尿PCA3評分在前列腺癌的診斷意義分析

王亮 周明偉

尿PCA3評分在前列腺癌的診斷意義分析

王亮 周明偉

目的 探討尿前列腺癌基因3(PCA3)評分在前列腺癌的診斷意義。方法 選取前列腺直腸指診異常的受檢者82例作為觀察組, 另選取30例同期健康查體者作為對照組。檢測兩組尿液中前列腺特異抗原(PSA)和PCA3 mRNA的表達并計算尿PCA3評分, 觀察組均行超聲引導下穿刺檢查確定前列腺癌發生情況, 并采用ROC曲線分析尿PCA3評分診斷前列腺癌的準確性。結果 觀察組的尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分分別為(490.12±373.42)、(62.52±54.16)和(159.85±118.78)分,高于對照組的(352.42±326.62)、(4.21±4.03)和(11.95±6.25)分, 差異有統計學意義(P＜0.05)。觀察組確診為良性前列腺增生、前列腺癌的患者比例分別為43.90%和56.10%, 前列腺癌患者尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3, 差異有統計學意義(P＜0.05), 而良性前列腺增生患者和對照組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較, 差異均無統計學意義(P＞0.05)。尿PCA3評分經ROC曲線分析, 其ROC-AUC=0.893［95%CI(0.834, 0.942)］, 本研究中以截斷值65為前列腺癌診斷的臨界值時截斷值以上有41例前列腺癌患者, 敏感性為89.13%, 截斷值以下63例良性前列腺增生患者和健康人群, 特異性為95.45%, 陽性預測值和陰性預測值分別為93.18%和92.65%, 尿PCA3評分診斷前列腺癌發生的價值良好。結論 尿PCA3評分在前列腺癌患者中的水平較高且其截斷值為65時診斷前列腺癌可獲得較高的診斷價值, 因此尿PCA3評分可能作為前列腺癌診斷的參考指標之一。

尿前列腺癌基因3評分；前列腺癌；診斷

近年來隨著生活方式的改變和人口老齡化的加劇, 各類癌癥的發生率逐漸上升。作為老年男性常見腫瘤疾病, 前列腺癌指的是在前列腺發生的上皮性惡性腫瘤, 患者早期常無臨床癥狀, 前列腺癌腫瘤逐漸增大可導致排尿困難、血尿、陽痿等癥狀的出現, 臨床常采取直腸指診、血清PSA、經直腸前列腺超聲和盆腔MRI檢查等, 但其早期檢出率低, 患者長常無法得到早期診治［1］。且直腸指診、血清PSA、經直腸前列腺超聲和盆腔MRI等檢查對于前列腺癌均非特異性, 前列腺增生等均可出現四種檢查結果的異常。超聲引導下穿刺活檢作為前列腺癌檢查的金標準, 雖可較準確地檢出前列腺癌, 但其侵入性給患者帶來的創傷和痛楚較大。尋找無創有效的前列腺癌診斷方法對前列腺癌的早期診治和預后改善均具有重要意義。PCA3是近年來發現的特異地表達于前列腺癌細胞的基因, 且其表達水平可隨患者前列腺癌的發展而變化［2］。然而目前國內外關于尿PCA3 mRNA水平和PCA3評分在前列腺癌診斷中的研究報道甚少。本研究分析前列腺癌患者、良性前列腺增生患者和健康人群PSA mRNA、PCA3 mRNA水平和PCA3評分的水平及其PCA3評分對前列腺癌的診斷價值, 為前列腺癌的早期診斷和治療提供依據, 結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月～2013年1月本院前列腺直腸指診異常的患者82例作為觀察組。納入標準：患者均為前列腺直腸指診異常患者且知情同意；排除標準：排除合并心肝肺腎等器官功能障礙患者和因各類原因無法配合實驗檢查完成的患者。另選取30例同期健康查體者作為對照組。實驗經醫院倫理委員會審核批準且入選者均已簽署知情同意書。觀察組年齡35～81歲, 平均年齡(69.54±6.88)歲, 體質量指數(BMI)19.4～33.8 kg/m2, 平均BMI(23.62±2.78)kg/m2。對照組年齡33～85歲, 平均年齡(70.28±67.59)歲, BMI 18.9～33.2 kg/m2, 平均BMI(23.16±3.24)kg/m2。兩組研究對象年齡、BMI等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 檢測方法 采用PCR定量分析法檢測觀察組和對照組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA表達水平并計算PCA3評分。具體如下：受檢者均采用傳統指診, 觸及前列腺后從左右兩側向中央用力按摩3次, 再從前列腺頂部向中央按摩3次,囑患者排尿時收集尿液約50 ml并置于冰水中冷卻。將尿液標本以3500 r/min離心約10 min后取尿沉渣保存待測。根據TaKaRa一步法提取RNA后采用微量分光光度計測定其RNA的濃度及純度后用于定量PCR反應。根據TaKaRa ExScript TM RT-PCR Kit說明書進行逆轉錄并制備cDNA、PCA3、PSA和內參β-actin的熒光定量PCR標準曲線。采用擴增儀進行反應并制作溶解曲線和確定增產的特異性。擴增采用20 μl反應體系并于預冷的RNase free 反應管中添加cDNA 2 μl、primer-F 1 μl、2 μM primer-R 1 μl、2×Easy-Taq PCR SuperMix 10 μl、10×SR Green 10.5 μl及ddH2O 1.3 μl, 擴張反應具體如下：于95℃環境中預變性10 min, 95℃環境中變性15 s, 60℃環境中退火30 s, 72℃環境中延伸15 s, 如此循環40次后于72℃環境中延伸10 min并將PCR產物于-20℃恒溫箱中保存待查。分析溶解曲線并通過檢測的Ct值表示各基因的mRNA表達量。此外觀察組均行超聲引導下穿刺檢查確定前列腺癌發生情況。

1.3 治療方法 確診為前列腺癌患者均接受相應的抗癌治療, 確診為良性前列腺增生患者亦接受相應的治療。

1.4 評價方法 PCA3評分：PCA3評分=(PCA3 mRNA/PSA mRNA)×1000。

1.5 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；多組計量資料比較采用方差分析, 進一步兩兩比較采用q檢驗；尿PCA3評分在前列腺癌診斷中的應用價值分析采用受試者操作特性曲線(ROC)。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較 與對照組比較, 觀察組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分均升高, 差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 不同超聲引導下穿刺檢查結果的患者及對照組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較 82例受檢者超聲引導下穿刺檢查結果顯示良性前列腺增生、前列腺癌的患者例數分別為36例和46例, 分別作為良性前列腺增生組、前列腺癌組。良性前列腺增生、前列腺癌的患者比例分別為43.90%(36/82)和56.10%(46/82)。前列腺癌患者尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分均高于良性前列腺增生患者和對照組, 差異有統計學意義(P＜0.05), 而良性前列腺增生患者和對照組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較,差異均無統計學意義(P＞0.05)。見表2, 圖1。

表1 兩組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較( x-±s)

表2 不同超聲引導下穿刺檢查結果患者及對照組尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分比較( x-±s)

2.3 PCA3評分在前列腺癌診斷中的應用價值的ROC曲線分析 ROC曲線分析結果顯示, PCA3評分截斷值65為前列腺癌診斷的臨界值時預測甲狀腺癌的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值均較高, 尿PCA3評分截斷值65時診斷前列腺癌發生的價值良好且優于傳統中截斷值為35時診斷前列腺癌發生的價值。見表3, 圖1。

表3 不同PCA3評分截斷值在前列腺癌診斷中的應用價值比較

圖1 PCA3評分和PSA在前列腺癌診斷中的應用價值比較

3 討論

前列腺 癌是老年男性泌尿生殖系統最常見的惡性腫瘤疾病之一, 其發病率較高, 約占男性惡性腫瘤的1/4, 且其病死率約占男性惡性腫瘤的1/10。近年來隨著我國老齡化的加快及飲食結構和生活方式的改變, 前列腺癌在我國男性中的發病率逐漸上升。前列腺癌發病早期無特異性的臨床癥狀, 部分患者甚至無任何臨床表現, 而部分患者出現臨床表現并確診時可能已發生局部浸潤或骨骼、淋巴結等遠處轉移, 患者往往預后不良。因此對前列腺癌的早期診治具有重要意義。傳統影像學檢查、血清學檢查及穿刺活檢等前列腺癌輔助診斷方法存在準確性較低、特異性偏低或創傷較大等不足, 在前列腺癌早期診斷中的應用效果不佳。尋找有效且無創的前列腺癌輔助診斷方法對前列腺癌的早期診治具有重要意義。PCA3作為新發現的前列腺癌特異性標記物,可在人類前列腺癌細胞中特異性表達, 因此可能用于前列腺癌的診斷中［3］。目前關于PCA3基因的表達研究報道發現其在前列腺癌中表達水平較高, 正常前列腺中的表達水平較低, 而在其他組織或腫瘤標本中不表達［4］。然而目前國內外關于前列腺癌患者尿中PCA3基因的表達和PCA3評分及其在前列腺癌診斷中的應用研究報道較少, 明確尿PCA3評分在前列腺癌診斷中的應用價值可為前列腺癌的早期無創診斷提供依據。

本研究結果顯示, 尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分在肛門指診出現前列腺腫塊患者中的水平均較高且均高于正常健康人群。而出現前列腺癌患者的尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3評分明顯高于良性前列腺增生患者和健康人群, 這與PCA3基因在前列腺癌中高表達和在非前列腺癌患者和健康人群中表達水平較低的理論一致。超聲引導下穿刺檢查結果發現直腸指診出現前列腺腫塊的男性前列腺癌的發病率較高, ＞50%的直腸指診出現前列腺腫塊患者為前列腺癌, 因此老年男性應定期行前列腺檢查以及早發現前列腺腫塊的發生, 并及時進一步確定前列腺癌癥的發生以達到前列腺癌早發現和早治療的目的。前列腺癌患者尿PCA3 mRNA特異性表達提示PCA3相關指標可能用于前列腺癌的預測。尿PCA3評分可通過尿PCA3和PSA在尿中的基因表達水平的比值反映患者前列腺發病情況, ROC曲線分析結果顯示, 不同尿PCA3評分截斷值診斷前列腺癌的靈敏度和特異度等不一, 其中以65為尿PCA3評分截斷值時可取得同時取得較高的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值, 對前列腺癌診斷的價值最優, 優于傳統以35為PCA3評分截斷值對前列腺癌診斷的價值。因此尿PCA3評分可能用于前列腺癌的輔助診斷, 而出現尿PCA3評分的老年男性需進一步確診其前列腺癌的發生情況以早期干預并改善患者預后。由于本研究樣本量偏小且尿PSA、PCA3評分等亦可受患者前列腺良性病變等的影響, 因此明確尿PCA3評分診斷前列腺腺癌的價值需更大樣本量的全面深入研究。

綜上所述, 前列腺癌患者尿PCA3評分較高且對前列腺癌診斷具有一定價值, 當其截斷值為65時診斷前列腺癌可獲得較高的診斷價值, 因此尿PCA3評分可能作為前列腺癌診斷的參考指標之一。

［1］ 李世杰, 王鑫坤, 王佳, 等.高b值DWI對前列腺癌和前列腺炎的鑒別診斷價值.中國醫學影像學雜志, 2012(12):887-889.

［2］ 高建軍, 韓瑞發.尿液前列腺癌基因3檢測診斷前列腺癌的Meta分析.中國全科醫學, 2013, 16(5):483-486.

［3］ Kovács GL. New challenges and earlier approved methods in the laboratory diagnosis of prostate cancer. Magy Onkol, 2014, 58(4): 301-309.

［4］ 曹達龍, 葉定偉, 張世林, 等.前列腺癌特異抗原3對前列腺癌LNCaP細胞增殖的影響.中國癌癥雜志, 2012, 22(2):135-138.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.23.053

2015-04-23］

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