異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態性分析與皮膚病學研究

張作軍

（遼陽市中心醫院皮膚科，遼寧 遼陽 111000）

異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態性分析與皮膚病學研究

張作軍

（遼陽市中心醫院皮膚科，遼寧 遼陽 111000）

目的 研究分析異位性皮炎與HLA-DRB基因多態性的相關性與臨床意義。方法 用引物序列特異性聚合酶鏈反應（PCR-SSP）擴增HLA-DR3等位基因。結果 HLA-DRB基因頻率在異位性皮炎組為14.89%，對照組為3.75%（P＜0.01）。而DR6基礎頻率在患者組為0，對照組為8.75%（P＜0.01），異位性皮炎組較對照組明顯為低。結論 DR3基因位點是遼寧遼陽地區患者異位皮炎的易感基礎，DR6基因點是遼寧遼陽地區患者異位皮炎的抗性基因。

異位性皮炎；HLA-DRB

異位性皮炎（atopic dermatitis，AD）屬Ⅰ型變態反應，約有48%～79%的患者有家庭異位性疾病史，可能為多基因遺傳。HLA基因是目前已知的最具多態性的基因，它在同種器官移植排斥反應，調節機體對抗原的免疫應答能力，機體對部分疾病的易感性等方面發揮重要作用。本文利用分子生物學技術，對異位性皮炎患者HLA-DRB基因多態性進行了分析，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：2010年1月至2013年12月本院皮膚科門診患者，均為遼寧遼陽地區患者，男46例，女48例，平均年齡（26.89±17.78）歲，平均病程（10.98±5.1）年。160例健康對照組為健康獻血者、查體者。男50例，女110例，平均年齡（44.96±5.2）歲。異位性皮炎的診斷符合1994年美國Williams等提出的診斷標準［1-3］。

1.2HLA-DRB基因檢測：采用低滲法分離外周血白細胞，標準的酚-氯仿法提取基因組DNA，PCR-SSP（seqence-specific Primer）擴增HLA-DRB等位基因。依據第十三屆國際HLA Workshop會議確定的HLA-DRB基因核苷酸序列，設計出特異性引物共18對。以Pbr322/Msp I DNA Markers作為分子質量對照，通過凝膠成像儀（UVI英國）觀察結果并鑒定型別。

1.3統計學處理：HLA-DRB等位基因兩組之間進行頻率分析，HLADRB各基因亞型采用直接計數法。HLA-DRB1基因頻率=陽性基因數/樣本數×2，HLA-DR51、DR52、DR53陽性率=陽性基因數/樣本數。兩組HLA-DRB基因頻率間的比較采用校正的四格表卡方檢驗，并計算出相對危險度（relative risk，RR）。

2　結 果

HLA-DR3基因頻率患者組為14.89%，對照組為3.75%，經統計學分析P＜0.01。而DR6基因頻率在患者組為0，對照組為8.75%，P＜0.01，結果見表1。

3　討 論

HLA分子的功能是結合經抗原遞呈加工的內源或外源抗原肽并遞呈給T細胞。HLA分子抗原結合凹槽中序列基序是由每個等位基因編碼的，如果等位基因的多態性改變了肽結合槽的結構，那么它影響了MHC分子、肽和T細胞的相互作用，從而控制了對外源性乃至自身抗原免疫應答反應的特異性，使得不同的HLA基因型對疾病的易感性不同。本研究結果表明：HLA-DR3基因頻率在異位性皮炎組較對照組增高（14.89%：3.75%，P＜0.01），有顯著性差異。我們推測DR3基因位點是遼寧遼陽地區異位性皮炎的易感基因。而DR6基因頻率在患者組為0，在對照組為8.75%（P＜0.01），推測此基因位點是遼寧遼陽地區異位性皮炎的抗性基因。

不同的HLA-Ⅱ基因產物識別不同的抗原分子的特殊表位，進而激發機體的免疫應答反應引起疾病這一假設，目前已被證實［4-9］。因為遺傳背景和環境因素存在非常大的差異，所以選取病例也有所差別。因此其結果可能不大一致。Saeki等［9-13］報道異位性皮炎患者HLA-DR6（13）等位基因頻率高于正常對照組。因此，不同地區不同種族的HLA基因型對疾病的易感性不同。

表1　HLA-DRB等位基因在患者及健康對照組之間的頻率分布

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1671-8194（2015）09-0186-02