胃癌組織中Survivin和COX-2的表達及其相關性的研究

金鍔

胃癌組織中Survivin和COX-2的表達及其相關性的研究

金鍔

目的 探討環氧合酶-2(COX-2)和生存素(Survivin)在胃癌的發生、發展過程中的作用。方法 選擇61例胃癌組織和15例正常胃組織, 采用免疫組化方法檢測兩種組織的COX-2和Survivin的表達情況。結果 在61例胃癌組織中, 有46例COX-2胞漿陽性表達(75.4%), 正常胃組織為陰性表達, 差異有統計學意義(P＜0.05)；Survivin胞漿陽性表達31例(50.8%), 正常胃組織為陰性表達,差異有統計學意義(P＜0.05)。結論 Survivin與COX-2可能有共同的激活機制, 在胃癌的發生、發展過程中起重要作用。

環氧合酶-2；生存素；胃癌；免疫組化

胃癌(gastric cancer, GC)是消化道最多見的惡性腫瘤, 我國是高發區, 它的發生、發展是由多種癌基因, 包括原癌基因、抑癌基因、促凋亡基因、凋亡抑制基因共同參與多階段的過程。從分子水平探討胃癌發病是近年來研究的熱點［1］。研究報告表明COX-2和Survivin是與胃癌生成密切相關的分子標志物, 二者可以通過信號傳導在胃癌通路中相互作用［2］。本實驗采用免疫組化方法檢測了61例胃癌組織中COX-2、Survivin的表達, 以探討其表達與胃癌是否相關。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2003年1月～2007年1月手術切除的胃癌石蠟包埋標本61例, 其中男37例, 女24例, 年齡35～73歲, 平均年齡56歲；按TNM分期：Ⅰ期8例, Ⅱ期17例, Ⅲ期30例, Ⅳ6例；淋巴結轉移陽性者36例(59.0%),淋巴結轉移陰性者25例(41.0%)；分化程度為中高分化42例(68.9%), 低分化19例(31.1%)。術前患者均未化療或放療。對照組為正常的胃黏膜組織。

1.2 方法

1.2.1 組織芯片的制作 制作方法：將病理蠟塊進行組織定位后, 采用組織陣列儀進行打孔取材(D=0.6 mm), 每塊選2點, 制成陣列塊；用切片機切成厚度為4 nm連續片；撈片、烤片、復診, 制作成數張供免疫組化染色使用的組織芯片。

1.2.2 免疫組織化學染色 采用免疫組化方法檢測COX-2和Survivin的陽性率, 按試劑盒步驟操作, 兔抗人多克隆抗體COX-2, 兔抗人多克隆抗體Survivin及sp免疫組化試劑盒均購自福建邁新生物開發有限公司。

1.2.3 結果判定 胃癌細胞胞漿中出現棕黃色顆粒為COX-2和Survivin陽性細胞, COX-2和Survivin的染色結果均采用HPIAS-1000高清晰彩色病理圖文系統進行分析, 隨機挑選5個高倍視野, 根據腫瘤細胞核或細胞質的染色細胞百分率及染色程度進行評分:0分為基本不著色.1分為著色淡.2分為著色適中.3分為著色深；0分是著色細胞占計數細胞百分率≤5%.1分是6%～30%.2分是31%～60%.3分是≥61%。將每張切片各自著色細胞百分率分數與著色程度分數相乘為其最后得分。陰性為0～1分, 弱陽性為2～3分, 中等陽性為4～6分, 強陽性為6分以上。

1.3 統計學方法 采用SPSS15.0統計軟件進行數據分析。計數資料以率(%)形式表示, 實施χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃癌中COX-2的表達及病理特征的關系 在61例胃癌組織中, 有46例COX-2胞漿陽性表達(75.4%), 正常胃組織為陰性表達, 差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 胃癌中Survivin的表達及與臨床病理的特征性的關系 在61例胃癌組織中Survivin胞漿陽性表達31例(50.8%), 正常胃組織為陰性表達, 差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 胃癌組織和正常胃組織中Survivin、COX-2陽性表達情況比較［n (%)］

3 討論

目前認為胃癌發病過程是多階段的, 與基因積累相關。近年開展的細胞凋亡相關研究, 使人們對胃癌的發病機制有了更深刻的理解［3］。Survivin是研究人員1997年發現的凋亡蛋白抑制因子, COX-2是凋亡相關蛋白的一種, 通過抑制胃癌細胞的凋亡導致胃癌的發生、發展［4］。

Survivin是IAP家族中最小的成員, 在大多數分化正常的組織中無表達, 而在胚胎發育組織和腫瘤組織中卻都有不同程度的表達［5］。Survivin可調節細胞有絲分裂［6］并特異性在G2/M期表達；有兩條途徑參與細胞凋亡：一是通過抑制凋亡通路下游的caspase-7和caspase-3起到抗凋亡作用。另外Survivin也可間接抑制caspase, 其機制是Survivin與CDK4(細胞因子周期調控因子)導致CDK/周期素E的激活和pb的碳酸化。生存素CDK4復合物形成后, 使復合體中釋放P21, P21進一步與caspase-3(線粒體)結合并抑制其活性, 抑制細胞凋亡［7］。COX-2有COX-1和COX-2兩種亞型。與腫瘤關系密切的是COX-2。正常組織中, COX-2基因不表達, 只有在細胞外才誘導表達, 如許多炎性細胞因子、生長因子、內毒素、白介素-1(IL-1)、腫瘤促進劑及癌基因等均可誘導體內組織產生COX-2［8］。COX-2能促進細胞增殖并在一定程度上抑制細胞凋亡, 參與腫瘤新生血管形成等機制對多種腫瘤的發生和發展過程有一定的影響［9］。

本研究發現, 61例胃癌組織中.46例COX-2胞漿表達陽性(占75.4%).15例正常胃組織表達陰性, 差異有統計學意義(P＜0.05)。COX-2在男性、淋巴結轉移陽性者中高表達,而與年齡、腫瘤大小、分化程度等無關(P＞0.05)。61例胃癌組織中31例Survivin胞漿表達陽性(占50.8%).15例正常胃組織表達為陰性, 差異有統計學意義(P＜0.05)。Survivin表達陽性與性別、年齡、分化程度、腫瘤大小和淋巴結轉移無關(P＞0.05)。從而推測Survivin與COX-2可能有共同的激活機理,并在胃癌的病因及發生、發展過程中起重要作用, 其具體機制有待深入研究。

［1］ Tsujii M, kawano S, Tsuji S, et al. Cyclooxygenase regulates angiogesis induced by colon cancer cells. Cell.1998, 93(5):705.

［2］ Tomozawa S, Nagawa H, Tsuno N, et al. Inhibition of haematogenous metastasis of colon cancer in mice by a selective cox-2 inhibitor JTE -522. Br J Cancer.1999, 81(8):1274.

［3］ Ambrosini G, Adida C, Altieri DC. A novel antiapoptosis-gene, surviving, expressed in cancer and lymphoma. Nat Med.1997.3(8):917-921.

［4］ Deveraux QL, Reed JC. IAP family proteins-suppressors of apoptosis. Genes Dev.1999.13(3):239-252.

［5］ Waskewich C, Blumenthal RD, Li H, et al. Celecoxib exhibits.the greatest potency amongst cyclooxygenase(cox)inhibitors for-Growth inhibition of cox-2-negative hematopoietic and epithelial cell lines. Cancer Res.2002 , 62(7):2029-2033.

［6］ Kojima M, Morisaki T, Vchiyama A, et al. Association of enhanced cyclooxygenase-2 expression with possible local immunosippression in human colorectal carcinomas. Ann Surg Oncol.2001, 8(5):458-465.

［7］ Kania J, Konturek SJ, Marlicz K, et al. Exepression of surviving and caspase-3 in gastric cancer. Dig Dis Sci.2003.48(2):266-267.

［8］ Lu CD, Altieri DC, Tanigawa N, et al. Expression of a novel antiapoptosis gene, surviving, correlated with tumor cell apoptosis and p53 accumulation in gastric carcinomas. Cancer Res.1998, 58(9):1808-1812.

［9］ Yu J, Leung WK, Ebert MP, et al. Increased expression of surviving in gastric cancer patients and in frist degree relatives. Br J Cancer.2002, 87(5):91-97.

Research of expression and correlation of Survivin and COX-2 in gastric cancer tissue

JIN E.
Department of Medical Oncology, Shenyang City the Fourth People’s Hospital, Shenyan.110030, China

Objective To explore the function of cyclooxygenase-2 (COX-2) and Survivin in occurrence and development of gastric cancer. Methods A total of 61 cases of gastric cancer tissues an.15 cases of normal gastric tissues were selected, and their expressions of COX-2 and Survivin were detected by immunohistochemical method. Results In the 61 cases of gastric cancer tissues, there wer.46 cases with positive expression of COX-2 cytoplasm (75.4%), while the normal gastric tissues showed negative expression. The difference had statistical significance (P＜0.05). There wer.31 cases with positive expression of Survivin cytoplasm (50.8%), and the normal gastric tissues also showed negative expression. The difference was statistically significant (P＜0.05). Conclusion Survivin and COX-2 may have a common activation mechanism, and they play important roles in the occurrence and development of gastric cancer.

Cyclooxygenase-2; Survivin; Gastric cancer; Immunohistochemistry

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.06.003

2014-10-09］

110030 沈陽市第四人民醫院腫瘤內科