不同免疫程序下豬瘟、高致病性豬藍耳病和口蹄疫免疫效果分析

張明敬　李　峰　單玉平　孫　田（連云港市畜牧獸醫站，江蘇連云港222001）

豬病防控Swine Disease Prevention and Control

不同免疫程序下豬瘟、高致病性豬藍耳病和口蹄疫免疫效果分析

張明敬李峰單玉平孫田
（連云港市畜牧獸醫站，江蘇連云港222001）

摘要：本文通過6組不同免疫程序下對豬瘟（HC）、高致病性豬藍耳病（HPRRS）和口蹄疫（FMD）免疫效果進行跟蹤監測，分析每一組免疫程序下各疫病的免疫抗體水平，發現HC的免疫抗體水平受其他疫苗的免疫程序影響較小；HPRRS的提前單獨免疫可能促進豬瘟抗體的產生，HPRRS的免疫抗體水平受其他疫苗的免疫程序影響較小；口蹄疫合成肽疫苗的抗體水平在HPRRS提前單獨免疫后，下降明顯，兩者之間是否存在相關，還需要進一步試驗佐證。

關鍵詞：豬瘟；高致病性豬藍耳病；口蹄疫；免疫程序；免疫效果

豬瘟（Swine Fever, Hog Cholera, HC）、高致病性豬藍耳病（High Pathogenicity Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, HPRRS）、和口蹄疫（Foot and Mouth Disease, FMD）是目前危害養豬生產的主要傳染病，最有效的預防方法就是免疫注射。世界動物衛生組織（OIE）將HC、FMD列為A類家畜傳染病，將HPRRS列為B類傳染病，同時將這三種疫病列為世界范圍內重要傳染病研究行列[1,2]。本試驗通過6組不同免疫程序下對HC、HPRRS 和FMD免疫效果進行跟蹤監測，分析每一組免疫程序下各疫病的免疫抗體水平，旨在確定更符合連云港地區豬群的免疫程序。現報告如下。

1　材料和方法

1.1試驗動物

連云港市某自繁自養規模豬場提供的母豬及仔豬。

1.2疫苗

豬瘟疫苗（以下簡稱HC）、高致病性豬藍耳病疫苗（以下簡稱HPRRS）、口蹄疫合成肽疫苗（以下簡稱VP1苗）及豬O型口蹄疫滅活濃縮疫苗(以下簡稱206苗)均使用的是政府招標統購苗。

1.3檢測試劑和判定

豬瘟抗體ELISA試劑盒（批號：T4413040）和豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體ELISA試劑盒（批號：T4404071）購自韓國安捷公司、豬口蹄疫病毒VP1結構蛋白抗體酶聯免疫吸附試驗診斷試劑盒（批號：201403004）購自上海優耐特生物公司以及口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒（批號：2014060301）購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所，試驗操作和結果判定按說明書要求進行。

1.4分組方法及免疫程序

本試驗共分為6組進行，分別為A、B、C、D、E和F組，每組12頭仔豬（注：免疫過程中有個別應激死亡，所以實際試驗數據每組不滿12頭），每組的免疫程序均有所不同，試驗分組及免疫程序詳見表1。

表1　試驗分組及免疫程序

1.5樣品采集及檢測方法

仔豬一免前采血，檢測血清中HC、HPRRS及FMD母源抗體水平；之后在60、70、102和135日齡分別采血，檢測血清中HC、HPRRS、FMD的抗體水平。檢測方法及步驟按試劑盒說明書進行操作和分析。

2　結果與分析

2.1HC苗的免疫效果

圖1為6組免疫程序下不同采血時間豬瘟抗體的檢測結果。從圖中可以看出，一免前HC的抗體水平除B組外，其他5組的HC抗體合格率都在70%以上，說明仔豬在胎兒期間已經獲得了母源抗體。仔豬60日齡（即HC二免后14天）時，6個試驗組的HC抗體群體合格率均達到了很高水平，之后A組的HC抗體水平持續下降到較低的水平，可能該組的豬群受到了HC病毒的侵襲，由于仔豬本身的抗體水平較高，HC病毒只是中和了豬群本身的一部分抗體而并未對豬群致病；B組的HC高抗體水平維持到102日齡（即二免后56天）開始下降，隨后抗體水平又出現上升現象，可能該豬群中存在HC病毒的一過性感染；C、D、E、F組的HC抗體均在很長一段時間維持在一個較高的水平，完全符合加強免疫后，抗體在14～21天迅速上升至很高的水平并維持很長一段的時間的規律，因此本試驗中的C、D、E、F組的豬瘟免疫程序能較好地抵抗HC病毒的侵襲，保護豬群。與A組相比，C組是HPRRS提前免疫組，C組的HC的抗體水平在二免后的24天、55天和89天均高于A組，這說明HPRRS的提前免疫有利于HC的免疫效果。

圖1　HC苗免疫抗體結果

2.2HPRRS苗的免疫效果

從圖2中可以看出，免疫前HPRRS的抗體水平都較低，群體抗體合格率均在40%以下，本次試驗仔豬免疫前的采樣日齡是15天，文獻報道HPRRS的母源抗體可以維持到斷奶前后，也就是28天左右，說明仔豬在胎兒期間沒有獲得足夠的母源抗體，有的甚至沒有獲得母源抗體。到60日齡時，即HPRRS免疫后的30天，6個試驗組的HPRRS群體合格率均達到了很高水平，除A組外，其他5組的群體抗體合格率都在80%以上，直到135日齡時豬血清中的抗體水平仍較高，群體合格率均達到100%。本次試驗所使用的是HPRRS弱毒疫苗，因此可以看出只需使用HPRRS弱毒疫苗對豬群進行一次免疫，就能使豬群得到很好的保護，而不受其他免疫程序的影響，這也符合金光明[3]等的研究，其研究表明仔豬進行HPRRS弱毒苗免疫后的第110天采用同源強毒感染，動物可得到完全保護，而且對強毒感染的保護甚至是終生的。

2.3VP1苗的免疫效果

從圖3中可以看出，免疫前VP1的抗體水平都較高，群體抗體合格率都在70%以上，說明仔豬在胎兒期間已經獲得了很好的VP1母源抗體。A、B及C組對口蹄疫的免疫，未采用VP1苗，兩次免疫都采用206苗，結果顯示，二免后A、B及C組VP1抗體水平持續下降。D、E及F組對口蹄疫的免疫，首免采用206苗，二免采用VP1苗，結果顯示二免后此3組VP1的抗體都維持在較高的水平。根據免疫學原理：206疫苗是O型口蹄疫的全病毒滅活疫苗，經206疫苗免疫后產生的是全病毒抗體，同時因為是滅活疫苗，所以免疫后產生抗體的時候較長，且必需經過二免才能達到理想的免疫抗體水平。而VP1疫苗是口蹄疫病毒結構蛋白上的一個多肽片段，經VP1疫苗免疫后所產生的是病毒結構蛋白抗體，由于VP1是表達蛋白，且蛋白抗原小而單一，純度高，免疫進入動物體內后不需要像病毒那樣需要復雜的識別和提呈過程，所以能很快產生針對病毒結構蛋白的抗體。筆者曾經做過206苗和VP1苗免疫后的免疫抗體水平對比試驗，發現豬的VP1苗在一免后14天就能產生較高水平的抗體，并且高抗體水平能維持很長一段時間，而豬的206苗二免后抗體群體合格率都很難達到80%，這次的試驗結果也與之前相符。同時對比A和C兩組免疫程序與結果發現，206苗同樣的免疫劑量與免疫日齡，C組的抗體下降較A組更快些，這可能與HPRRS的免疫先后有關。

圖2　HPRRS苗免疫抗體結果

圖3　VP1苗免疫抗體結果

圖4　206苗免疫抗體結果

2.4206苗的免疫效果

從圖4中可以看出，一免前豬O型口蹄疫抗體都處在極低的水平，調查發現生產該豬群的母豬之前的免疫程序中所使用的均為口蹄疫VP1疫苗，所以血清中沒有檢測到針對206苗的母源抗體的存在。A、B、C、F四組的O型口蹄疫抗體在60日齡（即二免后14天）均有不同程度的提高。而二免使用VP1苗的D、E兩組的O型口蹄疫抗體滴度均很低，群體抗體合格率均不合格。其中A組的豬O型口蹄疫抗體水平在二免后24天開始下降；B組的豬O型口蹄疫抗體水平維持在一個較高的水平，直至135日齡（即二免后89天）；C組的O型口蹄疫抗體水平呈現起伏狀態，60日齡（即二免14天）時，抗體水平得到提高，70日齡時迅速下降，102日齡時抗體水平再次上升，但群體的合格率始終沒有達到70%，疫病風險始終存在，猜測當HPRRS先于206苗免疫時，會影響206苗的初次免疫效果。此外，與A組相比，B組分別在一免和二免時增加了1 mL 206苗的免疫劑量，結果顯示B組在二免后不同時間點的抗體水平均高于A組，這表明增加206苗的免疫劑量與提高豬O型口蹄疫的免疫效果可能存在正相關關系。

3　討論

從本次試驗的結果中可以看出，HC免疫后抗體水平受其他疫苗的免疫程序影響較小，只要肉豬在養殖期間進行兩次免疫，就能刺激機體產生較高水平的抗體，保護肉豬免受HC病毒的感染而引起生產性能的下降，同時，如果對肉豬進行HPRRS的提前單獨免疫可能對豬瘟抗體的產生具有促進作用。HPRRS免疫后抗體水平受其他疫苗的免疫程序影響較小，只要對豬群進行一次弱毒苗的免疫，就能刺激機體產生較高水平的抗體，保護其在養殖期免受HPPRS病毒的感染，但同時我們也發現，HPRRS的母源抗體水平持續時間并不像以前文獻報道的那么長，而目前大部分養殖場推行的免疫程序是在仔豬斷奶前后（28天左右）進行初免，因此存在HPRRS抗體的免疫空白期，在此期間如果仔豬受到HPRRS病毒的感染，則會對整個豬群的生產性能造成較大影響，因此，最好將HPRRS的免疫時間稍微向前調整。

同時，由于HPRRS是免疫抑制性疾病，在HPRRS提前單獨免疫后VP1抗體水平下降較其他組明顯；將HPRRS作為首免疫苗，206苗作為后免疫苗，豬群O型口蹄疫抗體水平呈現起伏狀態，群體的合格率始終低于70%，說明HPRRS苗與206苗免疫的先后順序影響206苗的免疫效果；不能滿足我國現行的重要動物疫病的防疫要求。在此基礎上，在一免和二免時分別將206苗的免疫劑量由1 mL增加至2 mL，有助于獲得更高的免疫抗體水平。華樹明[4]研究表明：O型FMD、HC和HPRRS疫苗同時分點注射后，FMD抗體效價合格率不高，免疫效果不佳；HC抗體效價合格率較高，免疫效果較好。雖然我們的試驗不是同時分點注射的，但就試驗結果來說與上述研究存在一定的相似性。

綜上所述，為了獲得最好的組合免疫效果，應合理縮短HPRRS的免疫空白期。建議在實際免疫的時候，在保持HC免疫時間點不變的情況下，將HPRRS疫苗的免疫時間點稍微向前調整，同時在接下來的免疫程序中增加206疫苗的免疫劑量，有助于肉豬獲得更為有效的免疫抗體，從而保證肉豬在養殖期間的健康，以降低養殖風險，增加養殖效益。

參考文獻

[1]殷震,劉景華.動物病毒學[M].北京:科學出版社, 1997:652-664.

[2]蔡寶祥.家畜傳染病學[M].第4版.北京:中國農業出版社, 2001.

[3]金光明,楊倩.豬繁殖與呼吸綜合征免疫學研究[J].安徽農業科學, 2003, 31(1): 114-116.

[4]華樹明.高致病性豬藍耳病疫苗與口蹄疫、豬瘟疫苗同時分點注射對口蹄疫、豬瘟抗體效價的影響試驗[J].浙江畜牧獸醫, 2008(4):6-7.

中圖分類號：S828

文獻標識碼：B

文章編號：1673-4645(2015)03-0044-04

收稿日期：2015-01-04