2009—2013年全國抗結核藥物敏感性試驗熟練度測試分析

宋媛媛 趙冰 夏輝 趙雁林

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·論著·

2009—2013年全國抗結核藥物敏感性試驗熟練度測試分析

宋媛媛 趙冰 夏輝 趙雁林

目的 評價和分析2009—2013年全國抗結核藥物敏感性試驗(簡稱“藥敏試驗”)熟練度測試結果，改善我國結核病實驗室藥敏試驗能力。 方法 2009—2013年對全國有能力開展藥敏試驗的省級、地市級508個結核病實驗室每年寄發30株Mtb菌株進行8種抗結核藥物[異煙肼(H)、鏈霉素(S)、乙胺丁醇(E)、利福平(R)、卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)、卷曲霉素(Cm)、氧氟沙星(Ofx)]的藥敏試驗熟練度測試,藥敏試驗方法采用WHO推薦的基于羅氏培養基的比例法。共計收到508個實驗室報告的一線抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試結果，445個實驗室報告的二線抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試結果。結果統一由國家結核病參比實驗室進行比對。評價指標為敏感度、特異度、重復性和一致性。2009—2013年各指標差異采用卡方檢驗，變化趨勢采用Cochran-Armitage趨勢檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。結果 對于各個藥物總敏感度、總特異度、總重復性和總一致性的范圍是：H：91.88%～97.62%、92.01%～98.33%、86.55%～95.27%和91.40%～97.60%；S:88.79%～94.14%、87.59%～91.36%、77.37%～93.13%和88.20%～92.45%；E：66.24%～85.17%、83.22%～97.87%、63.46%～89.76%和75.78%～90.80%；R：78.54%～96.34%、96.19%～98.07%、79.11%～95.66%和90.72%～97.21%；Km:81.12%～95.46%、95.35%～98.86%、94.12%～96.84%和90.23%～97.77%；Am：93.14%～98.94%、96.16%～99.00%、93.52%～97.94%和95.59%～98.19%；Cm：52.45%～95.68%、89.68%～97.85%、89.48%～92.99%和89.08%～95.61%；Ofx：84.75%～94.38%、96.21%～98.90%、88.01%～94.41%和93.01%～96.90%。除S的總特異度、Km和Cm的總重復性每年差異無統計學意義外(χ2值分別為8.49、4.1和7.78，P值均>0.05)，各個藥物的總敏感度每年差異有統計學意義(H:χ2=134.76；S:χ2=44.12；E:χ2=266.22；R:χ2=256.35；Km:χ2=197.46；Am:χ2=12.16；Cm:χ2=433.50；Ofx:χ2=47.38，P值均<0.05)；其他各個藥物的總特異度每年差異有統計學意義(H:χ2=67.69；E:χ2=439.39；R:χ2=16.61；Km:χ2=94.97；Am:χ2=52.96；Cm:χ2=139.51；Ofx:χ2=11.66，P值均<0.05)；其他各個藥物的總重復性每年差異有統計學意義(H:χ2=61.82；S:χ2=127.15；E:χ2=246.49；R:χ2=180.03；Am:χ2=21.65；Ofx:χ2=28.49，P值均<0.05)；各個藥物的總一致性每年差異有統計學意義(H:χ2=162.05；S:χ2=36.58；E:χ2=369.11；R:χ2=152.30；Km:χ2=233.69；Am:χ2=32.55；Cm:χ2=168.79；Ofx:χ2=36.97，P值均<0.05)。除Am、Cm的總敏感度，Ofx的總特異度，Km、Am、Cm的總重復性逐年趨勢檢驗無統計學意義外(Z值分別為0.46、0.99、-0.30、-0.85、0.09和-0.27，P值均>0.05)，其他各個藥物總敏感度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(H:Z=-11.06；S:Z=-6.39；E:Z=-12.39；R:Z=-11.17；Km:Z=-12.60；Ofx:Z=-4.40，P值均<0.05)；其他各個藥物總特異度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(H:Z=-3.85；S:Z=-2.14；E:Z=-12.30；R:Z=-3.31；Km:Z=-5.05；Am:Z=-5.43；Cm:Z=-8.90，P值均<0.05)；其他各個藥物總重復性呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(H:Z=-5.36；S:Z=-9.11；E:Z=-7.76；R:Z=-8.52；Ofx:Z=-3.44，P值均<0.05)；各個藥物總一致性呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(H:Z=-10.95；S:Z=-5.95；E:Z=-11.87；R:Z=-9.70；Km:Z=-14.11；Am:Z=-3.32；Cm:Z=-5.71；Ofx:Z=-3.40，P值均<0.05)。結論 開展熟練度測試工作是提高藥敏試驗能力的有效方法，對于提高我國結核病實驗室藥敏試驗能力具有很大貢獻。長期連續的做好實驗室內部質量控制并開展藥敏試驗培訓和熟練度測試工作可使全國結核病實驗室藥敏試驗能力逐年提高。

分枝桿菌, 結核； 微生物敏感性試驗； 敏感性與特異性

結核病耐藥率是結核病防治工作中的一項有價值指標，為此1994年WHO與國際防癆和肺病聯合會(The Union)制定了全球結核病耐藥性監測規程，其目的是可以對從世界各國收集的耐藥監測信息進行有效的比較和分析，從而獲得全球結核病耐藥數據，有效控制耐藥結核病。可靠的抗結核藥物敏感性試驗(簡稱“藥敏試驗”)是獲得準確可比的耐藥數據的前提條件，因此，WHO與國際防癆和肺部疾病聯合會同年在全球正式成立了跨國結核病參比實驗室，作用是對實施結核病耐藥性監測(調查)工作的國家提供技術援助和質量控制[1]。

從1996 年至今我國22個省(直轄市、自治區)參加了WHO開展的耐藥監測工作, 省級結核病參比實驗室同時接受了藥敏試驗培訓和跨國結核病參比實驗室的藥敏試驗熟練度測試。為進一步評估全國結核病實驗室藥敏試驗能力, 并對耐藥結核病診斷提供質量保證，2005年我國逐步對部分省級結核病實驗室開展比例法的藥敏試驗熟練度測試。從2008 年開始正式在全國范圍內進行比例法的藥敏試驗熟練度測試,在進行藥敏試驗操作前實驗室工作人員都接受了系統的培訓。現將2009—2013年全國抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試結果進行分析。

材料和方法

一、參與實驗室

2009—2013年共計收到508個實驗室報告的一線抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試結果，445個實驗室報告的二線抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試結果。每年參與藥敏試驗熟練度測試的實驗室數量見表1。

二、Mtb菌株來源

熟練度測試菌株由30株Mtb菌株構成，其中10株為重復株。菌株來源于我國香港跨國結核病參比實驗室，測試時間為4個月。每年給省、地市級實驗室發放的測試菌株中耐藥菌株數見表2。

三、菌株準備及運輸

將Mtb接種于2 ml含羅氏培養基的凍存管中，按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規定》[2]采用航空或陸路的運輸方式進行菌株運輸。

四、藥敏試驗方法

所有實驗室都采用基于固體羅氏培養基的比例法進行藥敏試驗，在培養基中各藥物終濃度分別為異煙肼(H)0.2 μg/ml、鏈霉素(S)4 μg/ml、乙胺丁醇(E)2 μg/ml、利福平(R)40 μg/ml、卡那霉素(Km)30 μg/ml、阿米卡星(Am)30 μg/ml、卷曲霉素(Cm)40 μg/ml、氧氟沙星(Ofx)2 μg/ml。個別實驗室根據藥物濃度自行配制培養基，國家結核病參比實驗室統一配發Sigma公司藥物純粉，并告知各藥物效價。大多數實驗室采購符合要求濃度的商品化培養基。

五、數據分析

分析藥敏試驗熟練度測試結果的敏感度、特異度、重復性和一致性。各指標含義解釋如下：(1)敏感度：實驗室檢出的耐藥菌株占真正耐藥菌株數的百分率，反映實驗室檢出真正耐藥的能力；(2)特異度：實驗室檢出的敏感菌株占真正敏感菌株數的百分率，反映實驗室檢出真正敏感的能力；(3)重復性：實驗室檢出正確的重復菌株數占真正重復菌株數的百分率，反映技術員誤差或者實驗室系統誤差；(4)一致性：實驗室檢出正確結果菌株數占總菌株數的百分率，反映實驗室整體檢測能力。其中一致性是評價實驗室藥敏試驗能力的重要指標。藥敏試驗合格的實驗室H、R、Km、Am、Cm、Ofx的一致性應達到90%；S和E的一致性應達到80%。國家結核病參比實驗室收集藥敏試驗測試結果并統一與標準結果進行比對。2009—2013年各指標差異比較采用R×2表資料卡方檢驗，P<0.05認為差異有統計學意義。各指標值變化趨勢采用Cochran-Armitage 趨勢檢驗，P<0.05認為差異有統計學意義。2009—2013年總敏感度、總特異度、總重復性和總一致性含義舉例說明：2009年H總敏感度指標計算方法是將2009年參與藥敏試驗的30個實驗室H藥物的敏感度指標的分母(每個實驗室真正耐藥菌株數)進行加和，分子(每個實驗室檢出耐藥菌株數)進行加和，分子除以分母×100%得出。

表1 2009—2013年省、地市級室驗室參與一、二線抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試情況(個)

表2 2009—2013年30株測試菌株中耐不同藥物菌株數

注 H=異煙肼；S=鏈霉素；E=乙胺丁醇；R=利福平；Km=卡那霉素；Am=阿米卡星；Cm=卷曲霉素；Ofx=氧氟沙星

六、質量控制

(1)國家結核病參比實驗室為每個實驗室準備的菌株都有一套獨立編號，以保證盲法對各個實驗室進行測試。(2)國家結核病參比實驗室統一時間段通過陸路或航空方式按照國家規定進行菌株運輸工作。(3)國家結核病參比實驗室統一規定藥敏試驗方法及各藥物濃度。(4)國家結核病參比實驗室統一配發Sigma公司藥物純粉，并告知各藥物效價。(5)參加測試的實驗室統一將最終藥敏試驗結果(敏感或耐藥)報告給國家結核病參比實驗室。各實驗室進行藥敏試驗熟練度測試的同時需做一株Mtb標準菌株H37Rv進行對照試驗。

七、倫理學解釋

此研究不涉及人體試驗，不需要倫理學審查，在藥敏試驗過程中患者信息不公開。

結 果

一、2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果分析

圖1為2009—2013年藥敏試驗熟練度測試的總敏感度、總特異度、總重復性、總一致性的折線圖，表3為不同藥物2009—2013年藥敏試驗熟練度測試總敏感度、總特異度、總重復性、總一致性的差異性檢驗和趨勢性檢驗值，對各個藥物的各個指標結果分別分析如下。

H 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是91.88%～97.62%，總特異度范圍是92.01%～98.33%，總重復性值范圍是86.55%～95.27%，總一致性范圍是91.40%～97.60%，5年中各指標差異有統計學意義(P<0.01)。2010年各指標值最低。各指標呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

S 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是88.79%～94.14%，總特異度范圍是87.59%～91.36%，總重復性范圍是77.37%～93.13%，總一致性范圍是88.20%～92.45%，5年中除特異度外各指標差異均有統計學意義(P<0.01)。2009年和2010年重復性值明顯偏低，分別為79.19%、77.37%。各指標呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.05)。

E 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是66.24%～85.17%，總特異度范圍是83.22%～97.87%，總重復性范圍是63.46%～89.76%，總一致性范圍是75.78%～90.80%，5年中各指標差異均有統計學意義(P<0.01)。2011年總特異度、總重復性、總一致性最低。2013年總敏感度、總特異度、總一致性值最高。各指標呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

R 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是78.54%～96.34%，總特異度范圍是96.19%～98.07%，總重復性范圍是79.11%～95.66%，總一致性范圍是90.72%～97.21%，5年中各指標差異均有統計學意義(P<0.01)。2010年總敏感度、總重復性、總一致性最低。2013年各指標值最高，各指標呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

表3 不同藥物2009—2013年藥敏試驗熟練度測試總敏感度、總特異度、總重復性、總一致性的差異性檢驗和趨勢性檢驗結果

注 H=異煙肼；S=鏈霉素；E=乙胺丁醇；R=利福平；Km=卡那霉素；Am=阿米卡星；Cm=卷曲霉素；Ofx=氧氟沙星

圖1 2009—2013年藥敏試驗總敏感度、總特異度、總重復性和總一致性結果

Km 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是81.12%～95.46%，總特異度范圍是95.35%～98.86%，總重復性范圍是94.12%～96.84%，總一致性范圍是90.23%～97.77%，5年中除總重復性外各指標差異均有統計學意義(P<0.01)。總一致性、總敏感度、總特異度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

Am 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是93.14%～98.94%，總特異度范圍是96.16%～99.00%，總重復性范圍是93.52%～97.94%，總一致性范圍是95.59%～98.19%，5年中各指標差異均有統計學意義(P<0.05)。總一致性和總特異度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

Cm 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是52.45%～95.68%，總特異度范圍是89.68%～97.85%，總重復性范圍是89.48%～92.99%，總一致性范圍是89.08%～95.61%，5年中除總重復性外各指標差異均有統計學意義(P<0.01)。2012年Cm的總敏感度最低。總一致性和總特異度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

Ofx 2009—2013年藥敏試驗熟練度測試結果總敏感度范圍是84.75%～94.38%，總特異度范圍是96.21%～98.90%，總重復性范圍是88.01%～94.41%，總一致性范圍是93.01%～96.90%，5年中各指標差異均有統計學意義(P<0.05)。2011年總敏感度、總重復性、總一致性值最低。總一致性、總重復性、總敏感度呈逐年提高趨勢，趨勢檢驗有統計學意義(P<0.01)。

二、2009—2013年藥敏試驗熟練度測試一致性情況分析

在2009—2013年藥敏試驗熟練度測試工作中，參與一線抗結核藥物藥敏試驗的實驗室數量是508個；參與二線抗結核藥物藥敏試驗的實驗室數量是445個，但由于其中9個實驗室沒有報告Cm的藥敏試驗結果，因此Cm一致性結果為436個。不同藥物一致性結果在不同范圍內的實驗室數量見表4。

表4 2009—2013年不同藥物一致性結果在不同范圍內的實驗室數量

注 H=異煙肼；S=鏈霉素；E=乙胺丁醇；R=利福平；Km=卡那霉素；Am=阿米卡星；Cm=卷曲霉素；Ofx=氧氟沙星

討 論

藥敏試驗結果的差異性取決于實驗人員操作的準確性及培養基中所需藥物的濃度和效價[3]。因此藥敏試驗實驗室內部質量控制至關重要，國際上有些國家熟練度測試結束后都會集中開會討論藥敏試驗失敗原因并查找試驗中出現的問題，以達到提高質量的目的[4-6]。目前，我國藥敏試驗熟練度測試結束后，對于不合格的實驗室是通過電話詢問查找失敗原因。因此，建議每年全國結核病參比實驗室主任會議增加對藥敏試驗熟練度測試工作的總結與交流，以更好地提高我國實驗室藥敏試驗的質量。為達到更好的實驗室內部質量控制,在開展藥敏試驗熟練度測試之前國家結核病參比實驗室推薦各實驗室使用基于固體羅氏培養基的比例法進行藥敏試驗，并推薦了各種藥物濃度。對于自己配置培養基的實驗室，國家結核病參比實驗室統一配發Sigma公司生產的藥物純粉，并告知各藥物效價。

圖1表現出在2009年各指標值相比其他年較高，一方面這與其中7個省級結核病參比實驗室都參與過WHO開展的耐藥監測工作,并多次參與其開展的藥敏試驗熟練度測試工作有關[7-10]；另一方面2009年參加熟練度測試的實驗室中省級實驗室參加的比例較高(60.00%,18/30)，省級實驗室藥敏試驗的經驗非常豐富，因此各個指標值比較高。總體看來，2009—2013年各指標數值呈逐年提高趨勢，反映了全國結核病實驗室藥敏試驗能力逐年提高。說明各個實驗室經過連續的藥敏試驗熟練度測試后積累了一定經驗，并且在這幾年中隨著在全國開展耐藥監測工作，以及中國全球基金結核病項目、中華人民共和國衛生部-蓋茨基金會結核病防治合作項目等工作，各個實驗室接受培訓和督導的機會增加，為提高實驗室能力奠定了基礎。另外國家結核病參比實驗室菌株接收、傳代、發放工作更趨于完善，也是各項指標逐年提高的重要保證。

在2012年Cm的總敏感度為52.45%，這與菌株設置(耐藥/敏感)有關，在2012年耐Cm藥物的菌株數為3株，如果有1株耐藥檢出錯誤，則敏感度為66.67%(2/3)，這無形中降低了Cm的檢出敏感度。因此，也提示組織藥敏試驗熟練度測試的實驗室在準備測試菌株時除了要注意菌株的穩定性外，對于耐藥菌株的數量也應引起重視，WHO和國際防癆和肺病聯合會推薦測試菌株中每種藥物應包含50%的耐藥菌株[11]。

一致性是評價實驗室藥敏試驗能力的重要指標[4]，從2009—2013年一致性結果中看出，各個藥物仍然有不同程度的不合格比例，其中S和Am不合格比例較低，E和Cm不合格比例較高，其他4種藥物不合格比例在10.43%～12.58%之間。一方面這可能與S合格線設置較低，Cm合格線設置較高有關。另外，藥物的不穩定性可能造成培養基中藥物終濃度不準確，藥敏試驗過程中實驗人員比濁1麥氏濃度不準確、接種量控制不好、判讀結果方法掌握不好也是造成不合格的重要原因。這提示需要審視設置合格線是否科學合理，并且需要連續不斷加強實驗室內部質量控制及督導培訓工作。

據文獻 [4-5,12-13]報道，各一線藥物的一致性合格線一般設定為：H為89%～95%、R為90%～95%、S和E為80%～90%。對于2009—2013年各藥物的總一致性都達到了我國最初設定的合格線；如果對最初設定的合格線進行改進，按照Laszlo等[13]提到的“一般設定合格線應在總一致性的基礎上減去一個標準差”，則根據2009—2013年總一致性、標準差通過計算得出：H、S、E、R、Km、Am、Cm、Ofx的一致性合格線分別為90.93%、84.70%、76.37%、90.84%、90.06%、93.70%、85.61%、90.21%。如果按此合格線看，E和Cm的不合格比例會減少。總體看各個藥物的合格線與最初設定的數值差別不大，因此在今后的熟練度測試工作中可繼續使用我國最初設定的合格線，即H、R、Km、Am、Cm、Ofx的一致性應達到90%，S和E的一致性應達到80%。本研究沒有討論關于設定重復性、敏感度、特異度各指標合格線的過程，但方法也類似于設定一致性合格線的過程。由于每年的菌株數和重復數是固定的，因此筆者建議一致性和重復性的合格線每年可以固定。但是，由于每年耐藥菌株數不同，因此敏感度和特異度的合格線應該根據當年做藥敏試驗熟練度測試>3次且能力較穩定的實驗室各指標所得總體值減1個標準差來定。

另外，我國大陸目前測試菌株均來自我國香港跨國結核病參比實驗室，在時間上有一定局限性。為了更好、更快地提高我國省級、地市級結核病實驗室藥敏試驗能力，我國大陸將來應是朝著自己制備藥敏試驗熟練度測試菌株的方向發展，需要對此做進一步研究。

提高結核病實驗室藥敏試驗能力不是通過簡單的督導、培訓或者短期內1～2次的藥敏試驗熟練度測試就能實現的，連續開展藥敏試驗培訓和熟練度測試可以使全國結核病實驗室藥敏試驗能力得到逐年提高。因此，需要長期、連續地做好實驗室內部質量控制，并開展藥敏試驗培訓和熟練度測試工作，以達到質量的持續提高。

志謝 感謝全國省級、地市級結核病實驗室對全國抗結核藥物藥敏試驗熟練度測試工作的支持和辛勤工作！

[1] World Health Organization.Guidelines for surveillance of drug resistance in tuberculosis.WHO/TB/94.178. Geneva: WHO, 1994.

[2] 中華人民共和國衛生部.可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒) 種或樣本運輸管理規定.中華人民共和國衛生部公報, 2006,2:1-6.

[3] Kim SJ. Drug-susceptibility testing in tuberculosis: methods and reliability of results. Eur Respir J，2005，25(3):564-569.

[4] Jou R,Chiang CY,Yu CY,et al. Proficiency of drug susceptibility testing forMycobacteriumtuberculosisin Taiwan. Int J Tuberc Lung Dis，2009，13(9):1142-1147.

[5] Shulgina MV,Malakhov VN,Hoffner SE,et al.Results of the external quality assessment ofMycobacteriumtuberculosisdrug susceptibility testing in Russia, 2005—2007. Int J Tuberc Lung Dis，2009，13(10):1294-1300.

[6] Wu MH,Chiang CY,Deng YM,et al.Proficiency of drug susceptibility testing forMycobacteriumtuberculosisin Taiwan, 2007—2011. Int J Tuberc Lung Dis，2013，17(1):113-119.

[7] World Health Organization.The WHO/IUATLD global project on anti-tuberculosis drug resistance surveillance. WHO/TB/97.229.Geneva:World Health Organization,1997.

[8] World Health Organization.The WHO/IUATLD global project on anti-tuberculosis drug resistance surveillance. WHO/CDC/TB/2000.278.Geneva:World Health Organization,2000.

[9] World Health Organization.The WHO/IUATLD global project on anti-tuberculosis drug resistance surveillance.WHO/HTM/TB/2004.343. Geneva: World Health Organization,2004.

[10] World Health Organization. The WHO/IUATLD global project on anti-tuberculosis drug resistance surveillance. WHO/HTM/TB/2008.394.Geneva: World Health Organization,2008.

[11] Van Deun A,Wright A,Zignol M,et al. Drug susceptibility testing proficiency in the network of supranational tuberculosis reference laboratories. Int J Tuberc Lung Dis, 2011,15(1):116-124.

[12] Bai GH,Kim SJ,Chang CL.Proficiency analysis of drug susceptibility testing by national-level tuberculosis reference laboratories from 1995 to 2003. J Clin Microbiol，2007，45(11):3626-3630.

[13] Laszlo A,Rahman M,Espinal M,et al. Quality assurance programme for drug susceptibility testing ofMycobacteriumtuberculosisin the WHO/IUATLD Supranational Reference Laboratory Network: five rounds of proficiency testing, 1994—1998. Int J Tuberc Lung Dis，2002，6(9):748-756.

(本文編輯：范永德)

Analysis of anti-tuberculosis drug susceptibility proficiency test 2009—2013 in China

SONG Yuan-yuan, ZHAO Bing, XIA Hui, ZHAO Yan-lin.

National Tuberculosis Reference Laboratory, National Center for Tuberculosis Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention，Beijing 102206, China

ZHAO Yan-lin, Email: zhaoyanlin@chinatb.org

Objective To evaluate and analyze the results of nationwide anti-tuberculosis drug susceptibility proficiency testing from 2009 to 2013, and improve the capability of tuberculosis laboratories in China. Methods Natio-nal tuberculosis reference laboratory issued 30Mycobacteriumtuberculosisisolates for the DST to each participating laboratories yearly from 2009 to 2013. The laboratories performed DST for isoniazid(H), streptomycin(S), ethambutol(E), rifampicin(R), kanamycin(Km), amikacin(Am), capreomycin(Cm) and ofloxacin (Ofx) using the proportion method in L?wenstein-Jensen medium, the World Health Organization guideline was strictly followed. All 508 laboratories participated the proficiency testing and reported the results of first line DST, and 445 laboratories reported the results of second line DST. The reported results were checked and compared with the judicial results by national tuberculosis reference laboratory. The evaluation index is sensitivity, specificity, reproducibility and efficiency. The Chi-square test was be used to analyze the results, and the Cochran-Armitage trend test was be used to describe the trend results, significant difference was defined asP<0.05. Results The overall value of sensitivity, specificity, reproducibility and efficiency for each drug was respectively as following: H: 91.88%-97.62%, 92.01%-98.33%, 86.55%-95.27% and 91.40%-97.60%；S: 88.79%-94.14%, 87.59%-91.36%, 77.37%-93.13% and 88.20%-92.45%；E：66.24%-85.17%, 83.22%-97.87%, 63.46%-89.76% and 75.78%-90.80%；R: 78.54%-96.34%, 96.19%-98.07%, 79.11%-95.66% and 90.72%-97.21%；Km: 81.12%-95.46%, 95.35%-98.86%, 94.12%-96.84% and 90.23%-97.77%；Am: 93.14%-98.94%, 96.16%-99.00%, 93.52%-97.94% and 95.59%-98.19%；Cm:52.45%-95.68%, 89.68%-97.85%, 89.48%-92.99% and 89.08%-95.61%；Ofx: 84.75%-94.38%, 96.21%-98.90%, 88.01%-94.41% and 93.01%-96.90%. Except for the specificity of S, reproducibility of Km and Cm was not statistically significant difference between each year(χ2value of 8.49, 4.1, 7.78, respectively,P>0.05),the difference of overall sensitivity for each drug between each year was statistically significant(H:χ2=134.76；S:χ2=44.12；E:χ2=266.22；R:χ2=256.35；Km:χ2=197.46；Am:χ2=12.16；Cm:χ2=433.50；Ofx:χ2=47.38，P<0.05); the difference of overall specificity for other drug between each year was statistically significant(H:χ2=67.69； E:χ2=439.39；R:χ2=16.61；Km:χ2=94.97；Am:χ2=52.96；Cm:χ2=139.51；Ofx:χ2=11.66，P<0.05);the difference of overall reproducibility for other drug between each year was statistically significant(H:χ2=61.82；S:χ2=127.15；E:χ2=246.49；R:χ2=180.03；Am:χ2=21.65；Ofx:χ2=28.49，P<0.05); the difference of overall efficiency for each drug between each year was statistically significant(H:χ2=162.05；S:χ2=36.58；E:χ2=369.11；R:χ2=152.30；Km:χ2=233.69；Am:χ2=32.55；Cm:χ2=168.79；Ofx:χ2=36.97，P<0.05). While, except for the overall sensitivity of Am and Cm, the overall specificity of Ofx and the overall reproducibility of Km, Am and Cm(Z value of 0.46, 0.99, -0.30, -0.85, 0.09 and -0.27, respectively,P>0.05), the overall sensitivity for other drug showed a trend of increase by year (H:Z=-11.06；S:Z=-6.39；E:Z=-12.39；R:Z=-11.17；Km:Z=-12.60；Ofx:Z=-4.40，P<0.05);the overall specificity for other drug showed a trend of increase by year(H:Z=-3.85；S:Z=-2.14；E:Z=-12.30；R:Z=-3.31；Km:Z=-5.05；Am:Z=-5.43；Cm:Z=-8.90，P<0.05); the overall reprodu-cibility for other drug showed a trend of increase by year(H:Z=-5.36；S:Z=-9.11；E:Z=-7.76；R:Z=-8.52；Ofx:Z=-3.44，P<0.05)；the overall efficiency for each drug showed a trend of increase by year (H:Z=-10.95；S:Z=-5.95；E:Z=-11.87；R:Z=-9.70；Km:Z=-14.11；Am:Z=-3.32；Cm:Z=-5.71；Ofx:Z=-3.40，P<0.05). Conclusion Proficiency testing was an efficient method to improve the capacity and performance of DST, PT has made a great contribution to increase the ability of DST in Chinese TB laboratory network, and continuously conducting the laboratory internal quality control and carrying out personnel training to perform proficiency testing could increase the laboratory capabilities of DST year by year.

Mycobacteriumtuberculosis； Microbial sensitivity tests； Sensitivity and specificity

10.3969/j.issn.1000-6621.2015.02.007

102206 北京，中國疾病預防控制中心結核病預防控制中心 國家結核病參比實驗室

趙雁林，Email：zhaoyanlin@chinatb.org

2014-08-17)