酶聯免疫法檢測唾液中幽門螺桿菌抗體的效果分析

滕巖 遲偉 姜順愛 楊梅

酶聯免疫法檢測唾液中幽門螺桿菌抗體的效果分析

滕巖 遲偉 姜順愛 楊梅

目的 探討酶聯免疫法(ELISA)檢測唾液中幽門螺桿菌(Hp)抗體在診斷Hp感染中的臨床效果。方法 通過對110例感染幽門螺桿菌患者唾液中的Hp抗體進行ELISA和其他三種常規方法檢測,評價ELISA檢測Hp感染的臨床效果。結果 110例患者應用ELISA法檢測Hp感染與其他三種常規方法之間差異無統計學意義(P＞0.05), Hp抗體在胃腸道疾病中檢出率較高。結論 ELISA對唾液中的Hp抗體檢測靈敏度和特異度高, 且具有創傷小、恢復快、方法簡單等特點, 可作為檢測Hp感染的診斷指標。

酶聯免疫法；幽門螺桿菌；唾液

Hp是一種呈現螺旋狀或弧狀的慢性感染性細菌, Hp通常是導致胃腸道出現炎癥的主要因素, 在人群中的感染率較高, 但是由于Hp感染沒有臨床特異性癥狀, 在我國診斷治療中, 主要是借助臨床病理學診斷檢查和快速尿素酶實驗(Rapid Urease Test, RUT)等方法作為主要診斷依據［1］, 但是此類方法較為繁瑣, 且對患者機體造成一定的傷害。臨床檢驗需要一種簡便、可行及易被患者接受的快速檢測Hp的方法, 通過對國內外檢測方法的研究［2,3］, 應用ELISA對唾液中的Hp抗體進行檢測, 檢測出Hp抗體呈現陽性。本院對110例感染幽門螺桿菌患者唾液中的Hp抗體進行檢查, 同時采用臨床常規檢測方法對比, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取110例本院2013年6月~2014年12月消化內科住院患者進行研究, 其中男54例, 女56例, 年齡14~75歲, 平均年齡(44.5±4.8)歲, 110例患者患病包括慢性胃炎、胃、十二指腸潰瘍、胃、十二指腸急性穿孔及胃癌等。所有患者檢測前應用唾液采集器采集患者唾液, 并置于-18℃冰箱中保存, 同時在食管和胃腸道活檢黏膜若干塊,以備快速尿素酶試驗、HE染色和病理學檢查使用。

1.2 試劑材料和儀器 唾液采集應用北京中創先鋒科技有限責任公司的唾液采集器及Hp-IgG試劑盒, 幽門螺桿菌抗體檢測采用北京美康生物技術研究中心有限責任公司提供的檢測試劑盒, 酶標儀采用上海賽默科技生物發展有限公司Thermo MK3酶標儀及其相關試劑, 分光光度計采用北京普析通用儀器有限責任公司T6紫外可見分光光度計。

1.3 方法 通過酶聯免疫法檢查患者唾液中的幽門螺桿菌抗體, 在受檢者做內鏡檢查前40 min用唾液采集器采集患者唾液, 通過Thermo MK3酶標儀對唾液中的Hp-IgG檢測, 對IgG進行標記形成抗原復合物, 捕獲標記的親和物顯色后, 在450 nm波長下測定A值(吸光值), 陰性孔A值+0.20為上限值, 大于上線值判定為陰性。內鏡活檢樣本分別進行RUT、HE染色及WS染色法檢測Hp。通過以上三項檢查, 如果其中大于等于兩項檢查為陽性者預判為陽性, 三項檢查均為陰性者為陰性。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0統計軟件進行統計分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 唾液Hp抗體檢測 通過對110例患者唾液樣品檢測, ELISA法Hp陽性檢測結果為79例, Hp陰性為31例；三種常規檢測方法檢出陽性均值為81例, 陰性均值為29例。通過與RUT比較, ELISA的靈敏度為97.4%(76/78), 特異度為90.6%(29/32)。與HE染色法比較, 靈敏度為96.2%(75/78),特異度為87.5%(28/32)。與WS染色法比較, 靈敏度為97.5%(77/79), 特異度為93.5%(29/31)。通過統計學分析得出ELISA與其他三種常規方法之間差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

2.2 不同疾病患者唾液Hp-IgG檢出情況 Hp抗體在不同疾病患者檢出率有所不同, 其中在胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎等疾病中檢出率相對較高。見表2。

表1 110例患者唾液幽門螺桿菌抗體與三種常規檢查方法比較(n)

表2 不同疾病患者唾液幽門螺桿菌抗體檢出情況(n, %)

3 討論

通過本次研究得出, Hp與胃、十二指腸潰瘍及慢性胃炎相關, 這也與Marshall［4］的研究結果一致, 消除和降低Hp對于改善胃腸道疾病有顯著性意義, 可以降低疾病的復發和其他并發癥的出現。目前我國診斷Hp感染主要采用內鏡活檢在黏膜上的檢查［5］, 但是此種方法屬于侵入性檢查, 且費用較高, 多數患者在經濟和精神上難以接受。部分醫院采用13C和14C呼氣試驗間接檢測Hp抗原, 但是14C對人體及環境會造成污染, 尤其不適用于孕婦及嬰幼兒檢查, 作為14C升級版的13C檢查雖然去除了放射性, 但由于造價較高, 不易被患者接受, 推廣程度并不高。

本次研究通過與其他三種常規檢測方法進行比較發現, ELISA檢測結果與常規方法差異無統計學意義(P＞0.05)。此外, 作者還發現測定血清中的抗Hp-IgG與測定唾液抗Hp-IgG一致性較高, 說明在體內循環的作用下血清中的抗Hp-IgG可以循環到唾液及胃液等地方, 可以作為診斷是否感染Hp的依據, 因此Hp-IgG可以作為Hp感染的診斷指標。此外, 本次研究結果顯示, ELISA檢測Hp的靈敏度和特異度均較高, 口腔中存在多種不同的菌體抗原和免疫蛋白可能是導致診斷出現少數假陽性和假陰性結果的原因［6］。本研究結果顯示唾液中的Hp-IgG水平高低可以作為檢測Hp感染的診斷指標, 與三種常規檢測方法之間差異無統計學意義(P＞0.05), 并且易被患者接受, 具有臨床診斷意義, 值得推廣。

［1］ 俞瑩瑩, 吳勤動, 許凱聲.唾液幽門螺桿菌抗原檢測與慢性胃炎活動性及癌前病變關系的研究.中國實用內科雜志, 2006, 26(18):1421-1423.

［2］ 宋敏, 李進, 李仕英, 等.用聚合酶鏈反應擴增16SrRNA基因檢測幽門螺桿菌.中華醫學檢驗雜志, 2003, 16(5):268.

［3］ Desai HG, Gill HH, Shankaran K, et al.Dental plaque: a Permanent Reservoir of Helicobacter pylori? Scand J Gastroenterol, 1991, 26(11):1205-1208.

［4］ Marshall BJ, Warren JR.Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration.Lancet, 1984, 1(8390): 1311-1315.

［5］ 朱人敏, 路又可, 王琳.唾液抗幽門螺桿菌抗體的檢測.中華內科雜志, 1997(36):469-470.

［6］ Patel P, Mendal MA.Salivary antibodies to Helicobacter pylori: screeing dyspetic patients befor endoscopy.Lancet, 1994, 344(8921): 511-512.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.030

2015-01-21］

154002 佳木斯市傳染病院(滕巖 姜順愛 楊梅)；佳木斯大學附屬第一醫院(遲偉)