加川芎、葛根、干祖伐(牛膝)、澤瀉、山楂、法半夏、水蛭粉等祛痰消濁，化瘀通脈，加川黃連、黃芩等清熱解毒，全方共奏健脾補(bǔ)腎，祛痰消濁、化瘀通脈之效。

本課題糖尿病模型組較正常對照組飲食量明顯升高，體重明顯下降，血清TC、TG、LDL-C升高，HDL-C下降，全血粘度水平升高，通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)回藥復(fù)方軟化動脈膠囊可顯著降低糖尿病AS大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平，降低全血粘度水平，但其涉及的具體機(jī)制，仍有待于進(jìn)一步探討。

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[3]王明賢，陳嘉熠.2型糖尿病頸動脈粥樣硬化與血脂及載脂蛋白的關(guān)系[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2012，18(8)：88-89.

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[7]仝小林，張 昆，段 軍.經(jīng)方在糖尿病治療中的運(yùn)用[J].中醫(yī)雜志，2002，43(11)：868-870.

[8]單于德，單 利.回醫(yī)“三子”生理特性與病理探討[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志，2007，84：26-28.

寧夏自然科學(xué)基金項(xiàng)目項(xiàng)目(NZ1290)。

時(shí)沛 (1988-)，女，碩士，從事糖尿病及其并發(fā)癥防治專業(yè)。

黨毓起 (1963-)，男，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，從事糖尿病及其并發(fā)癥防治專業(yè)。

R285.5

A

1007-8517(2015)08-0014-03

2015.01.29)