不同配比杜仲丸對SAMP6小鼠抗抑郁作用的研究*

段衛華，于佳慧，高秀梅（天津中醫藥大學，天津300193）

·中藥研究·

不同配比杜仲丸對SAMP6小鼠抗抑郁作用的研究*

段衛華，于佳慧，高秀梅
（天津中醫藥大學，天津300193）

［目的］研究不同配比杜仲丸的抗抑郁作用。［方法］采用3月齡快速老化SAMP6小鼠及其同源正常對照SAMR1為研究對象，應用杜仲丸、杜仲和續斷進行治療12周。末次灌胃給藥1 h后，采用小鼠曠場實驗（OFT）、小鼠懸尾實驗（TST）、小鼠強迫游泳實驗（FST）研究不同配比的杜仲丸的抗抑郁作用。［結果］在FST和TST中，杜仲丸低劑量組能顯著降低小鼠不動時間（P＜0．05或P＜0．01）。［結論］杜仲丸具有一定的抗抑郁作用。

杜仲丸；抑郁癥；強迫游泳實驗；懸尾實驗；SAMP6小鼠

DOI：10.11656/j.issn.1673-9043.2015.01.11

抑郁癥是一種常見的精神疾患，以顯著持久的情感抑郁或心境改變為主要特征，以情緒運動抑制、思維遲緩，常伴有注意力降低、記憶力減退等為主要臨床表現，甚至會出現自傷或自殺行為。隨著社會的快速發展，社會競爭日益加劇，工作生活壓力不斷增大，抑郁癥的發病率逐年增高，成為嚴重危害公眾健康的社會問題。中醫藥治療抑郁癥療效肯定，不良反應較小，具有一定的優勢。

杜仲丸始載于宋代陳自明撰寫的《校注婦人良方》，由杜仲、續斷各等分組成，具有補腎作用，是中醫臨床常用的補腎對藥。本文基于中醫“腎主生髓”的傳統理論，研究杜仲丸組成藥物杜仲、續斷不同配伍比例對快速老化小鼠SAMP6出現的抑郁行為的影響。

1　材料

1.1動物SPF級3月齡SAMP6小鼠，正常同源對照SAMR1小鼠，雌雄各半，購自天津中醫藥大學第一附屬醫院實驗動物中心SAM鼠繁育屏障系統，合格證號：實驗動物（飼）字0004590。飼養環境終年維持室溫（23±2）℃，相對濕度55%～60%，換風16次/h，12 h光照/12 h黑暗自動控制循環光照。

1.2藥品杜仲、續斷購自安國市順全隆中藥材有限公司，經天津中醫藥大學藥學院中藥鑒定教研室張麗娟教授鑒定。杜仲、續斷生藥分別以10倍量70%乙醇回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液濃縮，真空干燥得提取物。按照杜仲、續斷生藥量1∶1比例，按上述工藝制備杜仲丸提取物。

2　方法

2.1動物分組與給藥清潔級3月齡快速老化骨質疏松模型小鼠SAMP6 50只，正常同源對照小鼠SAMR1 10只，雌雄各半。SAMP6小鼠按隨機數字表法隨機分為SAMP6組、杜仲丸高劑量組（生藥6g/kg，即杜仲、續斷生藥各用3 g/kg）、杜仲丸低劑量組（生藥3 g/kg，即杜仲、續斷生藥各用1.5 g/kg）、杜仲組（即只用杜仲生藥3 g/kg）、續斷組（即只用續斷生藥3 g/kg），SAMR1組和SAMP6組分別灌服蒸餾水，灌胃給藥12周。每周稱量1次體質量，根據體質量調整給藥量。于末次給藥1 h后，進行行為學測試。

2.2小鼠曠場實驗（OFT）末次給藥1 h后，將單只小鼠放入箱內底面中心，同時進行攝像和計數。觀察4 min，兩位觀察者記錄小鼠穿格數和直立的次數，取平均值。每只鼠完成實驗后須徹底清洗方箱內壁及底面，以免上一只鼠遺留的信息干擾下次測試結果。

2.3小鼠懸尾實驗（TST）將單只小鼠在距尾尖約2 cm處用膠帶固定尾部，將其倒掛于箱中，注意避免形成機械性損傷。動物行為視頻分析系統記錄6 min小鼠行為，計后4 min內小鼠懸尾不動時間（不動判斷標準為小鼠停止掙扎，靜止不動，身體呈倒垂狀態）。

2.4小鼠強迫游泳實驗（FST）將單只小鼠放入水深約10 cm，水溫（24±2）℃的燒杯中。動物行為視頻分析系統記錄6 min小鼠游泳行為，計錄后4 min內小鼠游泳的不動時間（不動判斷標準為小鼠停止掙扎，漂浮在水中，僅有微小的肢體活動保持漂浮在水面）。

2.5統計學處理采用SPSS 18.0軟件，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，符合正態分布計量資料組間比較采用單因素方差分析，符合偏態分布計量資料組間比較采用秩和檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

3　實驗結果

3.1小鼠強迫游泳實驗實驗結果表明，和SAMR1組小鼠相比，SAMP6組小鼠強迫游泳的不動時間顯著延長（P＜0.05）；與SAMP6組比較，杜仲丸低劑量組SAMP6小鼠的強迫游泳不動時間顯著降低（P＜0.05）。見表1。

3.2小鼠懸尾實驗實驗結果表明，和SAMR1組小鼠相比，SAMP6組小鼠懸尾實驗的不動時間顯著延長（P＜0.01）；和SAMP6組比，杜仲丸低劑量組和杜仲組SAMP6小鼠的懸尾實驗不動時間顯著降低（P＜0.01，P＜0.05）。見表1。

3.3小鼠曠場實驗見表2。小鼠曠場實驗的結果顯示，杜仲丸及其組成藥物對SAMP6小鼠自主活動能力未見影響。

表1　杜仲丸對SAMP6小鼠強迫游泳、懸尾實驗不動時間的影響（x±s）s

表2　杜仲丸對SAMP6小鼠曠場實驗的影響（x±s）

4　討論

抑郁癥的機制復雜，涉及單胺類神經遞質及其受體、神經內分泌、細胞分子等多種假說［1］。抑郁屬中醫學中“郁證”、“臟躁”、“百合病”、“癲狂”、“失眠”、“健忘”等多病證范疇。中醫辨證常分為肝郁脾虛、肝郁氣滯、腎陽不足、陰陽兩虛等多種證型，其中肝郁氣滯證的患者平均年齡最小而腎陽不足證患者平均年齡最大，且具差異性［2］。可見腎陽虛是抑郁癥常見證型之一，特別是老年抑郁癥發病的重要病機，甚至有學者認為是核心病機［3-5］?！肚Ы鹨矸健吩疲骸叭四晡迨陨?，陽氣日衰，損與日至，心力漸退……萬事冷落，心無聊賴，健忘嗔怒，性情變異?！泵鞔_指出老年陽虛是產生消極、悲觀情緒的原因之一，陽主升動，而抑郁癥的臨床表現多屬陽氣不足導致的升動無力的表現。腎中藏一身之元陽，主生髓，虛則致髓海不足，元神失養，不能振奮精神而發病?！额愖C制裁》指出：“腎之精華上升于腦，精能生氣，氣能生神，神定氣清?！?/p>

補虛藥、安神藥等是中醫治療抑郁癥的常用藥物，其中補虛藥使用頻率最高［6］，通過增加單胺類神經遞質水平、對抗谷氨酸作用、保護神經元等多途徑發揮抗抑郁、鎮靜作用［7-10］。杜仲、續斷是中醫臨床常用的補腎陽藥物。杜仲主要含有木脂素類、苯丙素類、環烯醚萜類、黃酮類、多糖等，具有降血壓、抗骨質疏松、抗氧化、神經保護、鎮靜等藥理作用［11-12］。續斷中主要含有三萜及其苷類化合物、環烯醚萜苷類化合物、生物堿類化合物和揮發油類等化學成分［13］，具有抗骨質疏松、抗氧化、神經保護、提高實驗動物學習記憶能力等作用［14-16］。

抑郁癥動物模型研究也較多，動物模型建立主要包括改變生物學因素、社會心理因素及基因型等多種方法［17］，而SAMP6小鼠為自發的快速老化骨質疏松模型。有學者對SAMP6小鼠行為學方面進行研究發現，SAMP6小鼠具有自發活動增強、焦慮、抑郁等行為改變［18-19］。本實驗中SAMP6小鼠強迫游泳和懸尾實驗中不動時間均顯著高于正常老化鼠SAMR1組，杜仲丸可以顯著降低SAMP6小鼠強迫游泳和小鼠懸尾實驗的不動時間，具有抗抑郁作用，而單味使用的杜仲、續斷抗抑郁效果不明顯。本研究為進一步研究杜仲丸的配伍及抗抑郁機制奠定了實驗基礎。

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Study on the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions

DUAN Wei-hua，YU Jia-hui，GAO Xiu-mei
（Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China）

［Objective］To study the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions．［Methods］Three months old SAMP6 mice and their normal control mice SAMR1 were enrolled in this study.The SAMP6 mice were treated with high and low dose of Duzhongwan，respectively，contrasting with Duzhong and Xuduan during 12 weeks.At 1h after the administration（ig），the open field test（OFT），the tail suspension test（TST）and the forced swimming test（FST）were used to observe the antidepressant effect of Duzhongwan with different proportions．［Results］The immobility time of SAMP6 mice in Duzhongwan low dose group could significantly reduce in FST and TST，compared with those in the control group（P＜0.05 or P＜0.01）.［Conclusion］The results suggested that Duzhongwan performed antidepressant effect.

Duzhongwan；depression；forced swimming test；tail suspension test；SAMP6 mice

R285.5

A

1673－9043（2015）01－0034-03

國家科技重大專項“孵化基地”項目（2013ZX094 01004）；天津市中醫藥管理局中醫中西醫結合科研項目（13109）。

段衛華（1973-），博士，講師，主要從事中藥藥理研究。

高秀梅，E-mail：yanjiuyuanbangongshi@gmail.com。

（2014-08-24）