姜黃素治療大鼠角膜堿燒傷的實驗研究

李 妍，秦 莉，李晶明

（1.陜西省西安市第四醫(yī)院眼科，陜西 西安 710004；2.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科，陜西 西安 710061）

姜黃素治療大鼠角膜堿燒傷的實驗研究

李 妍1，2，秦 莉2，李晶明2

（1.陜西省西安市第四醫(yī)院眼科，陜西 西安 710004；2.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科，陜西 西安 710061）

目的 觀察姜黃素對大鼠角膜堿燒傷新生血管（CNV）的抑制作用和對CD11b及角膜上皮凋亡細胞表達的影響，初步探討其治療角膜堿燒傷的作用機制。方法 選用雄性SD大鼠24只，隨機分為4組（每組6只）：A組為空白組，B組為模型組，C組為姜黃素組，D組為二甲基亞砜（DMSO）組。除空白組外，采用氫氧化鈉眼內(nèi)燒傷造模，并予相應(yīng)干預(yù)，第3、7、10、14天裂隙燈下觀察角膜CNV形態(tài)并眼前節(jié)照相記錄CNV長度，計算CNV面積，進行統(tǒng)計學(xué)分析；通過H-E染色法觀察角膜病理形態(tài)學(xué)變化；免疫組化法觀察CD11b表達；TUNEL染色法檢測角膜上皮細胞凋亡表達。結(jié)果 裂隙燈下觀察B組和D組CNV生長旺盛，管腔粗大，C組CNV稀疏管腔細小；3 d時三組CNV面積分析差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，7、10、14 d時CNV面積比較C組CNV面積顯著降低(P＜0.05)；H-E染色B組和D組角膜基質(zhì)層內(nèi)大量的CNV管腔和血細胞，C組基質(zhì)層偶見CNV，管腔細小；A組CD11b、角膜上皮凋亡細胞在角膜僅少量表達，B組和D組CD11b在基質(zhì)層新生血管內(nèi)壁上高表達，角膜上皮層凋亡細胞高表達，C組CD11b低表達，角膜上皮層凋亡細胞低表達。結(jié)論 姜黃素能有效的抑制大鼠角膜堿燒傷CNV治療角膜堿燒傷，通過下調(diào)CD11b抗炎和下調(diào)角膜上皮凋亡細胞抗凋亡發(fā)揮作用。

姜黃素；角膜堿燒傷；新生血管；CD11b；角膜上皮層細胞；凋亡

角膜堿燒傷是眼外傷中一種嚴重的致盲性眼病。在我國，嚴重的角膜化學(xué)傷引起的角膜新生血管（CNV）占整個角膜疾病的10%。堿性化學(xué)物質(zhì)發(fā)生皂化作用很快穿透眼組織，引起角膜新生血管、潰瘍等導(dǎo)致視力喪失。目前治療角膜堿燒傷的方法多種多樣，但仍缺少一種有效、經(jīng)濟、安全的臨床藥物。姜黃素是我國的一種傳統(tǒng)草藥提取物，具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等多種生物活性[1]以及誘導(dǎo)增生性瘢痕成纖維細胞凋亡[2]。安全性高毒性小，易溶于乙醇、二甲基亞砜（DMSO），微溶于水，近年來在眼科領(lǐng)域成為研究熱點，研究表明姜黃素通過下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達抑制新生血管[3]、通過抗增殖、抗纖維化誘導(dǎo)細胞凋亡治療青光眼濾過瘢痕和翼狀胬肉等[4]。2008年蘇凡凡[5]研究姜黃素能抑制大鼠角膜堿燒傷CNV，但未探討作用機制，同年胡靜[6]探討姜黃素治療大鼠角膜堿燒傷是通過調(diào)控角膜超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）抗氧化作用機制實現(xiàn)的，近年來有關(guān)姜黃素治療角膜堿燒傷的作用機制研究甚少，本實驗在這些研究基礎(chǔ)上進一步觀察姜黃素抑制大鼠角膜堿燒傷的CVN，并通過檢測姜黃素對炎性指標(biāo)CD11b表達和角膜上皮細胞凋亡的影響，進一步探討其作用機制。

1 材料

1.1 主要儀器和試劑

裂隙燈顯微鏡，眼前段照相系統(tǒng)（日本CANON公司），石蠟組織切片機（德國LEIKA公司）；兔抗大鼠CD11b多克隆抗體 （Abcom公司），SP免疫試劑盒和DAB顯色試劑盒（北京博奧森生物技術(shù)有限公司），TUNEL試劑盒（Roche公司），Whatman 3#濾紙（美國SIGMA公司），98.5%姜黃素原料藥粉劑（50g/瓶，sigma公司），DMSO（上海榕柏生物技術(shù)有限公司），氫氧化鈉、蘇木素溶液和伊紅溶液（西安生物化學(xué)試劑廠），TritonX-100和Tween-20(上海艾研生物科技有限公司)。

1.2 姜黃素的配制[7]

147 mg的姜黃素溶于10 mL的DMSO溶液中，濃度為40 mmol/L，按每管25 μL分裝，避光保存于-20℃冰箱中，結(jié)膜下注射前以生理鹽水按1∶1000稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.30.1%DMSO試劑配制

0.1 mL的DMSO溶于100 mL的生理鹽水中，4℃保存。

2 方法

2.1 造模與分組

清潔級健康無眼疾的成年雄性SD大鼠24只，購自西安交通大學(xué)動物中心，體質(zhì)量（230±60）g，合格證號:0034325，許可證號:SCXK-(陜)2007-001，采用隨機數(shù)字分組法分為4組 （每組6只）:A組為空白組，不給予任何處理；B組為模型組；C組為姜黃素組；D組為DMSO組，每組右眼為實驗眼。B組、C組和D組動物分別用10%的水合氯醛3 mL/kg腹腔注射麻醉，以直徑3 mm的圓形濾紙片浸入1 mol/L NaOH溶液中20 s，置于干燥濾紙上吸除多余的堿液，均勻地貼于大鼠右眼角膜中央40 s，取下濾紙后生理鹽水迅速沖洗1 min制造大鼠角膜堿燒傷模型[8]。

2.2 干預(yù)

B組結(jié)膜下注射生理鹽水0.1 mL，C組結(jié)膜下注射濃度為40 μM姜黃素溶液0.1 mL，D組結(jié)膜下注射0.1%DMSO 0.1 mL，各組結(jié)膜下隔天注射1次，共注射7次。

2.3 觀測指標(biāo)

2.3.1 CNV面積計算 分別在第3、7、10、14天裂隙燈下觀察大鼠角膜CNV形態(tài)改變，同時進行眼前段照相，記錄CNV長度（以連續(xù)且彎曲度小，并與角膜緣切線垂直的新生血管長度為準(zhǔn)）計算CNV面積。計算CNV面積公式[9]:

S為CNV生長面積，C為CNV網(wǎng)的跨圓周鐘點數(shù)，r為角膜半徑，l為新生血管長度。

2.3.2 CD11b表達及上皮細胞凋亡的檢測 第14天頸椎脫臼處死所有實驗大鼠，迅速摘取完整右眼球，顯微角膜剪眼球后壁剪開約1 mm直徑的小口，1 mL的注射器針頭從小口刺入至角膜內(nèi)皮層后，置15%中性甲醛溶液中固定48 h。眼球依次采用濃度梯度乙醇脫水，浸蠟包埋，采取矢狀面切片，切片厚度4 μm。

（1）H-E染色觀察角膜病理形態(tài)學(xué)改變:石蠟切片常規(guī)蘇木精-伊紅染色，二甲苯透明，中性樹膠封片后光鏡下觀察角膜形態(tài)學(xué)變化。（2）免疫組化（S-P法）觀檢測CD11b:石蠟切片常規(guī)脫蠟完成水化，采用過氧化氫室溫孵育，抗原修復(fù)，山羊血清封閉切片，滴加1∶10稀釋的兔抗大鼠CD11b一抗過夜后，滴加生物素標(biāo)記的二抗孵育，再滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈酶卵白素，用DBA顯色試劑盒顯色蘇木精核復(fù)染，自來水沖洗返藍，乙醇依次脫水，二甲苯透明后中性樹膠封片，以PBS代替一抗作空白對照，觀察CD11b表達。（3）TUNEL染色檢測角膜上皮細胞凋亡:石蠟切片常規(guī)脫蠟完成水化，PBS洗滌3次，置于0.1%冰檸檬酸鈉溶液冰上通透5 min，用PBS液沖洗2次，組化筆標(biāo)記組織后加入20 μL的TUNEL混懸液，避光孵育1 h，沖洗封片。（4）數(shù)據(jù)平均光密度計算:每組各取6張切片，選取3個背景良好的視野區(qū)照相，CD11b染色結(jié)果采用Image ProPlus6彩色圖像分析軟件，分析每張圖片中角膜組織區(qū)域的積分光密度（IOD）和面積（area），計算平均光密度值（IOD/area）。（5）凋亡率的計算:隨機選取TUNEL染色角膜上皮細胞中3個高倍鏡視野，計算角膜上皮凋亡細胞和和角膜上皮細胞總數(shù)，角膜上皮細胞凋亡率=角膜上皮凋亡細胞數(shù)/角膜上皮細胞總數(shù)×100%。

2.4 統(tǒng)計學(xué)分析

3 結(jié)果

3.1 CNV形態(tài)觀察和CNV面積比較

如圖1所示:裂隙燈下觀察空白組，角膜透亮，無CNV；第3 d時各組均睫狀充血，角膜堿燒傷區(qū)水腫明顯，堿燒傷斑明顯，角鞏膜緣處新生血管芽呈刷狀長出，三組CNV形態(tài)表現(xiàn)基本相同；7 d時模型組和DMSO組角膜新生血管生長旺盛致密，頂端分叉，接近堿燒傷區(qū)，堿燒傷區(qū)水腫明顯；姜黃素組CNV頂端分叉稀疏，血管管腔細，未達到堿燒傷區(qū)，部分鐘點位無新生血管，堿燒傷區(qū)水腫程度輕。10 d時模型組和DMSO組CNV致密呈網(wǎng)狀，血管筆直，管腔粗大，范圍廣泛，頂端到達角膜中央交織，堿燒傷區(qū)灰白色水腫；黃素組CNV稀疏，開始退化，血管影可見，管腔細，堿燒傷區(qū)清亮。14 d時模型組和DMSO組CNV仍粗大致密，達到高峰開始消退；姜黃素組CNV大部分消退萎縮至堿燒傷區(qū)外，角膜大部分鐘點位無CNV，血管管腔狹小，角膜上皮光滑。

如表1所示，角膜堿燒傷3 d時CNV面積比較組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05)。7 d、10 d和14 d時CNV面積比較組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。C組CNV面積顯著降低，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。

3.2 14 d各組病理形態(tài)學(xué)觀察

如圖2所示，14 d時A組H-E染色角膜5層結(jié)構(gòu)清晰、完整，基質(zhì)層無水腫增厚，見排列整齊的膠原纖維，未見新生血管腔；B組和D組角膜組織水腫增厚，基質(zhì)層纖維排列紊亂，可見大量的CNV管腔、血細胞和炎性細胞，管腔粗大；C組角膜上皮趨于光滑平整，基質(zhì)層水腫減退，厚度基本接近A組，基質(zhì)層CNV消退減少，管腔狹小。

圖1 角膜新生血管7、10、14 d形態(tài)觀察

表1 大鼠角膜堿燒傷新生血管面積（±s，n=6，mm2）

表1 大鼠角膜堿燒傷新生血管面積（±s，n=6，mm2）

注:與模型組（B組）和DMSO組（D組）比較#P＜0.05；模型組（B組）和DMSO組（D組）比較P＞0.05。

組別B組C組D組F P 3 d 8.25±1.33 8.00±1.09 8.05±1.26 0.07 0.93 7 d 19.59±1.69 14.22±1.59#19.40±2.29 15.73＜0.05 10 d 23.14±1.77 15.54±3.39#22.27±2.34 8.86＜0.05 14 d 21.31±2.64 12.25±4.03#20.21±2.02 21.67＜0.05

圖2 大鼠角膜堿燒傷光鏡圖（HE染色×100）

3.3 各組CD11b表達的比較

如圖3所示，14 d時A組大鼠角膜上皮層和內(nèi)皮層CD11b微量表達，B組和D組CD11b棕黃色顆粒增多，染色顆粒顏色增強，主要定位于角膜上皮層、基質(zhì)層的新生血管內(nèi)皮層，C組CD11b染色接近A組，棕黃色顆粒減少，染色顆粒顏色減弱，基質(zhì)層CNV內(nèi)壁染色顆粒減少。

圖3 大鼠角膜堿燒傷基質(zhì)層CD11b免疫組化顯微圖（×50）

CD11b表達比較，B組CD11表達顯著高于A組（P＜0.05），C組CD11b表達顯著低于B組和D組（P＜0.05），而D組與B組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

3.4 各組角膜上皮細胞凋亡的比較

14 d時A組見角膜上皮層下方細胞核黃棕色著染的凋亡細胞，B組角膜上皮層細胞核胞漿均黃棕色著染，出現(xiàn)大量的凋亡細胞，C組角膜上皮層下方可見凋亡細胞，上皮層細胞核仍藍染，和A組相似，D組角膜上皮細胞核細胞漿均黃棕色著染，出現(xiàn)大量的凋亡細胞，和B組相似。見圖4。

圖4 大鼠角膜堿燒傷角膜上皮細胞凋亡顯微圖（TUNEL染色×50）

角膜上皮凋亡細胞表達比較，B組角膜上皮凋亡細胞表達顯著高于A組 （P＜0.05），C組角膜上皮凋亡細胞表達顯著低于B組（P＜0.05），而D組與B組比較，角膜上皮凋亡細胞差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 各組大鼠角膜CD11b平均光密度值和角膜上皮凋亡細胞凋亡率 （±s）

表2 各組大鼠角膜CD11b平均光密度值和角膜上皮凋亡細胞凋亡率 （±s）

注:與A組比較*P＜0.05；C組和B組、D組比較#P＜0.05，D組和B組比較P＞0.05。

組別A組B組C組D組 F P n 6 6 6 6平均光密度值（IOD/area）CD11b 0.007 6±0.000 6 0.031 9±0.002 5* 0.016 4±0.001 0#0.032 5±0.002 4 164.365 0＜0.05凋亡率（%）TUNEL 9.01±2.17 72.31±13.25* 12.34±3.10#75.72±11.14 58.40＜0.05

4 討論

角膜過多的CNV破壞了角膜的微環(huán)境和透明性，成為臨床上致盲的主要原因之一。CNV的形成機制復(fù)雜，VEGF學(xué)說是CNV目前公認的主要機制之一，戴鵬飛等[10]實驗證明大鼠角膜堿燒傷后VEGF的表達和CNV的變化成正相關(guān)，林小俊[3]實驗表明姜黃素能顯著減少VEGF的表達抑制CNV。目前臨床上尚缺乏理想的抑制CNV的藥物，糖皮質(zhì)激素能抗炎抑制CNV，但眼部使用副作用大，不能在眼表長期安全使用。美國上市的抗VEGF藥物貝伐單抗（Avstain）能抑制CNV，但其價格昂貴，主要用于腫瘤內(nèi)科，眼科使用受限。有研究表明姜黃素整體抗CNV的能力并不輸于Avastin[11]。本實驗中14 d時C組CNV比其它組在數(shù)量、長度和范圍上減少，CNV面積減少，H-E染色觀察C組角膜上皮光滑，基質(zhì)層水腫輕，CNV數(shù)量少，證明姜黃素能有效地抑制大鼠角膜堿燒傷CNV。

角膜堿燒傷刺激大量的多形核白細胞（PMN）和炎性介質(zhì)釋放，發(fā)生急性炎癥反應(yīng)，中性粒細胞黏附因子CD11b在正常情況下低表達，但在炎癥急性期大量表達，對白細胞等炎癥細胞的遷移、聚集和趨化起著重要的作用，被認為是炎癥反應(yīng)的重要標(biāo)志。正常的角膜組織中不同程度的存在著各種黏附分子，但均少量表達。整合素家族是黏附家族的重要成員之一，參與調(diào)控炎癥期PMN的吸附、滲出和遷移[12-13]，CD11b/CD18是巨噬細胞分化抗原 1（Mac-1）——作為整合素家族中重要的膜蛋白，對PMN的調(diào)控作用顯著，CD11b也就成為抑制機體炎癥時加以阻斷的重要靶點，使得多種因素可調(diào)控CD11b的表達[14]。近年有研究表明CD11b的高表達是重癥肺炎患兒中性粒細胞的判斷依據(jù)[15]、干預(yù)CD11b的表達可以減輕膿毒癥大鼠的炎性反應(yīng)等[16]。角膜堿燒傷早期PMN和淋巴細胞侵入病變區(qū)域，2周至3周時大量的PMN浸潤，外界刺激改變了CD11b的構(gòu)象，激活P53-MARK信號通路介導(dǎo)PMN等迅速到達感染部位發(fā)揮效應(yīng)。本實驗中A組CD11b僅微量表達，在堿燒傷炎癥期CD11b在基質(zhì)層和基質(zhì)層新生血管內(nèi)皮上高表達，證實了CD11b代表了炎癥細胞，C組下調(diào)了CD11b的表達，為姜黃素通過抗炎作用機制治療角膜堿燒傷奠定了理論依據(jù)。

細胞凋亡是生理性的，亦是病理性的。正常的角膜上皮細胞僅有少量的細胞凋亡維持生理代謝，角膜堿燒傷時炎癥反應(yīng)和細胞凋亡是同時存在的。角膜堿燒傷時眼表的炎癥因子和促凋亡因子激活凋亡通路，同時產(chǎn)生大量的PMN和炎性細胞，過多的吞噬角膜壞死組織發(fā)生呼吸爆破，生成大量的活性氧簇 （ROS），ROS可以通過細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)損傷細胞DNA，誘導(dǎo)細胞凋亡[17]。但也有研究表明姜黃素存在雙向濃度調(diào)控，高濃度的姜黃素能顯著增加細胞中的活性氧，激活線粒體凋亡途徑，誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生ROS，促進腫瘤細胞凋亡[18]。因此，姜黃素給藥濃度的摸索是至關(guān)重要的。本實驗中TUNEL染色角膜上皮細胞核染黃褐色顆粒的為陽性表達，B組角膜上皮細胞胞核和胞漿均黃褐色深染，C組姜黃素干預(yù)后角膜上皮層凋亡細胞減少，結(jié)果為姜黃素通過抗凋亡作用機制治療角膜堿燒傷奠定實驗基礎(chǔ)。

姜黃素作為一種中藥，具有多途徑治療疾病的特點，能有效地抑制角膜堿燒傷CNV，通過下調(diào)CD11b表達抗炎、抗角膜上皮細胞凋亡發(fā)揮治療角膜堿燒傷作用，為臨床治療角膜堿燒傷提供新的理論依據(jù)，但其調(diào)控通路和作用機制仍不明確，需要從多途徑、多層面的基礎(chǔ)研究進一步探討。

[1]劉素標(biāo).姜黃素的作用研究進展[J].中醫(yī)臨床研究，2013，5（4）: 117-120.

[2]周 曙，田 芳，金海蓉，等.姜黃素調(diào)節(jié)Bcl-2、Bax蛋白表達誘導(dǎo)增生性瘢痕成纖維細胞凋亡[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2015，35（4）:6-9.

[3]林小俊，謝 平，袁冬青，等.姜黃素抑制小鼠脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2014，14（1）:52-56.

[4]呂旭東，楊安懷.姜黃素的眼科應(yīng)用和進展[J].中國醫(yī)師進修雜志，2011，34（6）:73-75.

[5]蘇凡凡，張明昌.姜黃素對大鼠堿燒傷角膜新生血管的抑制作用[J].國際眼科雜志，2008，8（9）:1 806-1 808.

[6]胡 靜，李 立.姜黃素對大鼠角膜堿燒傷的作用[J].激光雜志，2008，29（3）:97.

[7]蘇凡凡，姜黃素對大鼠角膜新生血管作用的實驗研究[D].武漢:華中科技大學(xué)，2008.

[8]顏世龍，梁 丹，林妙麗，等.堿燒傷大鼠CNV模型的初步探索[J].眼科學(xué)報，2005，21（4）:166-169.

[9]D'Amato RJ,Loughnan MS,Flynn E,et al.Thalidomide is an inhibitor of angiogenesis [J].Proc Nat Acad Sci USA，1994，91（9）:4 082-4 085.

[10]戴鵬飛，王 峰，鄭玉萍，等.大鼠角膜堿燒傷后ILK和VEGF的表達與CNV的相關(guān)性研究[J].國際眼科雜志，2012，12（2）:208-211.

[11]吳 藝，廖文熊，陸守權(quán)，等.姜黃素及Avastin治療鼠角膜堿燒傷新生血管對比[J].國際眼科雜志，2013，13（6）:1 087-1 089.

[12]Jin R，Yu S，Song Z，et al.Soluble CD40 ligand stimulates CD40 dependent activation of the β2 integrin Mac-1 and protein kinase C zeda in neutrophils:implications for neutrophilplatelet interactions and neutrophil oxidative burst[J].PLOS One，2013，8（6）:1-10.

[13]Zarbock A.β2-integrin activity:the role of thiols[J].Blood，2013，121（9）:3 779-3 780.

[14]毛景東，劉金華，丁 寧，等.CD11b/CD18對中性粒細胞功能的調(diào)控研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2014，35（1）:106-110.

[15]陳水文，黃衛(wèi)東，任其秀，等.重癥肺炎患兒中性粒細胞和淋巴細胞CD11b表達的意義[J].中國小兒急救醫(yī)學(xué)，2012，19（4）:155-157.

[16]蔡朦朦，鮑紅光，斯妍娜，等.脂聯(lián)素預(yù)先給藥對膿毒癥大鼠外周血中性粒細胞CD11b表達和呼吸氧爆發(fā)水平的影響[J].中華麻醉學(xué)雜志，2014，34（1）:112-115.

[17]Wu SH，Hang LW，Yang JS，et al.Curcumin induces apoptosis in human non-small cell lung cancer NCI-H460 cells through ER stress and cascade and mitochondria dependent pathways [J].Anticancer Res，2010，30（6）:2 125-2 133.

[18]Chang Z，Xing J，Yu X.Curcumin induces osteosarcoma MG63 cells apoptosis via ROS/Cyto-C/Caspase-3 pathway[J].Tumour Biol，2014，35（1）:753-758.

（本文編輯 楊 瑛）

Study of Curcumin in Treating Corneal Alkaline Burn of Rats

Yan Li1,2,Li Qin2,Jing-Ming Li2
(1.Department of Ophthalmology,the Fourth Hospital of Xi'an City,Xi'an,Shanxi 710004,China;
2.Department of Ophthalmology,the First Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University,Xi'an,Shanxi 710061,China)

Objective To study the inhibition of curcumin on corneal neovascularization(CNV)in the corneal alkaline burned rats,and the effect on CD11b and corneal epithelium apoptosis.Then investigate its mechanism on treatment of corneal alkaline burn.Methods 24 male SD rats were randomly divided into 4 groups(6 rats in each group):Group A was the blank control group,Group B was the model group,Group C was the curcumin group,and Group D was the DMSO group.Except for the blank group,the other groups were modeled by sodium hydroxide to induce the burn in eyes and with the corresponding intervention.On the 3th day,7th day,10th day and 14th day,CNV was observed and taken photos with slit-lamp microscope.The CNV area was calculated accordingly,and all data were analyzed statistically.The pathological change was observed by H-E staining; the expression of CD11b in corneal was detected with immunohistochemical method;the corneal epithelial cell apoptosis was detected by TUNEL staining.Results The CNV of Group B and Group D was vigorous,its lumen was wider,CNV of Group C was scattered and small;The CNV area of three groups at 3th day was not statistically different (P＞0.05);The CNV area of Group C was decreased significantly at 7th, 10th,14th day (P＜0.05).After HE staining,there were amount of lumen of CNV and haemocytes in the stromal layer,CNV of group C was few and with small lumen.CD11b and TUNEL cells of Group A were lowly expressed in epithelium of cornea;CD11b of Group B and D in the CNV wall and corneal epithelium apoptosis were highly expressed,while that in Group C were with low expression.In B group,they were obviously expressed and had statistically significant conversely.Compared with B group,they were lower in C group.The expression level between D group and B group was no significant different.Conclusion Curcumin could inhibit CNV effectively in the corneal alkaline burned rats to antiinflammatory and anti-apoptosis effects through down regulating CD11b and corneal epithelium apoptosis.

curcumin;corneal alkaline burn;corneal neovascularization;CD11b;corneal epithelium;apoptosis

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674-070X.2015.08.006

2015-01-30

陜西省科技攻關(guān)計劃資助項目（2011k1402-04）。

李 妍，女，碩士，主治醫(yī)生，研究方向:眼表疾病，白內(nèi)障。