烏司他丁對蜂蟄傷患者心肌損傷的保護作用

冉景兵 韋普成 劉涉泱 周 干

烏司他丁對蜂蟄傷患者心肌損傷的保護作用

冉景兵 韋普成 劉涉泱 周 干

目的 探討烏司他丁對蜂毒致心肌損傷的保護作用。方法 58例蜂毒致心肌損傷患者隨機分為兩組，均給予西醫常規治療，在此基礎上，治療組28例予以烏司他丁靜脈滴注，對照組30例予以果糖二磷酸鈉靜脈滴注。檢測兩組心肌酶譜［肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)］在入院當天、48 h及7 d后的水平，而超敏C反應蛋白(hs-CRP)以及血漿丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、白介素6(IL-6)分別在入院當天及7 d后檢測變化情況。結果 入院時兩組患者血漿CK、CK-MB、LDH等心肌酶指標比較差異無統計學意義(P＞0.05)；治療48 h后，治療組心肌酶各項指標較對照組低，差異有統計學意義(P＜0.05)，治療7 d后兩組患者心肌酶各項指標比較，治療組優于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)；治療7 d后對照組血漿MDA、hs-CRP、IL-6較治療組高，而SOD較低，差異均有統計學意義(P＜0.05)。結論 烏司他丁對蜂毒致心肌損傷有較好的保護作用，其機制可能與抗氧化應激、抗炎有關。

蜂蟄傷；心肌損傷；烏司他丁；氧化應激

蜂蟄傷可造成人體多種組織器官的損害，甚至出現多器官功能衰竭(MODS)。本文通過檢測蜂蟄傷患者的血清心肌酶水平以及相關炎癥指標以了解心肌受損情況及探討其可能的發生機制，為臨床治療使用烏司他丁對心肌損傷的保護作用做一探討。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性收集2010年1月～2013年12月本科室收治的蜂蟄傷患者58例，男33例，女 25例，年齡15～68歲，平均年齡(43.8±8.2)歲。58例患者隨機分為對照組(30例)及治療組(28例)。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 治療組及對照組均在入院當天完成抽血。所有蜂蟄傷患者均常規給予抗炎、抗過敏、維持水電解質平衡等對癥支持治療，治療組在此基礎上加用烏司他丁靜脈滴注，1次/d；對照組予以果糖二磷酸鈉靜脈滴注，1次/d，療程均為7 d。

1.2.2 檢測方法

1.2.2.1 心肌酶學檢測 在患者分別入院治療當天、48 h及7 d后即取靜脈血，離心分離血清，按照說明書在HITACHI 7600型全自動生化分析儀檢測；hs-CRP應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測。

1.2.2.2 MDA、SOD(南京建成生物公司)活性檢測 在患者分別入院時及治療7 d后即取靜脈血，離心分離血清，按照試劑盒說明書步驟操作，測定吸光度后計算出血清中指標含量。

1.2.2.3 IL-6檢測(ELISA法) 在患者分別入院時及治療7 d后取正常人和蜂蟄傷患者外周血2 ml，于4℃下離心10 min，分離血清。IL-6的ELISA檢測試劑盒由美國Ebioscience公司提供，按試劑盒說明書進行操作。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示，采用t檢驗；計數資料以率(%)表示，采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 心肌酶學檢測結果 入院時兩組心肌酶指標比較差異無統計學意義(P＞0.05)，治療48 h后，治療組與對照組心肌酶指標均下降，但治療組下降較明顯，兩組間差異具有統計學意義(P＜0.05)，治療7 d后，兩組心肌酶學指標開始逐漸恢復,但對照組高于治療組，差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組MDA、SOD、hs-CRP、IL-6變化情況 治療組與對照組治療前MDA、SOD、hs-CRP、IL-6兩組間差異無統計學意義(P＞0.05)，但治療后MDA、SOD、hs-CRP、IL-6兩組間比較差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表1 兩組患者各時間點心肌酶學指標比較(s，IU/L)

表1 兩組患者各時間點心肌酶學指標比較(s，IU/L)

注：與入院時比較，aP＜0.05；與對照組同時間點比較，bP＜0.05

?

表2 兩組MDA、SOD、hs-CRP、IL-6在各時間點的變化比較(s)

表2 兩組MDA、SOD、hs-CRP、IL-6在各時間點的變化比較(s)

注：與對照組同時間點比較，aP＜0.05，bP＞0.05

?

3 討論

蜂毒作為一種含有酶類、生物胺、多肽類和其他物質成分的混合物，其產生的蜂毒肽可影響橫紋肌細胞膜通道及其能量供應，并且能抑制心肌線粒體Na+-K+-ATP酶活性，導致心肌缺血、缺氧，誘發冠狀動脈痙攣和繼發性血栓形成,導致心律失常，甚至嚴重可導致急性心肌梗死［1］。目前其發病機制尚不十分清楚。本研究從炎癥氧化應激損傷方面探討其可能的發生機制，為臨床治療與預后評估提供參考以及幫助。

既往的研究結果已提示蜂蟄傷可導致嚴重的細胞損傷。其機制可能為細胞損傷后大量聚集和粘附的中性粒細胞釋放氧自由基和炎性介質，并增加了中性粒細胞向受損心肌的滲透，從而誘發心肌炎性反應，進一步加重心肌的損傷［2］。MDA是脂質過氧化反應的主要代謝產物，其水平的高低代表脂質過氧化的強度和速率，也間接反映細胞DNA受損傷程度［3,4］。SOD作為人體內重要的自由基清除劑，在清除體內過量的超氧陰離子自由基及阻斷和預防一系列自由基連鎖反應的進程、保護生物膜免受氧化應激和自由基損傷中起著重要的作用［5］。SOD的活性高低能夠間接地反映機體清除氧自由基、消除炎癥反應的能力。因炎癥反應能通過各種途徑產生大量的氧自由基，使脂質過氧化產物MDA含量升高，引起細胞損傷，導致細胞功能破壞及器官損傷。因此MDA可作為體內評價細胞氧化損傷的指標之一。故檢測SOD的活性及MDA含量的高低可以一定程度上評估細胞的氧化損傷程度。

CRP及IL-6均是機體內重要的促炎因子。CRP是一種急性相反應蛋白，對某些疾病的診斷、鑒別診斷及療效觀察有重要參考意義。近幾年來作為炎癥、感染、心血管疾病、組織損傷、免疫復合物、腫瘤的檢測項目已廣泛運用于臨床和科研。IL-6 主要由單核細胞產生，也可由激活的巨噬細胞、內皮細胞、成纖維細胞等產生。 IL-6 是炎癥反應中刺激急性反應蛋白合成的主要因子［6］，具有催化和放大炎性反應的作用。

本研究發現，蜂蟄傷患者hs-CRP、IL-6炎癥因子及MDA均有明顯的升高，提示機體蜂毒物吸收后體內產生和釋放大量的自由基和活性氧，形成氧自由基連鎖反應，導致化學性中毒的炎癥反應，產生炎癥因子，引起機體的炎癥損傷。本研究發現蜂蟄傷患者MDA及炎癥因子hs-CRP、IL-6均較正常水平高，證實蜂蟄傷患者確實存在氧化應激反應。

烏司他丁是從人尿液中分離純化的蛋白酶抑制劑，屬人體內源性抑炎物質，其前體是肝臟合成的胰蛋白酶抑制劑。研究發現烏司他丁對多種酶，如胰蛋白酶、α-糜蛋白酶等有抑制作用，可抑制多種水解酶的活性、穩定溶酶體膜、抑制炎性介質的過度釋放及改善微循環和組織灌注［7,8］。有實驗證明烏司他丁對心肌缺血再灌注損傷有保護作用，其機制與清除氧自由基、抑制炎癥釋放以及穩定細胞膜及改善微循環等有關［9］。亦有實驗證明烏司他丁可以通過抑制炎性反應,降低炎癥因子表達，減少心肌細胞氧化損傷的途徑從而減輕心肌缺血再灌注損傷，其機制可能是通過下調 IL-6 和 IL-8介導的炎性反應而實現［10］。

在本研究中亦可發現，烏司他丁明顯抑制MDA水平(P＜0.05)，并顯著拮抗SOD活力的下降(P＜0.05)，提示其具有抗氧化作用。而隨著抗氧化的增強，患者的炎癥水平也隨之下降，說明烏司他丁的抗炎作用是通過清除氧自由基抗氧化作用，減輕細胞氧化損傷實現的。

綜上所述，烏司他丁能夠減輕蜂蟄傷患者的心肌損傷,抑制hs-CRP及IL-6水平增高，減輕炎癥反應，其發揮抗炎保護心肌損傷的機制可能與提高清除氧自由基的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活性，明顯提高損傷細胞的抗氧化能力，從而明顯減少細胞損傷有關。

［1］ Kang HS，Kim SJ，Lee MY，et al.The cardiovascular depression caused by bee venom in Sprague-Dawley rats associated with a decrease of developed pressure in the left ventricular and the ratio of ionized calcium/ionized magnesium.Am J chin Med，2008，36(3):505-516.

［2］ Kogias JS，Sideris SK，Anifad is SK.Koun is syndrome associated with hypersens itivity to hymenoptera stings.Int J Cardiol，2007，114(2):252-255.

［3］ 武陽，常青，楊旭.不同濃度甲醛致大鼠肝細胞DNA氧化損傷作用.環境科學學報，2009，29(11):2415-2419.

［4］ 李巖，彭光銀，何胡軍，等.碳納米管導致小鼠肺部急性氧化損傷作用的研究.生態毒理學報，2006，1(4):357-361.

［5］ Zhou JF，Zhou YH，Zhang L，et al.3，4-Methylenedioxymethamphe tamine (MDMA) abuse markedly inhibits acetylcholinesterase activity and induces severe oxidative damage and lipoper oxidative damage.Biomed Environ Sci，2003，16(1):53-61.

［6］ Yadav K，Zehtabchi S，Nemes PC，et al.Early immunologic responsesto trauma in the emergency department patients with major injuries.Resuscitation，2009，8(1):83-88.

［7］ Fang Y，Xu P，Gu C，et al.Ulinastatin improves pulmonary function in severe burn-induced acute lung injury by attenuating inflammatory response.J traumu，2011，71(5):1297-1304.

［8］ XU CE，Zhang MY，Zou CW，et al.Evaluation of the pharmacological function of ulinastatinin experimental animals.Molecules，2012，17(8):9070-9080.

［9］ 許建強，梁建球，袁滿娟，等.烏司他丁對心肌缺血-再灌注損傷患者炎癥抑制作用的影響.實用醫學雜志，2013，29(20): 3406-3409.

［10］ 王媛媛，曹建，鄧莉，等.烏司他丁對大鼠缺血再灌注心肌細胞的保護機制.中國醫藥導報，2014，11(20):13-15.

Protective effect by ulinastatin for myocardial damage in bee sting injury patients

RAN Jing-bing，WEI Pu-cheng，LIU She-yang，et al.Department of Intensive Medicine，Hechi City People’s Hospital，Hechi 547000，China

Objective To investigate protective effect by ulinastatin for bee venom-induced myocardial damage.Methods A total of 58 patients with bee venom-induced myocardial damage were randomly divided into two groups.Both group received conventional treatment by Western medicine.The treatment group with 28 cases received intravenous drip of ulinastatin，and the control group with 30 cases received intravenous drip of fructose dipllosphate sodium.Myocardium enzymogram levels ［creatine kinase (CK)，creatine kinase-MB (CK-MB)，lactic dehydrogenase (LDH)］ were detected in the two groups at admission and after 48 h and 7 d.Changes of high sensitivity C-reactive protein (hs-CRP)，serum malonaldehyde (MDA)，superoxide dismutase (SOD)，and interleukin-6 (IL-6) were detected at admission and after 7 d.Results At their admission，the two groups had no statistical significance in differences of plasma CK，CK-MB，LDH indexes (P＞0.05).After 48 h of treatment，the treatment group had lower indexes than the control group，and their difference had statistical significance (P＜0.05).After 7 d of treatment，the treatment group had better indexes than the control group，and their difference had statistical significance (P＜0.05).The control group had higher plasma MDA，hs-CRP and IL-6，and lower SOD than the treatment group after 7 d.Their differences all had statistical significance (P＜0.05).Conclusion Ulinastatin provides good protective effect for bee venom-induced myocardial damage，and its mechanism may be related with anti-oxidative stress and anti- inflammation.

Bee sting injury; Myocardial damage; Ulinastatin; Oxidative stress

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.29.002

2015-03-24］

547000 河池市人民醫院重癥醫學科