趨化因子Fractalkine及其受體CX3CR1預測重型急性胰腺炎的價值研究

孟銳，黃李雅，劉雅琦，吳陽

·論著·

趨化因子Fractalkine及其受體CX3CR1預測重型急性胰腺炎的價值研究

孟銳，黃李雅，劉雅琦，吳陽

目的檢測重型急性胰腺炎(SAP)患者血漿中趨化因子Fractalkine(FKN)及其受體CX3CR1的表達水平，判斷其能否作為SAP的預測指標。方法選取2012年12月—2014年9月寧夏醫科大學總醫院收治的因急性上腹痛起病，癥狀出現在3 d以內，依據2013年《中國急性胰腺炎診治指南》診斷為急性胰腺炎的患者65例為研究對象，其中輕型急性胰腺炎(MAP)20例(30．8%)，中型急性胰腺炎(MSAP)25例(38．4%)，SAP 20例(30．8%)，應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測患者血漿中FKN及其受體CX3CR1表達水平。比較不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平，繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)，計算ROC曲線下面積(AUC)，判定預測SAP的最佳截點及其靈敏度、特異度、正確率。結果不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平比較，差異均有統計學意義(P＜0．05);其中SAP患者FKN及其受體CX3CR1表達水平高于MAP、MSAP患者(P＜0．05)。FKN及其受體CX3CR1預測SAP的AUC分別為0．865、0．897，最佳截點分別為2．08μg/L和38μg/L，靈敏度分別為86．96%、90．91%，特異度分別為76．27%、88．24%，正確率分別為79．27%、89．04%。結論SAP患者FKN及其受體CX3CR1表達水平高于MAP、MSAP患者，FKN及其受體CX3CR1可作為預測急性胰腺炎嚴重程度的有效指標之一，值得進一步深入研究。

胰腺炎;Fractalkine;受體，趨化因子;預測

孟銳，黃李雅，劉雅琦，等．趨化因子Fractalkine及其受體CX3CR1預測重型急性胰腺炎的價值研究［J］．中國全科醫學，2015，18(36):4433－4436．［www．chinagp．net］

Meng R，Huang LY，Liu YQ，et al．Value of chemokine Fractlkine and its receptor CX3CR1 in the prediction of severe acute pancreatitis［J］．Chinese General Practice，2015，18(36):4433－4436．

急性胰腺炎是多種原因導致胰酶在胰腺內激活，以胰腺、胰周的炎癥為主要特征，伴有或不伴有其他器官功能的改變［1－2］。約20%的急性胰腺炎患者會進展為重型急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)，繼發嚴重的局部并發癥如胰腺壞死、胰腺膿腫和全身并發癥，最終導致患者死亡［3－4］。目前多種評分系統、血清學指標及放射學方法用于對SAP的預測。各種評分系統需要較多臨床指標，評價繁瑣，預測能力各有不同。血清學指標，如最常使用的C反應蛋白(CRP)，雖然在胰腺壞死、SAP的預測上體現了一定的診斷價值，但對采集的時間過分依賴，影像學指標雖然可以確定有無局部并發癥，但卻無法預測器官功能衰竭［5］。因此，尋找有效、簡單的早期預測SAP及其嚴重并發癥的指標，對降低SAP的病死率、改善預后具有重大意義。研究已經證實，趨化因子Fractalkine(FKN)及其受體CX3CR1參與炎癥的發生、誘導和活化，導致組織損傷［6］。但FKN及其受體CX3CR1在SAP的研究，國內外均未見報道。本課題組前期在大鼠急性胰腺炎模型中發現FKN及其受體CX3CR1在大鼠血清、胰腺組織內均高表達，提示其與急性胰腺炎的發生、發展有關［7］。本研究的目的在于觀察SAP患者FKN及其受體CX3CR1表達水平的改變，判斷其是否能夠作為預測SAP的有效指標。

1資料與方法

1．1臨床資料選取2012年12月—2014年9月寧夏醫科大學總醫院收治的因急性上腹痛起病，癥狀出現在3 d以內，依據2013年《中國急性胰腺炎診治指南》［8］診斷為急性胰腺炎的患者65例為研究對象，其中男39例，女26例;年齡26～76歲，平均年齡(49．5 ±15．6)歲;體質指數(BMI)(24．6±3．0)kg/m2;漢族52例，回族13例;病因:膽源性22例(33．8%)，高脂血癥性5例(7．7%)，乙醇性2例(3．1%)，未知36例(55．4%);輕型急性胰腺炎(MAP)20例(30．8%)，中型急性胰腺炎(MSAP)25例(38．4%)，SAP 20例(30．8%)。排除逆行胰膽管造影術后、懷疑胰腺腫瘤或膽管炎癥、由胰腺外的感染繼發胰腺炎，有免疫缺陷的病史和資料不全的患者。

1．2診斷標準MAP:具備急性胰腺炎的臨床表現和生物化學改變，不伴有器官功能衰竭及局部或全身并發癥。MSAP:具備急性胰腺炎的臨床表現和生物化學改變，伴有一過性的器官功能衰竭(48 h內可自行恢復)，或伴有局部或全身并發癥而不存在持續性的器官功能衰竭(48 h內不能自行恢復)。SAP:具備急性胰腺炎的臨床表現和生物化學改變，須伴有持續的器官功能衰竭(持續48 h以上、不能自行恢復呼吸系統、心血管或腎臟功能衰竭，可累及1個或多個器官)。

1．3研究方法

1．3．1血清樣本的采集收集患者清晨空腹外周靜脈血5 ml，采用離心機以3 000 r/min離心15 min(離心半徑10 cm)，提取上清液800μl，分裝于4個EP管中(每個EP管中200μl)，于－80℃冰箱中保存待測。

1．3．2 FKN及其受體CX3CR1表達水平檢測酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒均由上海悅晟生物科技有限公司提供，采用雙抗體夾心ABC－ELISA法，使用酶標儀，在450 nm處檢測吸光度(OD值)，通過繪制標準曲線求出樣本中相應的濃度。嚴格按照儀器和試劑使用說明書進行操作。

1．4統計學方法采用SPSS18．0統計學軟件進行數據處理，計量資料符合正態分布以(x±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗;繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)，計算ROC曲線下面積(AUC)，選擇最佳截點，計算其預測SAP的靈敏度、特異度、正確率。以P＜0．05為差異有統計學意義。

2結果

2．1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平比較不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平比較，差異均有統計學意義(P＜0．05);其中SAP患者FKN及其受體CX3CR1表達水平高于MAP、MSAP患者，差異均有統計學意義(P＜0．05，見表1)。

表1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of the expression levels of serum FKN and its receptor CX3CR1 among SAP patients with different disease degrees

表1不同病情程度急性胰腺炎患者FKN及其受體CX3CR1表達水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of the expression levels of serum FKN and its receptor CX3CR1 among SAP patients with different disease degrees

注:MAP=輕型急性胰腺炎，MSAP=中型急性胰腺炎，SAP=重型急性胰腺炎，FKN=Fractalkine;與MAP患者比較，aP＜0．05;與MSAP患者比較，bP＜0．05

病情程度例數FKN CX3CR1 MAP 20 0．53±0．12 49±63 MSAP 25 2．31±0．26 34±17 SAP 20 6．88±1．11ab172±87abF 值＜0．001＜0．001 26．29 32．70 P值

2．2 FKN及其受體CX3CR1預測SAP的價值FKN及其受體CX3CR1預測SAP的AUC分別為0．865、0．897; FKN及其受體CX3CR1預測SAP的最佳截點分別為2．08μg/L和38μg/L;FKN及其受體CX3CR1預測SAP的靈敏度、特異度、正確率分別為86．96%、76．27%、79．27%，90．91%、88．24%、89．04%(見圖1)。

圖1 FKN及其受體CX3CR1預測SAP的ROC曲線Figure 1 ROC curves of FKN and CX3CR1 predicting SAP

3討論

SAP是伴有臟器功能不全或衰竭、代謝功能紊亂或出現胰腺壞死、膿腫或假性囊腫等局部并發癥的急性胰腺炎癥，是病情兇險、并發癥多、病死率較高的急腹癥，占整個急性胰腺炎的20%左右［9］。雖然診治技術逐漸提高，但病死率仍在20%左右。近年來國內外對急性胰腺炎進行了重新劃分，將短暫的器官功能衰竭和/或局部并發癥從以前的SAP中區分出來，成為MSAP［8］。基于近年來對急性胰腺炎病死率的回顧分析，Buter等［10］研究表明，胰腺壞死、胰腺感染與器官功能衰竭和病死率明顯相關，可作為急性胰腺炎嚴重程度的兩個決定因素。在臨床上，各種評分系統、血清學標志物及影像學檢測方法用于急性胰腺炎的評價。在評分系統中，急性生理學及慢性健康狀況評分系統Ⅱ(APACHEⅡ評分)、Ranson評分、急性胰腺炎嚴重程度床旁指數(BISAP)評分較為常見。其中Ranson評分需要前后兩次評價，需要在48 h內獲得全部數據。APACHEⅡ評分需要統計14項指標，有研究表明，APACHEⅡ評分與ICU住院天數明顯相關，預測SAP的特異度不高［11］。BISAP評分雖然評估簡單，但其診斷能力的差異很大。血清中CRP水平升高也非特異的，其是由肝細胞合成，白介素1和白介素6介導產生，血清學指標升高具有明顯差異，需要在癥狀出現72 h以后采集［12］。因此尋找有效的、簡單的生物學標志物預測SAP及其嚴重并發癥，可以明顯改善預后，降低病死率。

急性胰腺炎的產生是由于各種原因導致的胰蛋白酶激活，繼而激活炎性細胞釋放炎性因子，級聯下游炎性細胞的進一步釋放，導致組織損傷，繼發全身并發癥，如全身炎性反應綜合征(SIRS)、多器官功能障礙綜合征(MODS)［13］。FKN屬于趨化因子CX3C亞家族目前已知的唯一成員，既具有趨化因子的活性，又能發揮黏附因子的作用，這使得其在炎癥的趨化、活化、發展中發揮著獨特的生物學作用［14－15］。FKN是否參與SAP的發生與發展，國內外均未見報道。本課題組前期研究發現，SAP大鼠動物模型的血清和胰腺組織中，FKN均過度表達。同時，也在SAP胰腺外的損傷器官肺臟和腎臟組織中發現了FKN的過度表達［7］。

本研究結果顯示，不同病情程度急性胰腺炎患者均有FKN及其受體CX3CR1表達，且SAP患者FKN及其受體CX3CR1表達水平高于MAP、MSAP患者，進一步通過ROC曲線進行評價，提示FKN及其受體CX3CR1均有良好的預測SAP的能力。本文的不足是未在相同的時刻進行采血，未進行連續的監測，需要后期進一步評估。

本研究結果初步提示，FKN及其受體CX3CR1與急性胰腺炎的發生、發展密切相關，但具體的機制還有待進一步研究。FKN及其受體CX3CR1可能成為預測SAP的有效指標之一，為臨床早期診斷SAP提供有效可靠工具。

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(本文編輯:陳素芳)

·世界全科醫學工作瞭望·

British Journal of General Practice 2015年11月目次選登

·Caring for older people:is home care always best?

老年人護理:居家護理是否是最好的選擇?

·Promotingmodifiable risk factors for dementia:is there a role for general practice?

促進阿爾茨海默病危險因素的緩解:全科醫療是否可以發揮作用?

·Recognising the role of primary care in cancer control

了解初級醫療在癌癥控制中的作用

·Statins for all:should patientswho havemigrainewith aura be on a statin?

他汀類藥物的全面使用:先兆偏頭痛患者是否應該使用他汀類藥物?

·Determinants of health－related quality of life in older primary care patients:results of the longitudinal observational AgeCoDe Study

老年初級醫療患者的健康相關生活質量的決定因素:縱向觀察AgeCoDe研究結果

·Comparison of end－of－life care for older people living at home and in residential homes:amortality follow－back study among GPs in the Netherlands

居家與居住照護之家老年臨終關懷的比較:荷蘭全科醫生的死亡率回溯研究

·Promoting physical activity in older people in general practice: ProAct65+cluster randomised controlled trial

促進全科醫療老年人身體活動:ProAct65+集群隨機對照試驗

·GPs'perspectives on secondary cardiovascular prevention in older age:a focus group study in the Netherlands

全科醫生對老年二級心血管疾病防治的看法:荷蘭焦點小組研究

·Chest pain for coronary heart disease in general practice:clinical judgement and a clinical decision rule

全科醫療冠心病患者的胸痛:臨床判斷和臨床決策規則

·Utilising out－of－hours primary care for assistance with cancer pain:a semi－structured interview study of patient and caregiver experiences

工作時間外的初級醫療對癌性疼痛緩解的幫助:患者和護理者經驗的半結構式訪談研究

·Caring for people living with，and beyond，cancer:an online survey of GPs in England

與癌癥抗爭患者的護理:英國全科醫生在線調查

·The association between symptoms and bladder or renal tract cancer in primary care:a systematic review

初級醫療癥狀與膀胱或腎管癌的聯系:一項系統回顧

·Improvingmanagement and effectiveness of home blood pressure monitoring:a qualitative UK primary care study

提高居家血壓監測管理和有效性:一項英國初級醫療研究

·Creatinine point－of－care testing for detection andmonitoring of chronic kidney disease:primary care diagnostic technology update

用于慢性腎病的發現與監測的肌酸酐即時檢驗:初級醫療診斷技術更新

·Elbow pain:a guide to assessment and management in primary care

肘部疼痛:初級醫療評估與管理指南

(詳細內容見http://bjgp．org/content/65/640．toc)

(本刊編輯部整理)

Value of Chemokine Fractlkine and Its Receptor CX3CR1 in the Prediction of Severe Acute Pancreatitis

MENG Rui，HUANG Li－ya，LIU Ya－qi，et al．Ningxia Medical University，Yinchuan 750004，China

ObjectiveTo detectexpression levels of serum Fractalkine(FKN)and its receptor CX3CR1 of patients with severe acute pancreatitis(SAP)and evaluate whether they could be used as the predictive indicators for SAP．M ethods

Enrolled 65 AP patientswho had onsetwith acute epigastric pain in the last3 days and were definitely diagnosed according to2013 China guideline for AP treatment and admitted into Ningxia Medical University from December 2012 to September 2014．Among the patients，20(30．8%)had mild acute pancreatitis(MAP)，25(38．4%)had moderately severe acute pancreatitis (MSAP)，and 20(30．8%)had SAP．The expression levelsof serum FKN and its receptor CX3CR1 were detected using enzyme linked immunosorbentassay(ELISA)．Comparison wasmade in the expression levels of serum FKN and CX3CR1 among patients with different illness degrees．ROC curvesweremade，and the optimum cutoff points，sensitivity，specificity and accuracy were calculated．Results Patients with different illness degrees were significantly different in the expression levels of FKN and CX3CR1(P＜0．05);SAP patients were higher than MAP patients and MSAP patients in the expression levels of FKN and CX3CR1(P＜0．05)．The AUC of the prediction of SAPwas0．865 for FKN and 0．897 for CX3CR1，and the optimum cut－off pointwas2．08μg/L for FKN and 38μg/L for CX3CR1．The values of sensitivity for FKN and CX3CR1 were 86．96%and 90．91%，the values of specificity were 76．27%and 88．24%，and the accuracy valueswere79．27%and 89．04%．Conclusion

SAP patients are higher than MAP and MSAP patients in the expression levels of FKN and its receptor CX3CR1．The two indicators could be used to effectively predict the severity of AP，which isworth further study．

Pancreatitis;Fractalkine;Receptors，chemokine;Forecasting

R 576．1

A

10．3969/j．issn．1007－9572．2015．36．007

2015－06－05;

2015－11－18)

國家自然科學基金資助項目(81260086)

750004寧夏銀川市，寧夏醫科大學(孟銳，劉雅琦，吳陽);寧夏醫科大學總醫院消化內科(黃李雅)

黃李雅，750004寧夏銀川市，寧夏醫科大學總醫院消化內科;E－mail:txmbw@126．com