層粘連蛋白及其受體的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系

劉 楊　劉乃富

（ 1 山東省腫瘤防治研究院，山東 濟(jì)南 250117；2 濟(jì)南大學(xué)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250022；3 山東省兗礦集團(tuán)總醫(yī)院，山東 濟(jì)寧 273500）

層粘連蛋白及其受體的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系

劉 楊1，2，3劉乃富1

（ 1 山東省腫瘤防治研究院，山東 濟(jì)南 250117；2 濟(jì)南大學(xué)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250022；3 山東省兗礦集團(tuán)總醫(yī)院，山東 濟(jì)寧 273500）

目的檢測(cè)層粘連蛋白（laminin，LN）及其受體（laminin receptor，LN-R）（選擇受體67LR）在早期子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)的相關(guān)性。方法用免疫組織化學(xué)技術(shù)和圖像分析法檢測(cè)40例早期子宮內(nèi)膜癌（其中包括子宮內(nèi)膜癌30例（75.0%）、10例正常內(nèi)膜例（15.0%）組織中LN和其LN-R的表達(dá)。結(jié)果LN及LN-R的陽(yáng)性表達(dá)在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌中有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.001）。結(jié)論67LR表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌有正相關(guān)性，LN表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌有負(fù)相關(guān)性。層粘連蛋白LN和層粘連蛋白受體LN-R在子宮內(nèi)膜癌中有望作為判斷子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的參考指標(biāo)之一。

子宮內(nèi)膜癌；預(yù)后；層粘連蛋白；層粘連蛋白受體

子宮內(nèi)膜癌嚴(yán)重威脅婦女健康，其浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力構(gòu)成了惡性行為的基礎(chǔ)，是嚴(yán)重并發(fā)癥以至死亡的主要原因。研究表明，基底膜成分層粘連蛋白（laminin，LN）及67 kDa層粘連蛋白受體（67KDa laminin receptor，LN-R）的相互作用與惡性腫瘤細(xì)胞的浸神經(jīng)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及大部分腫瘤細(xì)胞表面。LN-R不僅促進(jìn)細(xì)胞在LN基質(zhì)上黏附、趨化性遷移及分泌，同時(shí)還參與細(xì)胞間相互識(shí)別及細(xì)胞內(nèi)外信息的傳遞。各種不同類型的細(xì)胞中，LN-R的信使核糖核酸（mRNA）的含量同細(xì)胞表面LN-R的數(shù)量呈正相關(guān)性。LN-R的表達(dá)調(diào)節(jié)可能在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯和翻譯后加工、修飾等多個(gè)水平上發(fā)揮作用。

表1　LN及LN-R在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌的分布

3.4層粘連蛋白受體在婦科腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用：層粘連蛋白受體是存在于細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，不同層粘連蛋白受體在腫瘤組織的表達(dá)不同，是腫瘤細(xì)胞與基膜中層粘連蛋白黏附的橋梁，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。此外LN-R對(duì)于腫瘤的血管形成以及促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移意義重大。大量的實(shí)驗(yàn)證明LN-R的表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)，特別是上皮細(xì)胞腫瘤。如乳腺癌、腸癌、卵巢癌等都被發(fā)現(xiàn)67LR的存在與腫瘤的階段有關(guān)。其表達(dá)還與癌的預(yù)后有關(guān)。

3.5LN與其受體LN-R（67LR）與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系：子宮內(nèi)膜癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力構(gòu)成了惡性行為的基礎(chǔ)，是嚴(yán)重并發(fā)癥以至死亡的主要原因。現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展己明確腫瘤的演進(jìn)是由多步驟組成的復(fù)雜過(guò)程。層粘連蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）中的一種非膠原糖蛋白，它通過(guò)與上皮細(xì)胞表面的多種受體相結(jié)合使上皮細(xì)胞在基底膜上定向附著，是細(xì)胞外基質(zhì)基膜的主要構(gòu)成成分。具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、生長(zhǎng)、黏附和移行等多種功能，而這些正是腫瘤細(xì)胞實(shí)現(xiàn)浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移所需的生物學(xué)特性［2-8］。層粘連蛋白受體是存在于細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，不同層粘連蛋白受體在腫瘤組織的表達(dá)不同，是腫瘤細(xì)胞與基膜中層粘連蛋白黏附的橋梁，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

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1　材料與方法

1.1研究資料：收集2003年～2009年兗礦集團(tuán)總醫(yī)院子宮內(nèi)膜癌婦科手術(shù)標(biāo)本40例，分成正常子宮組10例，子宮內(nèi)膜癌組30例。用10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，所有標(biāo)本均經(jīng)過(guò)病理組織學(xué)檢查并確定，全部病例術(shù)前未行任何放化療。

1.2方法。免疫組化法：試劑盒購(gòu)自武漢博士德公司，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。結(jié)果判定為盲法觀察和計(jì)數(shù)。

1.3結(jié)果判定：LN陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為子宮內(nèi)膜基底膜出現(xiàn)棕黃色染色，根據(jù)陽(yáng)性染色積數(shù)積分：無(wú)細(xì)胞顯色為0；＜25%細(xì)胞顯色1分；25%～50%細(xì)胞顯色2分；＞50%細(xì)胞顯色3分；根據(jù)細(xì)胞染色積數(shù)積分：不顯色或顯色不清0分；淺黃色1分；棕黃色2分；深褐色3分。二項(xiàng)乘積0～1分陰性（-）；2～3分弱陽(yáng)性（+）；4～5分中度陽(yáng)性（++）；＞5分強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。LN-R陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：染色陽(yáng)性為棕黃色，細(xì)胞數(shù)＜30%陰性，細(xì)胞數(shù)≥30%陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)方法：用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用多個(gè)獨(dú)立樣本比較的秩和檢驗(yàn)，Spearman相關(guān)分析，以P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　果

子宮內(nèi)膜癌LN及67LR表達(dá)關(guān)系的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：腺癌細(xì)胞（EC）中LN及67LR陰性，間質(zhì)細(xì)胞（SC）中LN陽(yáng)性常以正常及良性病變?yōu)橹鳎欢啄ぃ˙M）缺損，LN及67LR在EC中呈陽(yáng)性，SC中LN陰性以惡性病變?yōu)橹鳌Ｍ茰y(cè)67LR表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌有正相關(guān)性，LN表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌有負(fù)相關(guān)性；LN和LN-R的表達(dá)間存在內(nèi)源性的相互調(diào)節(jié)關(guān)系。見(jiàn)表1。

3　討　論

3.1LN生物學(xué)特性：LN是基底膜的非膠原性糖蛋白，由不同的多肽鏈構(gòu)成不對(duì)稱的“+”字形結(jié)構(gòu)，包括3條短臂和1條長(zhǎng)臂，各臂的末端均呈球狀。LN的四臂結(jié)構(gòu)能使分子的4個(gè)末端在較大距離外伸展開，便于同大分子物質(zhì)及不同方向的細(xì)胞表面和基質(zhì)成分接觸，具有重要的生物學(xué)意義。LN的生物學(xué)功能主要有3個(gè)方面：細(xì)胞與基質(zhì)黏著的介質(zhì)；連接基質(zhì)中大分子成分，與LN型膠原結(jié)合形成基膜骨架；調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附、生長(zhǎng)、分化和移動(dòng)。

3.2LN與腫瘤的關(guān)系：許多實(shí)驗(yàn)證明高度轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞對(duì)LN具有高度親和力，LN能特異性介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞黏附于基質(zhì)上并促進(jìn)蛋白水解酶的分泌，造成基膜的崩解、破壞。LN表達(dá)降低的腫瘤浸潤(rùn)力和轉(zhuǎn)移力強(qiáng)于LN表達(dá)正常的腫瘤。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究表明，LN表達(dá)的降低與腫瘤惡性表型有很大的相關(guān)性。癌細(xì)胞分化好的LN表達(dá)水平較高，低分化或末分化的LN表達(dá)水平較低或完全缺如。綜上所述腫瘤基膜LN表達(dá)可視為腫瘤惡性程度的判斷指標(biāo)之一，尤其是在上皮性腫瘤。

3.3LN-R的生物學(xué)特性：層粘連蛋白受體是存在于許多不同細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白。又稱層粘連蛋白結(jié)合蛋白（laminin-binding proteins，LBPs）目前分為3類，即糖蛋白類、糖類、整合素類。67LR是最早發(fā)現(xiàn)且研究得最多的一種LN-R，廣泛存在于上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、周圍

R737.33

B

1671-8194（2015）11-0160-02