福貢縣豬細(xì)小病毒病的流行情況監(jiān)測(cè)與分析

余四娜

(云南省福貢縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,云南福貢 673400)

福貢縣豬細(xì)小病毒病的流行情況監(jiān)測(cè)與分析

余四娜

(云南省福貢縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,云南福貢 673400)

2012年～2014年,采用豬細(xì)小病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),對(duì)我縣57個(gè)村飼養(yǎng)的部分生豬進(jìn)行了豬細(xì)小病毒監(jiān)測(cè)。共監(jiān)測(cè)血清樣品687份,結(jié)果:豬細(xì)小病毒血清抗體陽(yáng)性數(shù)112份,陽(yáng)性率16.30%。通過(guò)監(jiān)測(cè),基本查清了我縣豬細(xì)小病毒的流行分布情況。

豬;細(xì)小病毒;監(jiān)測(cè)

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清

無(wú)菌采集豬耳靜脈或前腔靜脈血液樣品，離心或靜置分離血清，待血清析出后，收集血清，冷藏（冷凍）保存待用。

1.1.2 試劑

檢測(cè)試劑均由武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司提供，批號(hào)：（2012年、120602，2013年、130301、130402，2014年、140301）

1.2 方法

豬細(xì)小病毒ELISA試驗(yàn)

（1）洗滌液配制 使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（20～25℃），半搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋?zhuān)ɡ纾?0ml的濃縮洗滌液加上570ml蒸餾水），稀釋好后的洗滌液在2～8℃可以存放7d。

（2）樣品和對(duì)照稀釋

（3）樣品稀釋?zhuān)涸谘逑♂屩邪?：40的體積稀釋血清樣品（例如：195μl樣品稀釋液中加入5μl待檢血清樣品）。

（4）對(duì)照稀釋?zhuān)涸谘逑♂尠逯邪?：4分別稀釋陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照（例如：180μl樣品稀釋液中加入60μl對(duì)照血清）。

（5）操作步驟

①取抗原包被板，分別將稀釋好的待檢血清和對(duì)照各取100uL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰陽(yáng)性對(duì)照各做2孔。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30 min。

②甩掉孔中的溶液，每孔中加入稀釋液200μl，靜置3min倒掉，再在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌5次。

③每孔加入羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl，置37℃溫育30min。

④洗滌5次，方法同②。

⑤每孔加底物A、B液各1滴（50μl），混勻，室溫避光顯色10min。

⑥每孔加終止液1滴（50μl），10min內(nèi)測(cè)定結(jié)果（測(cè)定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下）。

（6）結(jié)果判定

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630值，試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630值≥0.6，陰性對(duì)照孔平均OD630值必須＜0.3。

樣品孔OD630值≥0.4，判為陽(yáng)性，樣品孔OD630值＜0.4，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果

采用豬細(xì)小病毒ELISA抗體檢測(cè)試驗(yàn)，2012年～～2014年共檢測(cè)血清樣品687份，檢出陽(yáng)性血清112份，陽(yáng)性率為16.30%（112/687），其中：2012年監(jiān)測(cè)129份，檢出陽(yáng)性數(shù)1份，陽(yáng)性率0.775%（1/129），2013年監(jiān)測(cè)304份，檢出陽(yáng)性數(shù)51份，陽(yáng)性率16.78%（51/304），2014年監(jiān)測(cè)254份，檢出陽(yáng)性數(shù)60份，陽(yáng)性率23.62%（60/254）。從2012年～2014年血清樣品檢測(cè)情況看，馬吉鄉(xiāng)送檢豬血清樣品111份，陽(yáng)性數(shù)33份，陽(yáng)性率29.73；石月亮鄉(xiāng)送檢豬血清樣品66份，陽(yáng)性數(shù)1份，陽(yáng)性率1.52%；鹿馬登鄉(xiāng)送檢豬血清79份，陽(yáng)性數(shù)31份，陽(yáng)性率39.24%；上帕鎮(zhèn)送檢豬血清樣品95份，陽(yáng)性數(shù)13份，陽(yáng)性率13.68%；架科底鄉(xiāng)送檢豬血清樣品157份，陽(yáng)性數(shù)29份，陽(yáng)性率18.47%；子里甲鄉(xiāng)送檢豬血清樣品89份，檢出陽(yáng)性數(shù)5份，陽(yáng)性率5.62%；匹河鄉(xiāng)送檢豬血清樣品90份，未檢出陽(yáng)性數(shù)（具體檢監(jiān)測(cè)情況見(jiàn)表1、表2、表3）。

表1 2012～2014年豬細(xì)小病毒監(jiān)測(cè)情況

表2 2011-2014年豬細(xì)小病毒陽(yáng)性率對(duì)比圖

表3 2012年～2014年鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細(xì)小病毒監(jiān)測(cè)情況

2.2 分析

從豬細(xì)小病毒ELISA抗體檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，我縣除匹河鄉(xiāng)未檢出豬細(xì)小病毒陽(yáng)性血清外其余鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有檢出陽(yáng)性數(shù)。該病在我縣感染的原因有以下幾點(diǎn)：一是在引種時(shí)，檢疫把關(guān)不嚴(yán)，防制措施不得力。為促進(jìn)我縣養(yǎng)豬業(yè)的快速發(fā)展，有關(guān)部門(mén)在不了解原產(chǎn)地疫情狀況及牲畜免疫背景情況下從外縣引進(jìn)大批種豬用仔豬扶持給農(nóng)戶(hù)飼養(yǎng)，從而給本病的流行傳播創(chuàng)造了條件；二是由于自然條件差，農(nóng)戶(hù)飼養(yǎng)管理跟不上等因素，致使豬抵抗力下降，病原乘虛而入，引發(fā)了本病的發(fā)生；三是養(yǎng)殖農(nóng)戶(hù)防疫意識(shí)差，疫情觀念不強(qiáng)，對(duì)引進(jìn)的種豬沒(méi)有進(jìn)行嚴(yán)格的隔離觀察和預(yù)防接種。

3 討論

（1）從2012～2014年豬細(xì)小病毒ELISA抗體檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，我縣豬細(xì)小病毒ELISA抗體檢測(cè)試驗(yàn)檢出陽(yáng)性數(shù)112份，陽(yáng)性率為16.72 %，除匹河鄉(xiāng)未檢出陽(yáng)性數(shù)外其余鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有檢出陽(yáng)性數(shù)。豬細(xì)小病毒屬于二類(lèi)動(dòng)物疫病。

（2）由于豬細(xì)小病毒病對(duì)各種不同年齡、性別的家豬和野豬均易感。傳染源主要來(lái)自感染細(xì)小病毒的母豬和帶毒的公豬，后備母豬比經(jīng)產(chǎn)母豬易感染，病毒能通過(guò)胎盤(pán)垂直傳播，而帶毒豬所產(chǎn)的活豬可能帶毒排毒時(shí)間很長(zhǎng)甚至終生。感染種公豬也是該病最危險(xiǎn)的傳染源，可在公豬的精液、精索、附睪、性腺中分離到病毒，種公豬通過(guò)配種傳染給易感母豬，并使該病傳播擴(kuò)散。

（3）強(qiáng)化生物安全體系建設(shè)，環(huán)境條件、硬件設(shè)施要滿(mǎn)足豬生長(zhǎng)、繁殖的要求，衛(wèi)生（衛(wèi)生要求保持清潔、干燥、通風(fēng)）、消毒（常見(jiàn)的消毒藥有氫氧化鈉、3%來(lái)蘇爾、含氯消毒粉、甲醛、生石灰等）、隔離（隔離期一般為2～4周）、無(wú)害化處理（對(duì)病死畜無(wú)害化處理的方法一般是深埋或燒毀）等疫病防控制度不但要健全更重要的是落實(shí)。

（4）把好引種關(guān)。引種往往是導(dǎo)致豬細(xì)小病毒病發(fā)生的重要原因，引種前應(yīng)了解被引進(jìn)場(chǎng)豬群是否有豬細(xì)小病毒感染，懷孕母豬是否有繁殖障礙臨床表現(xiàn)，母豬群是否做過(guò)疫苗預(yù)防接種，不能單純以引進(jìn)種（母）豬PPV血清抗體檢測(cè)陰性為標(biāo)準(zhǔn)，引進(jìn)的種（母）豬應(yīng)先飼養(yǎng)在隔離場(chǎng)（廄）進(jìn)行隔離觀察，兩周后無(wú)異常混群飼養(yǎng)。

（5）豬細(xì)小病毒病目前尚無(wú)有效的治療方法，有流產(chǎn)、死胎及產(chǎn)木乃伊臨床表現(xiàn)時(shí)應(yīng)在飼料或飲水中添加廣譜抗菌類(lèi)藥物（如青霉素、氨芐西林等）控制“產(chǎn)后”感染。

（6）制定科學(xué)和切實(shí)有效的免疫接種計(jì)劃，做好免疫接種。豬細(xì)小病毒只有一個(gè)血清型且免疫原性良好，疫苗接種種公豬及種母豬對(duì)預(yù)防母豬感染豬細(xì)小病毒所引起的流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)木乃伊等臨床表現(xiàn)有著良好的效果。

[1] 曹三杰，文心田.應(yīng)用斑點(diǎn)免疫金染色法檢測(cè)豬細(xì)小病毒病抗體的研究[J]. 中國(guó)獸醫(yī)雜志，2003，39（11）：3-6.

[2] 諸亞平，趙長(zhǎng)城.豬細(xì)小病毒病流行的調(diào)查與防疫研究[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（1）：114-115.