蒙藥胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護作用

闞俊明 智 慧 黃曉華 王秀蘭 山 丹 奧·烏力吉*

1.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040；2.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；3.呼倫貝爾職業技術學院，內蒙古 海拉爾 021000；4.內蒙古民族大學，內蒙古 通遼 028300

蒙藥胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護作用

闞俊明1,2智 慧3黃曉華3王秀蘭4山 丹4奧·烏力吉4*

1.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040；2.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；3.呼倫貝爾職業技術學院，內蒙古 海拉爾 021000；4.內蒙古民族大學，內蒙古 通遼 028300

目的：研究胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護作用。方法：采用wister大鼠48只(雌雄各半)，隨機分為四組，模型組和正常組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，其余兩組給予胡槐軟肝片(簡稱蒙藥組)和護肝片(陽性組)進行保護，每日1 次，連續15 d，第14天除正常組外灌胃CCl4造模。檢測血清中谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)的含量和肝勻漿中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH)的含量，并觀察肝組織形態學特征。結果：胡槐軟肝片明顯降低血清中ALT、AST、ALP含量；明顯增加肝勻漿中 SOD、GSH的含量；抑制MDA的升高；改善肝細胞變性、水腫以及炎性程度。結論：胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷的保護作用。

胡槐軟肝片；藥物性肝損傷；保護作用

藥物性肝損傷(drug-induced liver disease，DILD)是由于藥物代謝產物引起的肝臟損害性疾病。據文獻報道，近年來由于藥物聯合運用、濫用及用藥不當等導致肝損傷的發病率呈逐年上升趨勢。胡槐軟肝片對藥物性肝損傷臨床療效較佳，本研究擬用該藥觀察藥物性肝損傷大鼠血清中ALT、AST、ALP和肝勻漿的MDA、SOD、GSH的含量以及觀察肝組織形態學變化，探討該藥對大鼠藥物性肝損傷的保護作用。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物 胡槐軟肝片由內蒙古呼倫貝爾職業技術學院提供(蒙醫專家驗方)，試驗時用蒸餾水配制成所需濃度備用；護肝片(批號：201306055)由黑龍江葵花藥業提供。

1.2 動物 wister大鼠，體重180～220g，由吉林大學實驗動物中心提供，許可證號為SCXK(吉) 2007-0004。

1.3 試劑 AST試劑盒(批號：14111101)、ALT試劑盒(批號：20140822)、ALP試劑盒(批號：140701)、MDA試劑盒(批號：20140619)、SOD試劑盒(批號：20140617)、GSH試劑盒(批號20140614)均由南京建成生物工程研究所提供；CCl4(批號：20130816)由天津市天力化學試劑有限公司提供。

1.4 儀器 B5-200全自動生化分析儀(深圳)；DY89-1電動勻漿機(寧波)； T6分光光度計(北京)；HZS-H水浴恒溫振蕩器(江蘇)；AUY120電子分析天平(日本)；HMIAS-2000病理彩色圖紋分析系統(日本)；RM2135 組織切片機(德國)；HG-941A電熱恒溫干燥箱(上海)。

1.5 方法 wister大鼠(雌雄各半)，實驗前一周適應性飼養，自由進食進水，按體重隨機分為4組，正常組和模型組每日灌胃10ml/kg的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液；蒙藥組和護肝片組分別灌胃0.68g/kg、0.36g/kg相應藥液，每次一次，連續15d，第14天除正常組外，其它組灌胃30% CCl4橄欖油溶液2 ml/kg灌胃造模，末次灌胃后禁食、不禁水24h。采樣之前稱體重，接著腹動脈取血，分離血清，測定ALT、AST和ALP的含量；取肝臟稱重，計算其指數(肝臟指數=肝臟重量/大鼠體重×100%)[1-6]；準確稱取新鮮肝左葉組織，制成10%的勻漿，離心15min，留取上清液，測定MDA、SOD、GSH含量；取同一部位肝右葉組織1塊，放入10%甲醛溶液中固定，制備切片，HE染色，進行光鏡觀察。

1.6 統計學方法 數據采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，組間均數比較采用方差分析，P<0.05表示有統計學差異。

2 結果

2.1 胡槐軟肝片對大鼠血清指標的影響 由表1、2可知，模型組各項指標與正常比較差異有統計學意義，說明造模成功。蒙藥組各項指標與以模型組相比，數值明顯降低，差異有統計學意義，說明胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷有一定的保護作用。

表1 胡槐軟肝片對大鼠血清ALT、AST、ALP的影響

注：與正常組相比，△P<0.01，△△P<0.05；與模型組相比，*P<0.05。

2.2 病理切片比較 由圖1可知，模型組的組織結構混亂，肝小葉不完整，有散在的點灶狀壞死，肝細胞濁腫，排列紊亂，中央靜脈周圍肝細胞脂肪變，可見少數嗜酸小體形成及小灶性肝細胞壞死，匯管區有明顯炎細胞浸潤；陽性組肝小葉較完整，匯管區比較清晰，血管周圍偶見少量炎細胞浸潤，肝細胞變性、壞死與模型組相比有明顯減輕；蒙藥組肝小葉較完整，少量的細胞水腫和脂肪變，匯管區可見少量炎細胞浸潤。

表2 胡槐軟肝片對大鼠肝勻漿MDA、SOD、GSH的影響

注：與正常組相比，△P<0.01；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01。

3 討論

由表1、2看出，模型組AST、ALT、ALP、MDA的含量顯著增加，SOD、GSH的含量明顯減小，給藥組以上指標明顯有所改變；從肝組織病理切片圖的結果得知，正常組肝細胞排列整齊，形態大小一致，肝索呈明顯的放射狀，匯管區無腫脹脂肪變壞死和血管周圍無炎細胞浸潤等病變；模型組的組織結構混亂，肝小葉不完整，有散在的點灶狀壞死，肝細胞濁腫，排列紊亂，中央靜脈周圍肝細胞脂肪變，可見少數嗜酸小體形成及小灶性肝細胞壞死，匯管區有明顯炎細胞浸潤；陽性組肝小葉較完整，匯管區比較清晰，血管周圍偶見少量炎細胞浸潤，肝細胞變性、壞死與模型組相比有明顯減輕；蒙藥組肝小葉較完整，少量的細胞水腫和脂變，匯管區可見少量炎細胞浸潤。表明胡槐軟肝片對CCl4所致大鼠藥物性肝損傷具有明顯的改善作用。

研究結果表明，胡槐軟肝片對藥物性肝損傷有一定的保護作用，其藥物性肝損傷保護作用機制有待于進一步探討深入研究。

[1] 周鵬程．愈肝解毒湯對CCl4所致大鼠急性肝損傷的保護作用[D]．成都：成都中醫藥大學，2012．

[2] 吳海建，龔秀，楊倚天，等．四氯化碳藥物性肝損傷體外模型的改進[J]．中國中藥雜志，2012，37 (23)：3633-3636．

[3] 李大壽，艾遠征．中藥致藥物性肝損傷的原因與預防措施[J]．中國實用醫藥，2011，28(10)：252-253．

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[6] 黃貴明，王冬梅，莫遺盛．樂肝口服液對四氯化碳誘導小鼠急性肝損傷的保護作用[J]．中國現代藥物應用，2010，4 (14)：146-147．

闞俊明(1974-)，男，副教授，博士研究生，主要從事中醫養生學的教學與科研工作。E-mail：kjming21@163.com

奧·烏力吉(1961-)，男，主要從事蒙藥新藥研發工作。E-mail：wuliji@163.com

R285.5

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1007-8517(2015)08-0028-02

2015.01.23)