鼠神經生長因子對危重型小兒手足口病患者體液免疫的影響

韓傳映，蔣剛健，陳鑫

(1.漯河醫學高等專科學校第一附屬醫院兒，河南 漯河 462000；2.漯河市醫學高等專科學校第一附屬醫院 檢驗科，河南 漯河 462000)

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鼠神經生長因子對危重型小兒手足口病患者體液免疫的影響

韓傳映1，蔣剛健1，陳鑫2

(1.漯河醫學高等專科學校第一附屬醫院兒，河南 漯河 462000；2.漯河市醫學高等專科學校第一附屬醫院 檢驗科，河南 漯河 462000)

目的 探討鼠神經生長因子對危重型小兒手足口病患者體液免疫影響。方法 隨機抽取漯河醫學高等專科學校第一附屬醫院感染科2010年6月～2012年9月收治的危重型小兒手足口病患者92例，隨機數字表法分為對照組和觀察組，每組46例。對照組采用常規對癥治療，觀察組在對照組治療基礎上聯合應用注射用鼠神經生長因子。治療14d后比較2組患者血細胞分析、體液免疫、細胞因子以及T淋巴細胞亞群各指標。結果 治療后，與對照組比較，觀察組白細胞、中性粒細胞與淋巴細胞水平較低(P<0.05)，觀察組IgM、IgG、IgA水平較高(P<0.05)，IL-1、IL-6、IL-10水平較低(P<0.05)，CD4+、CD8+水平較高(P<0.05)。結論 鼠神經生長因子能夠明顯改善小兒手足口病患者的體液免疫、細胞因子以及T淋巴細胞亞群各指標的水平，對臨床具有指導意義。

鼠神經生長因子；危重型手足口病；體液免疫；病情轉歸

手足口病(hand foot mouth disease，HFMD)是臨床上常見的一種嬰幼兒傳染性疾病，多發生在5歲以下兒童。常見的臨床癥狀主要有手、足、口腔等部位出現皰疹或者破潰性潰瘍等。少數手足口病患兒可引發腦膜炎、肺水腫、心肌炎等嚴重并發癥的出現[1-2]。危重型手足口病的臨床表現為持續性高熱(體溫>39.0 ℃)，持續時間約為2～7 d，伴有頻繁抽搐以及有嚴重意識障礙等癥狀，病情危重，亦可影響循環、呼吸系統[3]。本病是由腸道病毒71型和柯薩奇A16病毒引起的傳染性疾病。鑒于近幾年本病的發病率逐年升高，所以對重癥患兒危險性給予及時評估、干預并且改善患兒病情預后，成為臨床研究的重點[4]。研究發現[5]，鼠神經生長因子治療危重癥手足口病患兒，在改善體液免疫方面取得較好療效，能夠促進疾病轉歸。本文通過比較觀察組與對照組免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平，來探究鼠神經生長因子的治療效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年6月～2012年9月于漯河醫學高等專科學校第一附屬醫院感染科以手足口病為診斷而收入院患兒92例，年齡6個月～7歲，平均年齡(3.6±1.1)歲，患者病程均為2～5 d，按照我國衛生部頒布的《手足口病診療指南》(2010年版)[3]分型為危重型的患者。采用隨機數字表法將患者分為觀察組和對照組。對照組46例患兒，男21 例，女25例，年齡6個月～6歲，平均年齡(3.6±0.9)歲；觀察組46例患兒，男24例，女22例，年齡6個月～7歲，平均年齡(3.8±1.2)歲。2組患者的一般資料相仿，具有可比性。診斷標準及排除標準：根據《手足口病預防控制指南》確定診斷標準[6]：①臨床表現為口痛、厭食、低熱、手、足、口腔等部位出現小皰疹或小潰瘍；②自咽拭子、糞便、腦脊液、皰疹液、血清檢測到人腸道病毒；③自咽拭子、糞便、腦脊液、皰疹液、血清檢測到人腸道病毒核酸；④血清中人腸道病毒中和抗體滴度為1:256以上。病程為2～7 d，并均在發病48 h內入院；入院前2月內未行激素、丙種球蛋白等藥物治療。排除臨床未確診的HFMD患兒；排除心、肝、腎、肺嚴重疾病者；排除臨床檢驗提示合并細菌或支原體感染的患兒。本研究獲得患者知情同意。

1.2 治療方法 根據國際臨床用藥指南[6]，對照組入院后予以雙黃連口服液(哈爾濱中藥四廠有限公司，國藥準字Z10910024)10 mL/次，每天3次抗病毒治療，布洛芬混懸液(上海強生制藥有限公司，國藥準字H20000359)0.1 g退熱、有顱內壓增高者可給予20%甘露醇注射液(四川美大康華康藥業有限公司，國藥準字H51023254)50 mL靜脈滴注，常規補液以糾正酸堿平衡和離子紊亂等；觀察組在常規對癥治療的基礎上聯合應用注射用鼠神經生長因子(武漢海特生物制藥股份有限公司，國藥準字S20060051)20 μg肌肉注射，每天1次，2周為1療程，治療1個療程。

1.3 檢測指標 患者入組后第1天清晨及最后1天清晨抽取空腹靜脈血5 mL，3000 r/min離心后取上清備用。應用全自動生化分析儀檢測C反應蛋白(C-reactionprotein，CRP)、谷氨酰胺(glutarnine，Glu)、WBC水平。應用流式細胞儀檢測患者血清CD4+、CD8+相對含量。采用免疫比濁法檢測2組患者血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平。采用化學發光法，檢測血清中IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平。試劑盒由賽馳生物公司提供，嚴格按照試劑盒的說明書操作。

2 結果

2.1 血細胞分析比較 治療前患者血細胞分析指標差異無統計學意義，具有可比性。經治療，2組患者血細胞分析指標均下降(P<0.05)。與對照組比較，觀察組白細胞、中性粒細胞與淋巴細胞水平較低(P<0.05)，單核細胞比較差異無統計學意義。見表1。

表1 2組患者血細胞分析指標比較Tab.1 Comparison of blood cell analysis between two ±s，×109/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group after treatment

2.2 體液免疫指標比較 治療前2組患者IgM、IgG、IgA水平比較差異無統計學意義。經治療，患者IgM、IgG、IgA水平上升(P<0.05)。與對照組相比，觀察組IgM、IgG、IgA水平較高(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者IgM、IgG、IgA水平比較Tab.2 Comparison of IgM，IgG and IgA levels between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group after treatment

2.3 IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比較 治療前患者IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比較差異無統計學意義。治療后，2組患者的IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平均下降(P<0.05)。與對照組相比，觀察組患者的IL-1、IL-6、IL-10水平較低(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平比較Tab.

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group after treatment

2.4 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較 治療前患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較差異無統計學意義。經治療，2組患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平升高(P<0.05)。與對照組相比，觀察組患者的CD4+、CD8+水平較高(P<0.05)，CD4+/CD8+比較差異無統計學意義。

組別 例數時間CD4+CD8+CD4+/CD8+對照組46治療前0.81±0.1314.32±2.120.83±0.13治療后28.77±4.68*22.18±3.34*1.23±0.19*觀察組46治療前0.83±0.1214.55±2.210.85±0.11治療后33.84±4.63*#26.36±3.86*#1.25±0.18*

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group after treatment

3 討論

手足口病是因感染人腸道病毒引起的手、足、口腔出現皰疹伴發熱為表現的急性傳染病，該病主要的病原體為柯薩奇病毒A16型和腸道病毒71型，好發于每年的5～6月，以消化道、呼吸道及接觸傳播為主要傳播途徑，多發于兒童[7]。手足口病具有較強的傳染性，能夠在短期內發生大量兒童感染，病毒能夠隨著血液侵入大腦及脊髓中，引起腦炎、腦脊髓炎嚴重的神經系統性疾病，嚴重威脅患兒生命。研究表明[8]，人腸道病毒侵襲機體后，病毒本身及分泌毒素能夠直接侵入組織而損傷細胞，引起異常的免疫反應，手、足及口周出現皰疹。

本實驗結果顯示，入院手足口病患兒血中體液免疫各項指標均較低，經治療方案治療后，各項指標恢復，與對照組比較，觀察組各項免疫指標較高。提示患兒感染人腸道病毒后，導致機體免疫水平紊亂，免疫球蛋白處于低水平狀態，導致無法清除體內病毒，導致病毒對組織的損傷[9]。免疫球蛋白IgA[10]是由氣管黏膜、鼻黏膜、肺黏膜等分泌的抗體，能夠敏感監測和防御呼吸系統局部感染，若呼吸系統出現病毒或細菌感染時，黏膜分泌水平下降，無法正常分泌IgA抗體，導致機體免疫力下降，出現口腔黏膜皮疹。IgM是體液免疫中出現最早、生存時間最短的免疫球蛋白，當患兒感染人腸道病毒時，機體免疫紊亂，免疫水平低下，從而嚴重影響IgM的形成和分泌[11]。IgG是下呼吸道保護性抗體，能夠敏感的反映呼吸道黏膜防御病毒及細菌感染的水平。

本實驗結果表明，經治療后，2組患者的IL-1、IL-6、IL-8、IL-10水平上升，與對照組相比，觀察組IL-1、IL-6、IL-10水平較低。IL-1是炎癥反應早期的重要介質之一，主要存在于循環系統中。IL-1在低濃度下可特異性作用于單核巨噬細胞和血管內皮細胞；大量分泌時，IL-1進入血液，引起全身性的炎癥反應[12]。本實驗中IL-1參與炎癥反應，與患者的病情輕重密切相關。大多數IL-6由單核細胞產生。當機體發生炎癥時，巨噬細胞和單核細胞產生IL-6的反應細胞，使炎癥部位及全身的IL-6水平升高。在機體的作用與IL-1相似。通過IL-1激活[13]。本實驗患者IL-6水平升高，提示其正在參與機體的炎癥活動。IL-8是中性粒細胞的趨化因子，能夠趨化并激活中性粒細胞，促進其脫顆粒，增強其吞噬作用。IL-10可由多種細胞分泌，具有免疫抑制和激活的雙重作用[14]。

目前，臨床通常采用檢測T細胞亞群判斷患者機體細胞免疫功能水平，本研究結果表明，經治療后，2組患者的CD4+、CD8+水平均明顯改善，與對照組相比，觀察組患者的CD4+、CD8+水平明顯升高。研究表明CD4+、CD8+能夠調節人體的免疫功能，其中CD4+可以刺激產生抗體，CD8+對抗體合成具有抑制作用，2者的協調作用使機體的免疫功能維持正常，其比值提示了人體的免疫功能水平[15]。CD4+參與Th2細胞激活。CD8+激活細胞毒性T細胞，調節人體的免疫活動。

研究表明[16]，鼠神經生長因子主要成分系從小鼠頜下腺提取的神經生長因子，具有促進呼吸道黏膜的愈合和抗病毒的能力，從而恢復呼吸系統黏膜對免疫球蛋白的分泌，恢復機體的免疫水平。研究證實[17]，體內神經生長因子(NGF)是一種神經活性多肽，不僅具有中樞神經系統營養因子的作用，還能促進受損神經元的再生，改善神經元的病理狀態對神經損傷具有重要的保護和修復作用。在胚胎時期，NGF分布廣泛，含量較多，在出生后分布區域明顯減少而且含量下降，至成年保持較低水平。本研究推斷鼠神經生長因子作用機理，因神經損傷后NGF應激性表達水平上調，但內源性NGF表達增加時程很短，表達水平有限，難以對受損神經元起到全面而持久的保護作用，鼠神經生長因子彌補了這項不足。正常生理狀態下，外源性NGF不易透過血腦屏障，但在顱內感染等導致血腦屏障受損傷時，NGF 可透過血腦屏障進入中樞神經系統發揮作用。

鼠神經生長因子能夠明確增強患兒體液以及細胞免疫功能，進而促進患兒疾病轉歸，對臨床具有指導意義。但本實驗尚未大樣本研究鼠神經生長因子與體液免疫功能及病情轉歸，也未做長遠的預后分析，還需進一步深入研究。

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(編校：王儼儼)

Effect of mouse nerve growth factor on humoral immunity in children with severe hand foot mouth disease

HAN Chuan-ying1, JIANG Gang-jian1, CHEN Xin2

(1.Department of Pediatrics, The First Affiliated Hospital of Luohe Med & Cal College, Luohe 462000, China; 2.Department of Laboratory, The First Affiliated Hospital of Luohe Med & Cal College, Luohe 462000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of mouse nerve growth factor on humoral immunity in children with severe hand foot mouth disease.Methods92 patients with severe hand foot mouth disease were selected from June 2010 to September 2012 in the hospital, and randomly divided into two groups.The indexes of blood cell analysis, humoral immunity, cytokines and T lymphocyte subsets were compared after treatment.ResultsAfter treatment, compared with control group, the numeration white blood cell, neutrophil and lymphocyte of observation group were lower (P<0.05), IgM, IgG and IgA were higher (P<0.05), IL-1, IL-6 and IL-10 were lower (P<0.05), CD4+and CD8+were higher (P<0.05).ConclusionMouse nerve growth factor can significantly improve the each index of humoral immunity cytokines and T lymphocyte subsets level in children with hand foot mouth disease, which has the great significance in clinical.

mouse nerve growth factor; severe hand foot mouth disease; humoral immunity; prognosis

韓傳映，男，本科，副主任醫師，研究方向：兒科，E-mail：okhcying@163.com。

R72

A

1005-1678(2015)05-0135-03