XE-5000全自動血細胞分析儀檢測白細胞分類與人工鏡檢結果對比分析

陳建霞 黃衍鋒 張旭

深圳市龍崗中心醫院檢驗科，深圳518116

XE-5000全自動血細胞分析儀檢測白細胞分類與人工鏡檢結果對比分析

陳建霞 黃衍鋒 張旭

深圳市龍崗中心醫院檢驗科，深圳518116

目的探討XE-5000全自動血細胞分析儀檢測白細胞（WBC）分類的準確性。方法隨機收集本院2012年6月～2013年6月門診、住院患者及健康體檢者共208例，根據年齡進行分組，其中成人組100例、兒童組60例、新生兒組48例，分別用Sysmex XE-5000與人工鏡檢法對不同年齡組的靜脈血進行WBC分類，采用統計學軟件對兩種方法的結果進行對比分析，并進行相關性分析。結果除嗜堿粒細胞外，成人組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較，差異無統計學意義（P>0.05），且呈正相關（P<0.05）。除單核細胞、嗜堿粒細胞外，兒童組及新生兒組WBC分類計數結果比較，差異無統計學意義（P>0.05），且呈正相關（P<0.05）。結論Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀測定WBC分類具有良好的性能，適用于對大批量標本進行快速有效的檢測，但不能完全取代人工鏡檢法，兩者結合，才能保證檢驗結果的準確性和可靠性。

全自動血細胞分析儀；白細胞分類；人工鏡檢

白細胞（white blood cell，WBC）作為人體的免疫細胞，當機體出現炎癥或其他疾病時，其分類計數成為臨床血液學檢驗中的常規項目。研究表明，WBC分類計數結果的準確性能夠為臨床診斷及治療提供重要的信息[1-3]。人工鏡檢是臨床上常用的WBC分類方法，但是其操作較為復雜，費時費力，近年來，全自動血細胞分析儀被廣泛應用于WBC分類，大大減輕了檢驗工作人員的工作強度[4-5]，但是臨床上對于其準確性存有爭議，本文對此進行初步探討，為其臨床應用積累經驗。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從本院2012年6月～2013年6月門診、住院患者及健康體檢者中隨機抽取208例，根據年齡分為3組，成人組（年齡15～70歲）100例，男性52例，女性48例；兒童組（年齡1個月～14歲）60例，男性28例，女性32例；新生兒組（年齡0～1個月）48例，男性26例，女性22例。

1.2 儀器與試劑

Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀（帶原裝配套試劑、校準物和質控物）；Olympus光學顯微鏡；瑞氏染液（自配）；EDTA-K2真空抗凝管（江西精致醫療器材有限公司）。

1.3 方法

成人組及兒童組清晨空腹采集肘靜脈血3ml，新生兒組采集足跟末梢血3 ml，其中2 ml置于EDTAK2真空抗凝管中，輕輕顛倒混勻，室溫條件下保存，采用原廠配套高、中、低值質控物對Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀進行監測，確保儀器處于正常工作狀態后，嚴格按照操作指南進行血細胞分析儀檢測，2 h內完成檢測。剩余部分制作成厚薄適宜的血片，采用瑞氏染液染色后，在血片體尾交界處進行分類。WBC分類計數參照NCCLS的H20-A標準[6]，由本科室兩名有經驗的副主任技師依據雙盲法進行。

1.4 觀測指標

人工鏡檢每片在體尾交界厚薄適中處瀏覽分類200個有核細胞，包括中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞，其中中性粒細胞包括中幼粒細胞、晚幼粒細胞、桿狀核粒細胞和分葉核粒細胞，淋巴細胞包括幼淋巴細胞、異型淋巴細胞及成熟淋巴細胞。取均值與XE-5000的結果進行比較。

1.5 質量控制

全血細胞計數利用Sysmex XE-5000參加了衛生部、廣東省臨床檢驗中心的室間質評活動，血細胞形態也參加了原衛生部臨床檢驗中心的室間質評活動，均取得了滿意的成績。

1.6 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析；計數資料以率或構成比表示，行χ2檢驗；計量資料以±s表示，行t檢驗；相關性分析采用Spearman相關性分析；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 成人組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較

除嗜堿粒細胞外，成人組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較，差異無統計學意義（P> 0.05），且呈中度或高度正相關（P<0.05）（表1）。

表1 成人儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=100）

表1 成人儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=100）

WBC分類儀器法人工鏡檢法t值P值相關性r值P值中性粒細胞淋巴細胞單核細胞嗜酸粒細胞嗜堿粒細胞60.96±12.12 29.17±10.91 6.39±1.94 2.96±2.70 0.52±0.50 58.69±11.36 31.85±10.02 5.90±1.86 2.86±2.60 0.70±0.45 0.965 0.742 1.005 0.087 2.633 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 <0.05 0.925 0.948 0.661 0.863 0.427 <0.05 <0.05 <0.05 <0.05 >0.05

2.2 兒童儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較

除單核細胞、嗜堿粒細胞外，兒童組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較，差異無統計學意義（P>0.05），且呈高度正相關（P<0.05）（表2）。

表2 兒童儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=60）

表2 兒童儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=60）

WBC分類儀器法人工鏡檢法t值P值相關性r值P值中性粒細胞淋巴細胞單核細胞嗜酸粒細胞嗜堿粒細胞45.15±22.84 45.22±22.48 7.04±2.89 2.29±2.73 0.30±0.24 44.09±20.79 47.71±20.26 5.26±2.16 2.43±2.69 0.51±0.49 1.074 1.452 2.873 0.385 3.071 >0.05 >0.05 <0.05 >0.05 <0.05 0.935 0.890 0.583 0.871 0.522 <0.05 <0.05 >0.05 <0.05 >0.05

2.3 新生兒儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較

除單核細胞、嗜堿粒細胞外，新生兒兒童組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較，差異無統計學意義（P>0.05），且呈正相關（P<0.05）（表3）。

表3 新生兒儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=48）

表3 新生兒儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數的比較（%，±s，n=48）

儀器若不能分類，以儀器中研究參數代替

WBC分類儀器法人工鏡檢法t值P值相關性r值P值中性粒細胞淋巴細胞單核細胞嗜酸粒細胞嗜堿粒細胞43.61±15.27 43.84±13.67 8.12±4.06 4.02±2.55 0.41±0.34 44.90±14.66 43.56±13.91 6.83±3.92 3.91±2.71 0.80±0.40 0.571 0.946 3.012 0.126 4.742 >0.05 >0.05 <0.05 >0.05 <0.05 0.923 0.790 0.515 0.866 0.480 <0.05 <0.05 >0.05 <0.05 >0.05

3 討論

近年來，全自動血細胞分析儀由于每小時可以完成150例標本的血常規檢測，成為各大中型醫院臨床實驗室常用的血常規儀器，其基本原理是應用半導體激光流式細胞技術結合核酸熒光染色技術，當半導體激光照射在經鞘流技術處理的細胞上，根據每個細胞所產生的3種信號來鑒別細胞類別：前向散射光（FSC）、側向散射光（SSC）、側向熒光（SFL）。前向散射光反映細胞體積，側向散射光反映細胞內涵物，如胞質顆粒，側向熒光反映細胞DNA和RNA含量。研究表明[7-9]，其可以對白細胞表面物質及內部結構沒有太大的改變的患者進行正確的白細胞分類，得出正確的結果，但是當細胞形態發生變化時，其不能進行正確的分類，容易出現漏檢或者誤判。

本文分別以成人、兒童、新生兒為研究對象，用XE-5000與人工鏡檢法測定白細胞分類的結果進行對比分析，結果顯示，除嗜堿粒細胞外，成人組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較差異無統計學意義（P>0.05），且呈中度或者高度正相關（P<0.05），因為對于大部分標本，嗜堿粒細胞所占比例最小，對分類影響有限，所以此結果說明了XE-5000白細胞分類結果可靠、準確。但對于血液病患者出現幼稚細胞、嗜堿粒細胞明顯增高時，儀器法分類結果不盡如意。儀器法嗜堿粒細胞比人工鏡檢法要低，特別對于慢性粒細胞白血病患者，其儀器法分類結果有的甚至低于人工鏡檢法的30%。部分白血病患者體積小的原始細胞儀器法會被歸到淋巴細胞類，體積大的原始、幼稚細胞會被歸到單核細胞類，造成淋巴細胞、單核細胞比例假性升高。對兒童進行研究，結果顯示，除單核細胞、嗜堿粒細胞外，兒童組儀器法與人工鏡檢法檢測WBC分類計數結果比較差異無統計學意義（P> 0.05），且呈高度正相關（P<0.05），考慮是由于前來醫院就診的兒童大部分是感冒、發熱、咳嗽、腹瀉的病例，病毒感染的居多，所以異型淋巴細胞病例往往增高，異型淋巴細胞體積大，部分形態也似單核細胞，儀器容易將這部分細胞歸到單核細胞類，造成單核細胞比例假性升高。如表3所示新生兒組中中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸粒細胞相關性較好，差異無統計學意義，相關系數分別為0.923、0.790、0.866，但單核細胞和嗜堿粒細胞差異有統計學意義，其相關系數也較低，分別為0.515和0.480。研究表明[10]，新生兒外周血WBC主要為中性粒細胞，出生后第6～9天才逐漸下降至與淋巴細胞大致相等，此后淋巴細胞逐漸增多，可達70%，而出生后2周的新生兒單核細胞可呈生理性增多，可達15%以上。此外，新生兒造血功能相當的活躍，造成外周血中常見多種幼稚細胞，如有核紅細胞，中、晚幼粒細胞等，這些幼稚細胞往往儀器分析結果造成較大干擾，使儀器不能對它們進行正確的分類，進而與鏡檢結果比較差別較大，相關性較低。

文獻報道[11-13]，雖然臨床上全自動血細胞分析儀已廣泛使用WBC分類，但是至今為止尚缺乏具有溯源性的商品校準物，故各級室間質量評價也暫時沒有將其列為上報項目，國內室內質控對白細胞分類的控制也不盡人意。所以白細胞分類的金標準仍是傳統的人工鏡檢分類[14-15]。傳統的瑞氏染色WBC分類計數通常要經過手工推片，固定染色鏡檢等步驟，其操作復雜耗時，工作效率低，常因人為因素造成誤差。但在顯微鏡下可直接觀察細胞核、細胞質、染色質著色的深淺及細胞結構變化，并加以辨認，而儀器法無法取代這一功能。

綜上所述，Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀測定白細胞分類具有良好的性能，適用于對大批量標本進行快速有效的檢測，但不能完全取代人工鏡檢法，兩者結合，才能保證檢驗結果的準確性和可靠性。

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Com parative analysis of XE-5000 automatic hematology analyzer and artificialm icroscopy in detecting white blood cell classification

CHEN Jian-xia HUANG Yan-feng ZHANG Xu
Department of Clinical Laboratory,Longgang Central Hospital of Shenzhen City,Shenzhen 518116,China

Objective To study the accuracy of XE-5000 automatic hematology analyzer in detecting the white blood cell(WBC)classification.M ethods 208 cases of outpatients,inpatients and subjects of health examination treated in our hospital from June 2012 to June 2013 were randomly selected and divided into the adult group(100 cases),the children group(60 cases)and the neonate group(48 cases)according to age.TheWBC in venous blood of the patients in different groupswere classified respectively by Sysmex XE-5000 method and artificialmicroscopymethod.The results of the twomethodswere compared and analyzed by using statistical software,and the correlation analysiswas carried out.Results In addition to the basophils,the difference of the count results of theWBC classification in the adult group detected by using instrumentmethod and artificialmicroscopymethod was not significant(P>0.05),and had a positive correlation(P<0.05).In addition to themonocytes and basophils,the difference of the count results of theWBC classification in the children group and neonate group was not significant(P>0.05),and had a positive correlation(P<0.05).Conclusion Using the Sysmex XE-5000 automatic blood cell analyzer to detect the white blood cell classification has a good performance and it is suitable to detect a large quantity of samples quickly and effectively,but it can not completely replace theartificialmicroscopy.If the twomethodsare combined,itcan ensure theaccuracy and reliability of test results.

Automatic hematology analyzer;White blood cell classification;Artificialmicroscopy

R446.11

A

1674-4721（2015）04（c）-0124-03

2015-01-13本文編輯：郭靜娟）