某地區男性尖銳濕疣患者人乳頭瘤病毒基因型別的分析

姚學群廖曉敏唐 勇鄭雪蓮曾慧智

（1 懷化市第一人民醫院皮膚科，湖南 懷化 418000；2懷化市第一人民醫院檢驗科，湖南 懷化 418000）

某地區男性尖銳濕疣患者人乳頭瘤病毒基因型別的分析

姚學群1廖曉敏2唐 勇1鄭雪蓮1曾慧智1

（1 懷化市第一人民醫院皮膚科，湖南 懷化 418000；2懷化市第一人民醫院檢驗科，湖南 懷化 418000）

目的 了解懷化地區男性尖銳濕疣患者感染人乳頭瘤病毒（HPV）基因型分布情況。方法 采用PCR-反向點雜交法對該地區2013年1月至2014年12月期間120例男性尖銳濕疣患者進行HPV基因分型檢測。結果 120例男性尖銳濕疣患者中83例（69.17%）檢出HPV陽性，檢出率最高依次為HPV-6、16、52、11型。男性尖銳濕疣患者中以21～30歲及31～40歲年齡段HPV感染陽性率較高。HPV單一感染率60.24%，多重感染率39.76%，多重感染以高低危混合型為主。結論 懷化地區男性尖銳濕疣患者皮損主要HPV基因型為6、16、52及11型，21～40歲為易感人群，多重感染以高低危混合型為主，HPV分型檢測在男性尖銳濕疣的臨床診斷和預后方面具有重要意義。

人乳頭瘤病毒；尖銳濕疣；男性；基因型

尖銳濕疣是由人類乳頭瘤病毒（HPV）感染引起的一種性傳播疾病，國外發病率占性病的第2位，國內2002年報道發病率為12.94/10萬［1］，近年來因尖銳濕疣發病率逐年上升而日益受到關注。引起尖銳濕疣的病毒主要是HPV-6、11、16、18等型。目前已明確HPV-16、18、45、56型為最常見的女性致宮頸癌高危型。HPV在男性的感染主要以亞臨床感染為主，導致在人群中存在大量的無癥狀病毒攜帶者。目前有關男性HPV型別的特異性的研究不多，了解男性尖銳濕疣患者的HPV感染及其型別分布對該病的治療及愈后監測具有重要意義，尤其是對于監測其性伴罹患宮頸癌的危險性有意義［2］。本研究擬通過對2013年～2014年懷化市第一人民醫院性病科就診的120例確診尖銳濕疣男性患者的HPV基因型的檢測，了解懷化市男性尖銳濕疣HPV的基因型流行型別及分布狀況。

1 材料與方法

1.1 標本選擇：隨機選取2013年1月至2014年12月在懷化市第一人民醫院皮膚性病科就診的男性尖銳濕疣（CA）患者120例。受檢者年齡

16～61歲，平均年齡35.15歲。患者均經我科主治醫師以上確診，具有典型尖銳濕疣臨床癥狀，醋酸白試驗陽性。尖銳濕疣疣體生長在外生殖器者89例，肛周者23例，尿道口8例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集：患者疣體部位周圍75%醫用酒精消毒2次，再用注射用水涂濕疣體，用男性拭子稍用力刮拭疣體，尿道口及肛周予以專用毛刷單方向旋轉毛刷頭4～5周停留片刻，立即放入裝有2 mL細胞保存液的保存管中，沿刷柄折痕將頸刷折斷，旋緊管蓋，放入培養液中送檢。

1.2.2 主要儀器德國羅氏熒光定量PCR擴增儀、深圳亞能生物技術有限公司生產的人乳頭瘤病毒基因分型（23型）檢測試劑盒。

1.2.3 檢測方法：嚴格按照試劑盒說明書進行PCR-反向點雜交法檢測。共檢測23種HPV基因亞型，包括18個高危型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83型，5個低危型：6、11、42、43、81型。本實驗的基本原理是采用PCR體外擴增和DNA反向點雜交相結合的HPV基因分型檢測技術。利用HPV的基因特點設計特異引物，可以擴增出23種HPV基因型的目的片段，再將擴增產物與固定在膜條上的包括18種高危型和5種低危型在內的分型探針進行雜交，依據雜交信號的有無來判斷是否有這些HPV基因型的感染。1.3 統計學處理：應用SPSS17.0軟件進行統計分析，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 檢測結果：120例男性尖銳濕疣患者皮損HPV陽性率69.17%（83/120），83例患者中，23種HPV型別，檢出21種型別，僅HPV82及HPV83型未檢出（圖1）。感染率自高至低依次為HPV-6（27例，22.5%）、HPV-16（16例，13.33%）、HPV-52（13例，10.83%）、HPV-11（11例，9.17%）、HPV-58（10例，8.33%）、HPV-68（10例，8.33%）、HPV-33（9例，7.50%）、HPV-56（9例，7.50%），余13種基因型共35例。其中仍以HPV-6，16，52，11型為主。多重感染按HPV型別多次計數。

2.2 年齡與HPV的關系：120例尖銳濕疣患者中83例HPV分型陽性年齡分布高峰在21～40歲，21～30歲組（29/120，24.17%）及31～40歲組（32/120，26.67%）HPV陽性率高于其他三組，差異有統計學意義（P＜0.05），21～40歲年齡組高危型HPV感染的較其他年齡組多。見表1。

圖1 83例男性尖銳濕疣患者HPV陽性基因型分布情況

表1 83例男性尖銳濕疣患者HPV陽性年齡段分布情況

2.3 單一感染與多重感染：83例男性尖銳濕疣HPV陽性患者中，單一感染50例（60.24%），兩重及以上感染占33例（39.76%），單一感染以HPV6（12/50，24.0%），HPV16（6/50，12.0%），HPV11（4/50，8.0%），HPV68（4/50，8.0%）為主，余24例分布于其他13型。

33例HPV多重感染中，以高低危混合型（25/33，75.76%）為主，兩重感染20例（24.10%），除2例為高危型及1例低危型外，均為高低危混合型，三重感染5例（6.02%），除1例為高低危混合型，其余4例均為高危型感染，4重以上感染8例（9.63%），除1例為高危型，其余均為高低危混合型。5組比較差異有統計學意義（P＜0.05），隨著感染重數增加，高低危混合型感染病例增加（表2）。

表2 83例男性尖銳濕疣患者HPV陽性多重感染分布情況

3 討 論

尖銳濕疣是由HPV病毒所致的一種主要發生在男女外生殖器和肛門部位的皮膚黏膜疾病。主要通過性行為傳染，復發率高，治療困難。既往尖銳濕疣的診斷主要是依靠臨床觀察，皮損不典型病例可配合組織病理檢查及HPV基因檢測。HPV基因分型檢測的應用對于診斷處于潛伏期的HPV攜帶者，及尖銳濕疣的早期診斷，早期防治有很大的臨床價值。大量流行病學研究認為75%的性活躍人群在其一生中都有可能感染HPV［3］，而幾乎所有的性活躍人群都存在感染HPV并進一步發展成為HPV相關疾病的危險。臨床上有大量研究表明，HPV的感染是女性宮頸癌的重要致病因素。由于取材不易及臨床上欠重視，而對于男性HPV與相關疾病的研究較少。國外一些流行病學調查發現配偶患有宮頸癌的男性陰莖HPV-DNA陽性率要遠高于對照組，夫妻間的一致率為66.4%［4］。HPV的致病性與其型別密切相關，因此對尖銳濕疣患者的HPV分型檢測及評價具有重要的臨床意義。

本研究120例男性尖銳濕疣患者中，HPV陽性率69.17%，23種HPV型別檢出21種，僅HPV82與HPV83型未檢出。感染率較高的前四種型別為HPV6、16、52、11，與國內蔣衛平等文獻報道一致［5］，但較譚娟［6］等報道尖銳濕疣患者皮損中HPV檢出率為99.00%偏低。考慮原因部分為所檢測的23種HPV基因型別之外的其他HPV型別感染未檢出，同時有相關研究［7-8］指出對健康人群或高危人群進行外生殖器及精液、尿道HPV檢測，龜頭、包皮及冠狀溝、陰莖體、尿道、精液等部位都依次檢出不同數值的陽性比率，所以HPV檢測差異與選擇人群、取材部位及方法都有一定的差別。其結果可能會存在一定的差異，以及與HPV感染同時還存在明顯的地域差異性相關。

研究結果顯示120例男性尖銳濕疣患者HPV感染率不同年齡段顯著不同，以21～30歲及31～40歲組HPV陽性感染率高，同時該年齡段高危型感染較16～20歲組及41～50歲組、50歲以上組高，可能與青中年男性為性活躍人群，接觸性伴多，導致其皮損中檢測的高危型別感染偏多。提示該年齡段人群HPV傳染性伴的危險性增加，需加強中青年人群宣教及體檢，對高危人群預防HPV感染及早期發現有重要意義。

83例男性尖銳濕疣HPV陽性患者中，單一感染率60.24%，兩重及以上感染率39.76%。單一感染以HPV6（24.0%），HPV16（12.0%），HPV11（8.0%），HPV68（8.0%）為主，說明本地區HPV陽性以單一型感染為主，與國內報道一致［9］。多重感染中，發現了二重感染至七重感染等5種類型，且以高低危混合感染為主。33例多重感染病例中除7例高危型及1例低危型外，余25例（75.76%）均為高低危混合型HPV感染，且隨感染重數的增加，高低危混合感染病例增加。有報道指出混合感染的HPV病毒載量高于單型HPV感染，癌變相關風險大， 是宮頸癌發生的一個重要危險因素，并且致病力較強，病變發展較快，治療較頑固，復發率較高［10］。HPV檢測對于尖銳濕疣的早期診斷、及時治療及復發觀察有重要意義。本地區男性尖銳濕疣患者多重HPV感染以高低危混合型（75.76%）及高危型（21.21%）居多，相對國內［5］其他報道偏高。考慮與各地區的研究對象、生活習俗、衛生狀況、性行為方式、檢測方法等差異有關。HPV具有強烈的嗜上皮性，可以引起被感染細胞的顯著增殖甚至惡性轉化。有研究表明，高危型HPV的感染還與男性生殖器惡性腫瘤的發生密切相關［2］。這表明雙重及多重HPV感染更應被重視，在男性尖銳濕疣及高危人群中，高度重視HPV分型的檢測，以便早發現高危型HPV感染者，定期隨訪，對于減少疾病復發及預防傳播、早期干預HPV相關腫瘤性疾病發生均有重大意義。

［1］ 張學軍.皮膚性病學［M］.8版.北京:人民衛生出版社，2013:231-232.

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［5］ 蔣衛平，張嵩韜.浙江麗水市男性肛門生殖器疣患者人乳頭瘤病毒基因型研究［J］.中華皮膚科雜志，2014，47（4）:736-737.

［6］ 譚娟，徐順明.男性尖銳濕疣皮損HPV 基因芯片型別分析［J］.中國皮膚性病學雜志，2012，26（3）:196-199.

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［8］ 阮建波，林振仁，朱清，等.門診高危男性1206例人乳頭瘤病毒基因型的檢測［J］.中國皮膚性病學雜志，2012，26（7）:617-618.

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Analysis of HPV Genotypes in the Male Condyloma Acuminatum（CA）Skin Lesions in A District

YAO Xue-qun1， LIAO Xiao-min2， TANG Yong1， ZHENG Xue-lian1， ZENG Hui-zhi1

（1 Department of Dermatology， The First People's Hospital of Huaihua， Huaihua 418000， China； 2 Department of Clinical Laboratory， The First People's Hospital of Huaihua， Huaihua 418000， China）

Objective To investigate the distribution of human papilloma virus（HPV）genotypes in male patients with condyloma acuminate in huaihua city. Methods 120 tissue specimens were tested by PCR reverse dot blot’ to obtain the distribution of HPV genotypes from January 2013 to December 2014. Results HPV DNA was detected in 83 cases （69.17%）of the 120 cases patients. The most frequent genotypes were HPV-6， 16， 52 and 11 respectively. The peak ages of infection were mainly distributed from 21-30 years old and 31-40 years old. Single HPV genotypes infection rate was 60.24%， and multiple HPV genotypes infection rate reached 39.76%. Multiple HPV genotypes infections were concentrated in high and low mixed infection. Conclusion HPV6， 16， 11， 52 were the major positive HPV genotypes in male CA tissue specimens in Huaihua region， and the people between 20-40 years old are the population at high risk for HPV infection， multiple HPV genotypes infections were concentrated in high and low mixed infection， the genotyping of HPV plays an important role in the clinical diagnosis and prognosis of CA.［Key words］Human papilloma virus； Condyloma acuminatum； Male； Genotype

R752.5

B

1671-8194（2015）13-0017-02