HPV感染對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌朗格漢斯細(xì)胞數(shù)量的影響

馬賁，溫瑩瑩，韓磊，杜曉巖

(1佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院口腔醫(yī)院，黑龍江佳木斯154001；2齊齊哈爾市第一醫(yī)院)

HPV感染對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌朗格漢斯細(xì)胞數(shù)量的影響

馬賁1，溫瑩瑩2，韓磊2，杜曉巖1

(1佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院口腔醫(yī)院，黑龍江佳木斯154001；2齊齊哈爾市第一醫(yī)院)

目的 探討人類乳頭瘤病毒(HPV)感染對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)朗格漢斯細(xì)胞(LC)數(shù)量的影響。方法 選取OSCC組織和癌旁正常組織各27份，檢測(cè)HPV表達(dá)情況，比較HPV陽性和陰性O(shè)SCC組織中LC數(shù)量。結(jié)果 OSCC組織中的LC數(shù)量為(9.48±10.89)個(gè)，正常組織為(11.36±2.75)個(gè)，二者比較P<0.05。27例OSCC組織中，HPV陽性9例，HPV陰性18例，二者的LC數(shù)量分別為(38.24±6.23)、(2.58±9.23)個(gè)，二者比較P<0.05。HPV陽性的OSCC組織中，不同腫瘤分期、不同組織分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的LC數(shù)量比較，P均<0.05。結(jié)論 LC與HPV感染的OSCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)；HPV可以抑制OSCC患者的免疫系統(tǒng)，減少LC數(shù)量。

口腔鱗狀細(xì)胞癌；人類乳頭瘤病毒；朗格漢斯細(xì)胞

口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)具有惡性度高、易發(fā)生淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、生存率低等特點(diǎn)[1]。人類乳頭瘤病毒(HPV)感染是口咽癌的主要病因[2]，HPV感染導(dǎo)致的局部免疫缺陷以及缺乏有效的特異性抗HPV制劑，使HPV感染遷延不愈[3]。朗格漢斯細(xì)胞(LC)是表皮內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞，在攝取、處理和遞呈抗原方面具有重要作用。本研究探討了HPV感染對(duì)OSCC組織中LC數(shù)量的影響及其機(jī)制。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年1月～2014年1月佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院口腔醫(yī)院收治的27例OSCC患者，男16例、女11例，年齡34～72(60.4±7.3)歲。均經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)。患者均為首次確診，術(shù)前未行化放療和免疫治療。腫瘤位于嘴唇12例，口底瘺5例，其他部位10例。病理分化程度為高分化9例，中低分化18例；根據(jù)UICC(2002)口腔癌TNM分期Ⅰ～Ⅱ期20例，Ⅲ～Ⅳ期7例。伴頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移8例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例。將患者手術(shù)切除標(biāo)本作為觀察組，取癌旁正常組織作為對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 LC形態(tài)觀察及計(jì)數(shù) 采用免疫組化SP法。將OSCC組織石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，4 μm連續(xù)切片。將切片浸入pH6.0檸檬鹽溶液加熱至沸騰，繼續(xù)加熱3 min抗原修復(fù)，室溫下自然冷卻后PBS沖洗。3% H2O2孵育5～10 min，消除內(nèi)源性過氧化物酶活性，PBS沖洗。以PBS代替一抗作為空白對(duì)照。將染色后的切片置于400倍光鏡下，隨機(jī)選取10個(gè)視野，以胞膜、胞質(zhì)呈紅色為陽性，計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞的數(shù)目并觀察其形態(tài)和分布。

2 結(jié)果

2.1 兩組LC數(shù)量比較 觀察組和對(duì)照組的LC數(shù)量分別為(9.48±10.89)、(11.36±2.75)個(gè)，兩組比較P均<0.05。觀察組中，HPV陽性9例，LC數(shù)量為(38.24±6.23)個(gè)；HPV陰性18例，LC數(shù)量為(42.58±9.23)個(gè)，二者比較P<0.05。

2.2 HPV陽性和陰性的OSCC組織中LC數(shù)量與臨床病理特征的關(guān)系 見表1。

3 討論

研究證實(shí)，在免疫功能抑制時(shí)，HPV的感染率和宮頸原位癌的發(fā)病率顯著高于正常人，且HPV感染所致的癌前病變和宮頸癌均與宮頸LC明顯減少、樹突結(jié)構(gòu)消失密切相關(guān)[4]。LC在腫瘤免疫學(xué)中扮演重要角色，其具有預(yù)防惡意轉(zhuǎn)化的抗原的能力[5]。LC的正常功能為監(jiān)測(cè)細(xì)胞表面的病原體，捕捉抗原并將其加工成免疫原性多肽，從組織遷移至淋巴結(jié)，再將多肽與主要組織相容性復(fù)合物結(jié)合而提呈給T細(xì)胞，誘導(dǎo)產(chǎn)生抗原特異性免疫反應(yīng)[6]。淋巴細(xì)胞作為殺死癌細(xì)胞的主要細(xì)胞，其需要被激活而呈抗原的狀態(tài)，這就需要LC通過刺激抗原提呈細(xì)胞來調(diào)節(jié)[7～9]。

表1 HPV陽性和陰性的OSCC組織中LC數(shù)量與臨床病理特征的關(guān)系

本研究顯示，27例OSCC中HPV陽性9例，HPV陰性18例，HPV陽性的OSCC組織中的LC數(shù)量少于HPV陰性組織，與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致。說明HPV感染與LC數(shù)量有關(guān)，HPV陽性的OSCC組織中LC數(shù)量較少可能是HPV對(duì)LC的直接細(xì)胞毒作用，或經(jīng)抗原致敏的LC離開原位進(jìn)入?yún)^(qū)域淋巴組織，削弱了機(jī)體對(duì)外來抗原的特異性免疫應(yīng)答能力，導(dǎo)致局部獲得性免疫缺陷[11]。Bahnassy等[12]認(rèn)為，LC數(shù)量與OSCC合并HPV感染密切相關(guān)。另有研究發(fā)現(xiàn)，陰性HPV和陽性HPV的子宮肌瘤組織中LC密度有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，HPV感染會(huì)驅(qū)使與LC抗原有關(guān)的免疫系統(tǒng)的變化。我們進(jìn)一步對(duì)HPV陽性和陰性的OSCC組織中LC數(shù)量進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，不同腫瘤分期、不同組織分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的HPV陽性O(shè)SCC組織中，LC數(shù)量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。考慮可能是LC在HPV參與OSCC的細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮了重要的免疫作用。

綜上所述，LC與HPV感染的OSCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，HPV可以抑制OSCC患者的免疫系統(tǒng)，減少LC數(shù)量。

[1] Lasisi TJ, Oluwasola AO, Lasisi OA, et al. Association between langerhans cells population and histological grade of oral squamous cell carcinoma[J]. J Oral Maxillofac Pathol, 2013,17(3):329-333.

[2] Ramqvist T, Dalianis T. An epidemic of oropharyngeal squamous cell carcinoma(OSCC)due to human papillomavirus(HPV)infection and aspects of treatment and prevention[J]. Anticancer Res, 2011,31(5):1515-1519.

[3] Upadhyay J, Rao NN, Upadhyay RB. A comparative analysis of langerhans cell in oral epithelial dysplasia and oral squamous cell carcinoma using antibody CD-1a[J]. J Cancer Res Ther, 2012,8(4):591-597.

[4] Gildener-Leapman N, Lee J, Ferris RL.Tailored immunotherapy for HPV positive head and neck squamous cell cancer[J]. Oral Oncol, 2014,50(9):780-784.

[5] Stephen JK, Divine G, Chen KM, et al. Significance of p16 in Site-specific HPV Positive and HPV Negative Head and Neck Squamous Cell Carcinoma[J]. Cancer Clin Oncol, 2013,2(1):51-61.

[6] Jin L, Sturgis EM, Zhang Y, et al. Association of tumor necrosis factor-alpha promoter variants with risk of HPV-associated oral squamous cell carcinoma[J]. Mol Cancer, 2013,19(12):80.

[7] 米那瓦爾,阿達(dá)萊提,拉萊·蘇祖克,等.口腔鱗癌中HPV16、18型感染和p53蛋白表達(dá)的檢測(cè)研究[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志,2001,36(6):451-452.

[8] 馬三成,陳少英,趙今,等.口腔鱗癌HPV16、18感染與多基因表達(dá)的相關(guān)性研究[J].口腔頜面外科雜志,2011,21(1):7-8.

[9] Syrj?nen K, Syrj?nen S, Lamberg M, et al. Morphological and immunohistochemical evidence suggesting human papillomavirus (HPV) involvement in oral squamous cell carcinogenesis[J]. Int J Oral Surg, 1983,12(6):418-424.

[10] Pereira KM, Soares RC, Oliveira MC, et al. Immunohistochemical staining of Langerhans cells in HPV-positive and HPV-negative cases of oral squamous cells carcinoma[J]. J Appl Oral Sci, 2011,19(4):378-383.

[11] Uobe K, Masuno K, Fang YR, et al. Detection of HPV in Japanese and Chinese oral carcinomas by insitu PCR[J]. Oral Oncol, 2001,37(2):146-152.

[12] Bahnassy AA, Zekri AR, Saleh M, et al. The possible role of cell cycle regulators in multistep process of HPV--associated cervical carcinoma[J]. BMC Clin Pathol, 2007,7:4.

杜曉巖

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.01.023

R739.8

B

1002-266X(2015)01-0056-02

2014-11-01)