吡嘧司特鉀鼻噴劑的制備與質量控制研究

曲曉宇，宋燕青，趙宏偉，張四喜

(吉林大學第一醫院 藥學部，吉林 長春 130021)

?

吡嘧司特鉀鼻噴劑的制備與質量控制研究

曲曉宇，宋燕青，趙宏偉，張四喜Δ

(吉林大學第一醫院 藥學部，吉林 長春 130021)

目的 本文制備適應癥為過敏性鼻炎的吡嘧司特鉀鼻噴劑并制定制劑的質量控制標準。方法 根據吡嘧司特鉀的理化性質以及鼻腔給藥特點優化處方組成，并根據《中國藥典》2010年版二部附錄中對鼻用制劑及噴霧劑的要求，對制劑pH、性狀、裝量、每瓶總噴次、每噴噴量、沉降體積比及含量測定方法等進行考察，制定質量控制標準。結果 吡嘧司特鉀鼻噴劑的處方為：0.1%吡嘧司特鉀，0.8%羧甲基纖維素鈉，0.01%苯扎溴銨，pH調節劑為冰醋酸，溶劑為5%甘露醇溶液。該制劑為白色混懸液，pH值為7.0。平均裝量為(25.12±0.16)mL，各瓶裝量均大于23.75 mL(95%)；各瓶總噴次均大于160噴，每噴噴量均大于0.1400 g/撳；沉降體積比為1，以上檢測項目等均符合規定，質量可控。吡嘧司特鉀對照品的標準曲線為Y=81 085X+15 264，r=0.999 8，線性范圍為0.5～25.0 μg/mL。吡嘧司特鉀對照品的鼻噴劑樣品平均回收率為99.39%、精密度符合要求。吡嘧司特鉀鼻噴劑供試品中吡嘧司特鉀的含量為標示量的99.2%。結論 本文制備得到的制劑制備方法簡單，穩定性好，使用方便，質量可控，為進一步開發該藥的鼻腔局部給藥制劑提供了研究基礎。

吡嘧司特鉀；鼻噴劑；制備；質量控制

吡嘧司特鉀為肥大細胞穩定劑，能夠抑制Ⅰ型變態反應介導的過敏反應,本品可抑制人肥大細胞發生反應引起的炎性介質和嗜酸細胞介質釋放的作用[1-2]。目前吡嘧司特鉀上市劑型包括治療過敏性結膜炎的滴眼劑與治療過敏性鼻炎、哮喘的口服制劑。目前對于過敏性鼻炎的治療以局部噴鼻最為流行，因此本研究擬將吡嘧司特鉀開發為鼻噴劑以治療過敏性鼻炎，該制劑能夠使藥物立即抵達過敏部位從而快速發揮療效，并且能夠避免口服給藥血藥濃度個體差異大、起效慢、增加副作用等缺點[3]。本文對吡嘧司特鉀鼻噴劑的處方組成進行考察，并制定制劑的質量控制標準，為進一步開發吡嘧司特鉀鼻用制劑提供實踐依據。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 吡嘧司特鉀原料藥(魯南貝特制藥有限公司，批號：140101)；吡嘧司特鉀對照品(經HPLC檢測，其純度為99.9%)；20%甘露醇注射液(吉林康乃爾藥業有限公司，批號：S13082107-1)；羧甲基纖維素鈉(國藥集團化學試劑有限公司，批號：F20041213)；1%苯扎溴銨溶液(山東利爾康醫療科技有限公司，批號：141022R)；冰醋酸(廣東省臺山市新寧制藥有限公司，批號：20100115)，以上材料均為分析純。甲醇(美國TEDIA公司)為色譜純。

1.2 儀器 FA2004電子天平(上海舜宇恒平儀器公司，200 g/0.1mg)；Shimadzu 16-A型高效液相色譜儀(日本島津公司)；PHS-25C數顯酸度計(上海宇隆儀器有限公司)；30 mL象鼻式噴瓶(吉林大學第一醫院制劑室)。

1.3 方法

1.3.1 噴鼻器的選擇：本文采用30 mL象鼻式噴瓶為藥物容器與使用器具(如圖1)，象鼻式噴瓶可將噴口伸入鼻腔中，藥品直達患處，減少藥物的損失，并且噴瓶易于裝卸，清洗方便，具有帽蓋，減少污染。

圖1 30 mL象鼻式噴瓶Fig.1 The 30mL trunk type spray bottle

1.3.2 處方的制定：本處方中將主藥吡嘧司特鉀濃度擬定為0.1%(w/v)，與吡嘧司特鉀滴眼劑的使用濃度相同，在此濃度下能夠有效的發揮療效。抑菌劑選擇為苯扎溴按，濃度擬定為0.01%[4]。滲透壓調節劑確定為甘露醇，為與鼻黏膜細胞滲透壓相等，采用5%甘露醇作為溶劑[5]。pH調節劑確定為冰醋酸。本文采用羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)作為增粘劑并重點考察其用量。經查閱文獻可知，CMC-Na為鼻噴制劑處方中常用的增粘劑，其具有增粘效果良好、毒性小等優點，對于混懸液尚具有助懸作用，故本處方采用羧甲基纖維素鈉作為增粘劑[6]。

1.3.3 制備流程：配制5%的甘露醇溶液，取1%苯扎溴按溶液1 mL、吡嘧司特鉀原料藥0.1g，加入處方量的CMC-Na(待考察)后加5%甘露醇溶液至100 mL，在室溫下靜置6 h，最后以冰醋酸調節pH至7.0即可，最后將25 mL藥液灌裝與象鼻式噴瓶中，即得吡嘧司特鉀鼻噴劑。

1.3.4 增粘劑用量的考察：增粘劑可以增加藥物在鼻粘膜的滯留時間，減少藥液因流出而造成的損傷，從而更好地發揮藥效，而增粘劑用量過大可顯著增加藥物黏度，易造成堵塞噴嘴、每噴噴量不穩定等問題，因此，本研究重點考察增粘劑用量，以獲得最佳用量。

按照吡嘧司特鉀鼻噴劑的制備工藝方法，分別制備含增粘劑羧甲基纖維素鈉0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0%濃度的供試品溶液，對0.3%～1%濃度的羥丙甲基纖維素鈉供試品溶液進行每噴噴量測定，考察其每噴噴量的均勻度，通過計算數據得出不同濃度下的平均每噴噴量、相對標準偏差(RSD%)。

1.3.5 質量控制研究

① 性狀：將本品傾注于潔凈的透明玻璃容器中觀察其性狀。

② pH值：按《中國藥典》2010年版二部附錄中有關pH的測定方法[7]檢測樣品溶液。

③ 裝量檢查：按《中國藥典》2010年版二部附錄中對裝量的檢查要求[7]，取供試品6瓶，開啟時避免損失，將內容物轉移至預經標化的干燥量入式量筒中(量具的大小應使待測體積至少占其額定體積的40%)，讀出每個容器內容物的裝量，要求平均裝量不得少于25 mL，每瓶裝量不得少于標示量的95%，即不少于23.75 mL。

④ 每瓶總噴次：按《中國藥典》2010年版二部附錄中對每瓶總噴次的檢查要求[7]，取供試品4瓶，除去帽蓋，充分振搖，在通風櫥內，分別按壓閥門連續噴射于已加入適量吸收液的容器內，每次噴射間隔不少于5 s并充分振搖，直至噴盡為止，分別計算噴射次數，要求每瓶總噴次均不得少于160噴。

⑤ 每噴噴量：按《中國藥典》2010年版二部附錄中噴射實驗的檢查要求[7]，取本品供試品4瓶，除去帽蓋，分別撳壓試噴數次后，擦凈，撳壓噴射5次，擦凈，分別精密稱定，重復實驗3次，計算每瓶每撳平均噴射量不得小于標示量。本品每噴噴量應不得小于0.140 0 g/撳。

⑥ 沉降體積比：按《中國藥典》2010年版二部附錄中沉降體積比的檢查要求[7]，用具塞量筒量取吡嘧司特鉀供試品30 mL，塞好瓶塞，上下用力振搖1 min，記錄混懸液的初始高度H0，靜置3 h記錄供試品的高度H，計算沉降體積比=H/H0，按要求，鼻腔噴霧劑沉降體積比不得小于0.9。

1.3.6 含量測定

① 色譜條件：色譜柱：Thermo公司，Hypersil GOLD ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流動相：甲醇：水(50:50)；柱溫：室溫；檢測波長：357 nm；流速：1.0 mL/min；進樣量：20 μL。

② 線性范圍：精密稱取吡嘧司特鉀對照品適量，加蒸餾水溶解并稀釋成0.05 mg/mL的溶液作為儲備液。精密量取儲備液0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，進樣并記錄色譜圖。以吡嘧司特鉀濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸。

③ 加樣回收率：加入處方量的各輔料，分別制備含高(120%)、中(100%)、低(80%) 3種濃度吡嘧司特鉀對照品的鼻噴劑樣品，各濃度的對照品分別稱取3份，按⑤項下操作，計算平均回收率。

④ 精密度：分別取③項下的樣品，每個樣品在同一日進樣5次測定日內精密度，每個樣品在5個工作日內每日進樣1次測定日間精密度。

⑤ 供試品含量測定：精密量取吡嘧司特鉀鼻噴劑溶液適量，加蒸餾水稀釋為5.0 μg/mL的溶液，搖勻，過濾，得到吡嘧司特鉀供試品溶液。另取吡嘧司特鉀對照品加蒸餾水溶解并稀釋成5.0 μg/mL的對照品溶液。分別取對照品溶液和供試品溶液各20 μL注入高效液相色譜儀，得到峰面積圖像。

2 結果

2.1 不同濃度增粘劑對每噴噴量的影響 增粘劑濃度在0.3%～0.8%時，每噴噴量的RSD%值均在2%以下，當增粘劑濃度大于等于0.9%時，每噴噴量的RSD%值顯著增大，因此將增粘劑CMC-Na的濃度確定為0.8%，在此濃度下能夠使鼻噴劑每噴噴量穩定且黏度最大。見圖2。

圖2 含不同濃度羧甲基纖維素鈉的樣品每噴噴量均勻度檢查結果Fig.2 Investigation of spray amount uniformity with different concentrations of CMC-Na

2.2 質量控制研究

2.2.1 性狀及pH值：本品為白色混懸溶液，pH值為7.0。

2.2.2 裝量檢查：平均裝量為(25.12±0.16) mL，6瓶裝量分別為標示量的25.0(100 %)、25.0(100 %)、25.2(100.8 %)、 25.0(100%)、 25.4(101.6 %)、 25.1 mL(100.4 %)，均大于23.75 mL(95%)，符合質控標準要求。

2.2.3 每瓶總噴次：4瓶總噴次分別為 163、162、164、162噴，均大于160噴，符合質控標準要求。

2.2.4 每噴噴量：4瓶檢測3次的每噴噴量分別為(0.144±0.002)、(0.143±0.003)、(0.145±0.003)、(0.144±0.003)g/撳，均大于0.1400 g/撳，符合質控標準要求。

2.2.5 沉積體積比：經測定，本吡嘧司特鉀鼻噴劑的沉降體積比為1，符合質控標準要求。

2.3 含量測定

2.3.1 吡嘧司特鉀的回歸方程為：Y=810 85X+152 64，r=0.999 8，說明吡嘧司特鉀在0.5～25.0 μg/mL濃度范圍內，峰面積(A)與濃度(C)的線性關系良好，見圖3。

圖3 吡嘧司特鉀對照品工作曲線Fig.3 Work linear chart of series content of pemirolast potassium

2.3.2 加樣回收率及精密度檢測結果：高(120%)、中(100%)、低(80%) 3種濃度吡嘧司特鉀對照品的鼻噴劑樣品平均回收率為99.39%，精密度均符合要求。見表1。

表1 吡嘧司特鉀鼻噴劑的回收率與精密度測定Tab.1 Data of recovery test and precision test for pemirolast potassium nasal spray

2.3.3 供試品含量測定：供試品高效液相色譜圖見圖4，按照外標法計算供試品溶液中吡嘧司特鉀的含量。經檢測，吡嘧司特鉀鼻噴劑供試品中吡嘧司特鉀的含量為標示量的99.2%。

圖4 吡嘧司特鉀供試品(A)與對照品液相色譜圖(B)Fig.4 HPLC chart of pemirolast potassium nasal spray sample (A) and pemirolast potassium control solution (B)

3 討論

過敏性鼻炎的發生主要是由于鼻腔粘膜Th2免疫反應失調引起，這種鼻腔粘膜的異常免疫所引的過敏反應表現出鼻癢、流鼻涕、鼻塞、打噴嚏等鼻炎癥狀，嚴重影響患者的生活質量[8]。鼻腔內局部用藥治療過敏性鼻炎等疾病時，可以減少藥物劑量且具有起效迅速的優點，局部應用即可控制鼻腔局部的變態反應，避免了長期口服給藥產生的副作用，因此鼻腔給藥用于治療鼻腔、鼻竇內疾病日益受到關注。本研究考察了Ⅰ型變態反應抑制劑吡嘧司特鉀的鼻噴劑的處方組成并且制定了相應的質量標準，重點考察了增粘劑的使用比例，使藥物能夠產生最大黏性而又穩定噴射，并且制得的混懸液性狀穩定。局部應用治療過敏性結膜炎的吡嘧司特鉀滴眼劑經臨床多年應用證明療效確切，吡嘧司特鉀口服制劑對過敏性鼻炎的臨床療效也得到證明[9]，而目前該藥治療過敏性鼻炎只有口服給藥途徑，因此，本研究為進一步開發吡嘧司特鉀的鼻用制劑提供了研究基礎。

[1] 徐勤娥，林子萍，李澤卿.兩種劑量的吡嘧司特鉀片臨床研究報告[J].中國臨床藥理學與治療學，2007，12(4):465-469.

[2] 蘇梅，蔣敏.特異性Ⅰ型變態反應抑制劑吡嘧司特鉀[J].中國新藥雜志，2009，18(22):2099-2111.

[3] 王東興，高永良.鼻腔給藥新劑型研究進展[J].中國新藥雜志，2002，11(8):589-592.

[4] 梁光江，王彥東.滴眼劑中幾種常用抑菌劑的兔眼刺激性實驗[J].中國藥房，2010，21(21):1963-1966.

[5] 劉宏娟，劉德華，鐘建江.不同滲透壓調節劑對Candida krusei生理代謝的影響[J].微生物學通報，2005，32(6):35-38.

[6] 袁華,虞秋燕.丙酸氟替卡松鼻噴劑處方工藝研究[J].中國衛生產業，2012，9(16):29-30.

[7] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典二部[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄44，附錄13，附錄14，附錄17.

[8] 孫小青，殷敏，程雷.鼻內糖皮質激素在過敏性鼻炎治療中的合理應用[J].中華臨床免疫和變態反應雜志，2010,4(3)：216-220.

[9] 鄧智建，曹冬梅，盧振民.吡嘧司特鉀片治療過敏性鼻炎療效觀察[J].中國藥師，2010，13(7)：1008-1009.

(編校：王儼儼)

Preparation and quality control of pemirolast potassium nasal spray

QU Xiao-yu, SONG Yan-qing, ZHAO Hong-wei, ZHANG Si-xiΔ

(Department of Pharmacy, The First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, China)

ObjectiveTo prepare pemirolast potassium nasal spray which could be used in treatment of allergic rhinitis and make a quality control standard for the preparation.MethodsThe preparation materials of nasal spray was selected which could meet the physical and chemical properties of pemirolast potassium as well as the characteristics of intranasal administration.The quality control standards for pemirolast potassium nasal spray was made according to the nasal spray quality standards for the formulation pH, property, loading capacity, total bottle spray times, puff volume, sedimentation volume ratio and detection of content of “Chinese Pharmacopoeia” two section (2010 edition).ResultsThe formulation prescription of pemirolast potassium nasal spray was: 0.1% potassium pemirolast, 0.8% CMC-Na, 0.01% benzalkonium bromide, glacial acetic acid (pH adjusting agent) and the solution was 5% mannitol.The formulation was a white suspension, pH=7.The mean value of installed capacity was (25.12±0.16) mL and installed capacity of each bottle was above 23.75 mL(95%); total spray times of each bottle was above 160 sprays and spray volume was above 0.140 0 g/press; sedimentation volume ratio was 1, the above testing programmes of quality standard met the requirements and were controlled.The standard curve of pemirolast potassium reference substance wasY=81085X+15264(r=0.999 8), linearity range was 0.5～25.0 μg/mL.The average recovery rate of pemirolast potassium sample was 99.39%, and precision met the requirements.The pemirolast potassium content of test sample was 99.2% of labeled amount.ConclusionThe formulation prescription of pemirolast potassium nasal spray is suitable and the preparation is possessed several advantages such as stability, well-distributed spray, application convenience and quality controlled.Therefore, nasal administrated formulation of pemirolast potassium is potentially in further.

pemirolast potassium; nasal spray; preparation; quality control

曲曉宇，男，碩士，主管藥師，研究方向：藥物制劑學，E-mail：quxiaoyuhaha@163.com；張四喜，通訊作者，男，碩士，主管藥師，研究方向：醫院藥學，E-mail：zhsixi@163.com。

R927.2

A

1005-1678(2015)06-0154-03