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優良廣西莪術株系篩選及其揮發油成分比較

2015-10-20 01:12:33楊妮等
江蘇農業科學 2015年9期

楊妮等

摘要:對150個廣西莪術株系單株產量及揮發油含量進行考察,選取產量和揮發油含量較高的廣西莪術株系,并比較篩選單株揮發油化學成分。結果共篩選出的12個優質廣西莪術株系,總共鑒定出35種化學成分,其存在共有揮發油成分,又存在非共有揮發油成分。玉13/C106、玉14/C29、玉18/B97的株質量和揮發油主要化學物質含量均較高,為優質的廣西莪術品系。

關鍵詞:廣西莪術;種質評價;優良株系;揮化油成分

中圖分類號: R284.1文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2015)09-0283-02

莪術為姜科植物蓬莪術(Curcuma phaeocaulis Val.)、廣西莪術(C. kwangsiensis S.G. Lee et C.F.Liang)或溫郁金(C. wenyujin Y.H.Chen et C.Ling)的干燥根莖,主產于廣西、四川、浙江、江西等地。莪術性味辛、苦、溫,歸肝、脾經,具行氣破血、消積止痛功效[1],臨床用于治療癓瘕痞塊、瘀血經閉、食積脹痛、早期宮頸癌等癥。莪術主要含莪術油和姜黃素[2],現代藥理研究表明莪術油是抗癌的有效成分[3]。王建研究發現,不同種質類型廣西莪術揮發油化學成分和組分相對含量差異較大,揮發油物質表現出豐富的多樣性[4]。近年來,廣西莪術的研究多集中在藥理作用、臨床應用、成分分析等方面,在種質評價及品種選育方面的研究較少。本研究通過對單株產量和揮發油的成分進行分析,比較單株間差異性,為選育優質的廣西莪術新品種提供科學依據。

1材料與方法

1.1植物材料

試驗材料為不同類型廣西莪術單株150株,均采自廣西省南寧市仙葫種植基地,經廣西中醫藥大學王建教授鑒定均為廣西莪術。將不同種質的廣西莪術種植在同一基地,管理條件一致。

1.2優良單株的篩選

選取莪術鮮質量和揮發油得率為主要指標對優良單株進行篩選。鮮質量測定于莪術藥材采收后,取所有莪術根莖(去除須根及塊根),清凈泥沙稍晾干,稱鮮質量。

分別取廣西莪術當選株系的根莖洗凈、吹干,稱取100 g切碎,放入1 000 mL圓底燒瓶加蒸餾水約500 mL,按2010年版《中國藥典》一部附錄XD揮發油測定法,水蒸氣蒸餾法回流提取5 h,靜置分層后讀取揮發油體積,并計算藥材的得油率。

1.3揮發油成分測定

取0.05 mL揮發油,樣品中加入甲醇(色譜純)溶解并稀釋至1.5 mL,再加入適量的無水硫酸鈉,除去樣品中的水分,10 000 r/min離心10 min,上層莪術揮發油即為供試品溶液。

采用GC-MS測定揮發油成分,選用HP-5MS(30 m×320 μm×0.25 μm)色譜柱。升溫程序:初始溫度為60 ℃,以10 ℃/min升溫至100 ℃,再以4 ℃/min升溫至108 ℃,保持2 min,以4 ℃/min升溫至156 ℃,保持10 min,以20 ℃/min升溫至280 ℃,保持2 min;汽化室溫度250 ℃,檢測器溫度280 ℃;載氣為高純He,載氣流量1.5 mL/min;進樣量1 μL分流比50 ∶1;溶劑延遲3 min。

質譜條件:電子轟擊(EI)電離源,電子能量70 eV,離子源溫度230 ℃,四級桿溫度150 ℃;掃描質量范圍m/z 45~500,圖譜庫為NIST08.L。

2結果與分析

2.1優良單株的篩選

從150個株系中選取單株產量400 g以上,每100 g藥材(鮮品)含揮發油不少于0.5 mL的株系12個(表1)。由表1可見,單株藥材質量最高的是玉10/A12,達到838.0 g,其次是玉13/C106(636.0 g),玉17/B61和玉1/C59質量都在 600.0 g 以上。得油率最高的是玉18/B97,達1.41%,顏色為紫褐色;其次是玉14/C29(0.91%),淡紫色,其他單株在050%~0.60%之間,顏色為淺黃色到黃色。

2.2揮發油成分

將12個不同種質類型廣西莪術揮發油按上述GC-MS條件檢測,得到總離子流各主要色譜峰的質譜圖,選用NIST08.L標準譜庫,匹配度SI>90進行檢索,結合有關文獻進行人工檢索和解析,確認各化合物,總共鑒定了35種主要化合物(表2)。12株廣西莪術揮發油的共有成分為樟腦、β-欖香烯、莪術烯、龍腦,大多單株含有蒎烯、桉樹腦,而玉δ-杜松烯、對傘花烴、莎草烯等成分只在少數材料測得。

通過HPMSD工作站數據處理系統,按峰面積歸一化法計算各化合物在揮發油中的相對百分含量,結果見表2。從

表1不同種質類型廣西莪術揮發油出油率及顏色

序號株系編號單株藥材質量

(g)得油率

(%)揮發油顏色1玉18/B97416.51.41紫褐2玉14/C29426.00.91淡紫3玉1/C59600.00.60淺黃4玉17/B61609.00.58黃色5玉4/B81586.00.52淺黃6玉13/C106636.00.52黃色7廣城1415.50.51黃色8玉6/C84490.00.51淺黃9C16590.00.51黃色10C105429.00.50淺黃11玉22498.50.50淺黃12玉10/A12838.00.50淺黃

表2可以看出,單株間不同成分含量存在很大差異。單株玉18/B97的β-蒎烯峰面積比值達21.61,而其他單株比值則在0.17~0.85之間。與之相反,在單株玉18/B97中未測定到桉樹腦含量,而其他11個株系中,檢出峰面積比值高達8.13~26.87。新莪術二酮僅在玉13/C106中檢出,峰面積比值高達34.44,莪術二酮則僅在玉18/B97和玉14/C29中檢出,相對峰面積也高達34.76和25.13。3結論與討論

選取的12個廣西莪術優良株系揮發油共有成分樟腦、β-欖香烯、莪術烯、龍腦,含量差異較大,各樣品色譜圖的有效成分出峰時間基本相同,但因所含的成分各不相同,每個樣品的色譜峰均有差異。有效成分新莪術二酮僅在玉13/C106中檢出,相對含量達到34.44%。而另一有效成分莪術二酮僅在玉14/C29、玉18/B97中能檢測到,相對含量分別為2513%、34.76%。

本試驗檢測結果顯示,有效成分莪術烯、莪術二酮、β-欖香烯都能檢測到,而重要有效化學成分吉馬酮, 依據匹表2不同種質類型廣西莪術揮發油成分分析

序號分子式化合物樣品相對峰面積比值玉

配度SI>90進行檢索,并未檢索到吉馬酮。在整個檢索工作中,吉馬酮匹配度僅在到60左右,因此試驗中未能檢測到吉馬酮的原因極可能是此成分已揮發。揮發油是極易揮發的物質,在揮發油提取后,用離心管保存時未能及時封口,或未能及時放入冰箱保存;提取揮發油的時間與進行GC-MS分析的時間相差較大,揮發油在存放時間較長等均會造成該物質揮發。

根據以上結果分析,綜合單株產量、揮發油得油率、有效成分相對含量3個方面考慮,玉13/C106、玉14/C29、玉18/B97在所有樣品中品質較優,該分析結果可以為后期選育優良種質試驗提供依據。

參考文獻:

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典:一部[M]. 北京:中國醫藥科技出版社,2010:257-258.

[2]展曉日,曾昭武,孟凡莉,等. 莪術油藥學研究進展[J]. 杭州師范大學學報:自然科學版,2011,10(5):454-458.

[3]秦鐵城,文海斌,陳碾,等. 莪術醇抗腫瘤研究進展[J]. 現代中西醫結合雜志,2013,22(18):2043-2045.

[4]王建,趙應學. 不同種質類型廣西莪術揮發油成分多樣性研究[J]. 藥物分析雜志,2010,30(6):1072-1075.

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