陰道細菌不同檢驗方法的比較分析

李淑平

山西省靈石縣計劃生育婦幼保健服務中心，山西 靈石 031300

陰道細菌不同檢驗方法的比較分析

李淑平

山西省靈石縣計劃生育婦幼保健服務中心，山西 靈石 031300

目的：對陰道細菌多種檢驗方法進行比較。方法：對147例初步確診為細菌性陰道炎的患者分別采用細菌培養(yǎng)法、革蘭染色、PCR檢測法等三種方法進行陰道細菌檢驗，觀察三種方法的陰道細菌檢出情況。結果：該三種檢驗方法所對應的檢出率分別為77.6%、36.7%、72.8%。結論：建議醫(yī)院在進行陰道細菌的檢驗方面，應結合自身實際條件，靈活選用細菌培養(yǎng)法或PCR檢驗法。

陰道細菌；細菌培養(yǎng)法；PCR檢驗法

細菌性陰道疾病為成年女性中常見的婦科疾病之一，其長期以來一直都對女性的身體健康產(chǎn)生著不同程度的影響。如何快速而準確地對陰道細菌進行檢測向來是婦科醫(yī)療工作者關注的焦點問題。筆者于近期針對本科收治的女性患者分別采用不同方法進行檢驗，旨在比較分析出更具臨床應用價值的檢驗方法，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院婦科門診于2013年9月至2014年2月期間收治的147例初步確診為細菌性陰道炎的患者作為研究對象，所有患者均知情同意，同時均排除正處于月經(jīng)期或妊娠期者、近2日內有過性生活者以及近期有陰道局部用藥者。年齡18～57歲，平均（32.7±9.8）歲；細菌性陰道炎病程2個月至3年，平均病程（10.3±6.4）個月；已婚96例，未婚51例；有性生活史者114例，占到總體入選病例的77.5%。將147例患者按門診就診順序隨機分為A、B、C三組，分組后組間兩兩比較，三組患者年齡、病程、婚姻狀況、性生活史等一般資料差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具可比性。

1.2方法

1.2.1 陰道分泌物采集 用醫(yī)用棉簽插入患者陰道內，輕輕旋轉以沾取陰道分泌物，之后再將棉簽置于裝有2ml生理鹽水的試管中待檢。

1.2.1 A組檢驗方法 采用細菌培養(yǎng)法，具體方法為：將生理鹽水中的樣本在無菌條件下接種到專用細菌分離的培養(yǎng)基，在35℃條件下二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，最后選擇其中呈半透明、灰色、光滑的水滴形狀菌落按生化標準進行生化檢驗即可。

1.2.2 B組檢驗方法 采用革蘭染色法，具體方法為：將無破損的清潔玻片在95%乙醇中浸泡一定時間后取出晾干備用，接著攝取樣本進行涂片，進行革蘭染色后再進行顯微鏡檢。

1.2.3 C組檢驗方法 采用PCR檢測法，具體方法為：將500μl陰道分泌物放置于生理鹽水中進行離心處理10min，轉速為12000r／min，去除上清液，加入適量裂解液并在98℃條件下加熱10min，離心5min，轉速同前。取上清液制成DNA模板。在采用PCR檢測細菌陽性或陰性比較中，尤其是在陰道分泌物DNA制作的時候需注意：應使用相同的PCR試劑，同時將其中一個未添加DNA的作為陰性組，添加有DNA模板的PCR擴增為陽性組，再對陽性組與陰性組進行對比分析，檢查PCR產(chǎn)物及其擴增情況。取25μl的緩沖液、引物、模板、無菌離子水，采用無菌的30μl石蠟油覆蓋在上面，進入PCR循環(huán)階段，共循環(huán)32個循環(huán)。

1.3 統(tǒng)計學方法 本研究所得數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理采用SPSS 17.0統(tǒng)計分析，計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料比較行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

在本次入選的147例患者當中，細菌培養(yǎng)法檢出棒狀桿菌15例，加特納菌86例，腸球菌13例，共計114例，檢出率為77.6%；革蘭染色法檢出棒狀桿菌3例，加特納菌49例，腸球菌2例，共計54例，檢出率為36.7%；PCR檢測法檢出棒狀桿菌14例，加特納菌81例，腸球菌12例，共計107例，檢出率為72.8%。檢出率的組間比較結果顯示，A組與C組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；A組與B組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；C組與B組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較［例（%）］

3 討論

雖然細菌培養(yǎng)向來被認為是臨床檢驗與診斷細菌感染的金標準，但因其檢驗過程比較復雜，同時也相對更為費力，尤其在基層醫(yī)院還比較難以開展。而革蘭染色法因其簡單易行，已經(jīng)在臨床上得到廣泛應用，以至于在陰道細菌的檢驗方面，曾有不少學者認為應將其作為檢驗首選方法。然而，該方法由于難免受到多種因素的影響，在具體的檢驗過程中往往易發(fā)生較大的誤差，比如染色過程中出現(xiàn)脫色不當?shù)?。以脫色過度為例，一旦發(fā)生此種情況，勢必將導致在顯微鏡檢的時候會誤將革蘭陽性細菌辨識為革蘭陰性菌。PCR檢驗法是融合了光譜技術的精確定量、DNA雜交的特異性以及其敏感性，在對細菌進行檢驗過程中，與細菌培養(yǎng)法比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但陽性檢出率顯著高于革蘭染色法，差異有統(tǒng)計學意義 （P＜0.05）。綜上所述，醫(yī)院在進行陰道細菌的檢驗時，應結合自身實際條件，靈活選用細菌培養(yǎng)法或PCR檢驗法。

［1］彭碧華.不同臨床檢驗方法在細菌性陰道病診斷中的比較分析 ［J］.中國醫(yī)藥指南，2011，9（32）：14－15.

［2］馬芹，劉克平，葉香.細菌性陰道病陰道分泌物的檢測方法及治療方案分析［J］.中國婦幼保健，2008，23（18）：2543－2544.

R446.5

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1007－8517（2015）01－0110－01

2014.06.11）