11例溫自身抗體患者血清學檢查結果的分析

鐘俊杰李仲廷蘇慧蘭李 交夏全友廖 忠

（1 佛山市順德區新容奇醫院，廣東 佛山 528303；2 佛山市順德區中心血站，廣東 佛山 528300；3 佛山市順德區桂洲醫院，廣東 佛山 528305）

11例溫自身抗體患者血清學檢查結果的分析

鐘俊杰1李仲廷1蘇慧蘭1李 交2夏全友2廖 忠3

（1 佛山市順德區新容奇醫院，廣東 佛山 528303；2 佛山市順德區中心血站，廣東 佛山 528300；3 佛山市順德區桂洲醫院，廣東 佛山 528305）

目的 掌握溫自身抗體血清學特點，尋找合理有效的血清學檢測方法。方法 對11例溫自身抗體輸血前血清學檢查結果進行分析，建立ABO正反定型不符，排查自身抗體中混合意外抗體的方法。結果 檢出2例ABO正反定型不符，5例存在意外抗體，其中1例不能鑒定特異性。結論 酸放散實驗可降低直抗強陽性對ABO正定型的干擾，自身吸收實驗可降低自身抗體對ABO反定型和意外抗體檢測的干擾，三級保障體系可應用于溫自身抗體患者配血。

溫抗體；自身；直接抗人球蛋白實驗；血清學

溫自身抗體可以凝集所有紅細胞，屬于“不相合”配血，常規配血方法不能排除干擾。掌握合適的實驗方法可有效提高疑難配血技能，增加輸血安全性。筆者總結本院2012年～2014年度11例溫自身抗體患者配血經驗，嘗試建立溫自身抗體的血清學檢測方法，為進一步配血實驗做好準備。

1 材料與方法

1.1 臨床資料：2012年1月至2014年12月本院11例溫自身抗體患者，9～73歲，男性5例，女性6例，均有輸血史。

1.2 試劑與儀器：①抗A、抗B、抗D血清、抗體篩選細胞、抗體鑒定細胞：上海血液生物醫藥有限責任公司。②抗人球卡、Rh分型卡、卡式專用離心機：達亞美公司。③聚凝胺試劑：Baso公司。④酸放散Elu-Kit試劑：Gamma Biologicals公司。⑤A型、B型紅細胞試劑：自制。

1.3 血清學檢測方法［1-2］：①鹽水法ABO正反定型，RhD血型鑒定。②Rh分型實驗：紅細胞用生理鹽水配成1%懸液，取50 μL加入對應凝膠卡中，置專用離心機直接離心。③抗體篩選，抗體鑒定實驗：凝膠卡中加入50 μL篩選細胞或鑒定細胞，再加入25 μL患者血清或放散液，37 ℃孵育15 min，離心。④酸放散實驗：將患者紅細胞洗滌6次，按說明書操作。放散后紅細胞可進行ABO血型正定型，Rh分型實驗。⑤自身吸收實驗：酸放散后患者紅細胞與原始血清2∶1混合，室溫孵育3 h，離心吸出上清，用于抗體鑒定或配血實驗。⑥聚凝胺法進行抗體篩選或配血實驗，按說明書操作。

2 結 果

2.1 2例患者ABO正反定型不相符，直抗4+，鹽水法抗篩實驗4+（37 ℃凝集不減弱），經酸放散、自身吸收后，ABO正反定型一致，直抗+，抗篩實驗+，結果見表1。

2.2 11例患者抗篩實驗抗人球卡法均全凝集，3個篩選細胞凝集強度無差異，經自身吸收后，鹽水法無特異性，抗人球卡法檢出5例IgG意外抗體，結果見表2。

表1 2例患者ABO血型、RhD血型鑒定

表2 5例患者檢出IgG意外抗體

2.3 直抗（IgG+C3）凝集強度與發生溶血的相關性見表3。

表3 直抗（IgG+C3）凝集強度與發生溶血的相關性

3 討 論

自身抗體分冷反應性抗體和溫反應性抗體，冷抗體在室溫下凝集，37 ℃凝集減弱或消失，加溫是消除冷抗體干擾的快捷方法。比較難處理的是溫抗體，它在37 ℃有活性，多數同時存在冷抗體，有時會混合意外抗體，給輸血帶來較大風險。掌握檢測溫自身抗體血清學方法的臨床意義在于輸血前的前瞻性處理（如ABO血型不合，不相容性配血），以及評估患者可能溶血的風險。

所有配血標本已37 ℃水浴排除冷抗體，筆者共篩選出11例溫自身抗體。其中2例直抗強陽性，抗篩實驗鹽水法4+，37 ℃孵育凝集不減弱，ABO無法定型，需用酸放散剝離致敏紅細胞上的IgM和IgG抗體，做正定型，吸收自身抗體做反定型，才能正確進行ABO血型鑒定。酸放散的效率比熱放散高，且對紅細胞破壞少，是國外排除直抗強陽性干擾的常用方法［2］。

溫自身抗體有時會表現出特異性凝集（絕對特異性或相對特異性），大部分針對Rh血型系統抗原，而相對特異性抗體則不能鑒定特異性［3］。本文檢出5例意外抗體，系與自身抗體同時出現，自身吸收后鑒定3例Rh系統抗體，1例Kidd系統抗體，1例抗體特異性待定，效價都不高（1～4），如不做自身吸收實驗，很可能漏檢。

溫自身抗體大多數是多特異性IgG抗體，有時相伴IgA和IgM抗體，補體C3也時常相伴，可在直抗分型實驗中檢出。存在溫抗體的患者經常伴有溶血，及時判斷溶血發生對臨床治療意義重大。Christine報道直抗2+以上，對應的溶血發生的預測值＞50%，可認為溶血可能性增高［4］。本文6例直抗強度3+以上，預測值＞50%，已通知臨床密切監測溶血可能性。

溫自身抗體患者多數有輸血史，可能免疫產生意外抗體，這種自身抗體與意外抗體同時出現的不相容性配血，實驗難度比較大。筆者結合多年工作實踐，提出溫自身抗體安全配血的三級保障體系。第一級是常規配血，可處理效價低的溫抗體干擾，采用凝聚胺法抗體篩選和配血，主側管凝集強度不強于自身對照管，且凝集強度不大于2+，可以輸血。第二級是供者RH血型分型與患者完全相同，對于多次輸血患者尤其必要，因為意外抗體多見Rh血型抗體［4-5］，本文11例患者均采用Rh同型輸血。第三級是建立患者輸血信息管理模塊，收集患者血型資料，包括RH血型，

Kidd血型，Kell血型，Duffy血型，MNPS血型等等，當多次輸血產生多個意外抗體或無法鑒定抗體特異性時，盡可以輸注與患者同型的紅細胞。

［1］ Chapman JF，Forman K，Kelsey P，et al.Guidelines for pre-transfusion compatibility procedures in blood transfusion laboratories［J］. Trans Med，1996，6（3）:273-283.

［2］ 中華人民共和國衛生部.中國輸血技術操作規程?血站部分［M］.天津:天津科學技術出版社，1997:83.

［3］ 向東，劉曦，王健蓮，等.紅細胞溫自身抗體的血清學特點分析及配血對策［J］.中國輸血雜志，2008，21（12）:924-926.

［4］ Christine A，Wheeler MD，Loni C，et al.Warm Reactive Autoantibodies Clinical and Serologic Correlations［J］.Am J Clin Pathol，2004，122（Suppl）:680-685.

［5］ 戴凱.自身溫抗體的特異性及其對交叉配血試驗的影響［J］.中國醫藥指南，2013，11（28）:392-393.

Analysis of Serologic T est of 11 Patients with Warm Autoantibodies

ZHONG Jun-jie1， LI Zhong-ting1， SU Hui-lan1， LI Jiao2， XIA Quan-you2， LIAO Zhong3
（1 Shunde District New Rongqi Hospital of Foshan， Foshan 528303， China； 2 Shunde District Central Blood Stations of Foshan， Foshan 528300，China； 3 Shunde District Guizhou Hospital of Foshan， Foshan 528305， China）

Objective To master the serological characteristics of warm autoantibodies， looking for reasonable and effective serological detection method. Methods We analyzed the serological test results of 11 cases with warm autoantibodies， and established the unconformity of ABO forward grouping and reverse grouping， screening other accidental antibodies mixed with the auto antibodies. Results We checked out 2 cases of unconformity， 5 cases of the unexpected antibodies， including 1 case which can't be identified the specificity. Conclusion Acid elution test can reduce the interference by strong positive DAT to ABO forward grouping； the absorption experiment can reduce the interference by autoantibodies both to ABO reverse grouping and accidental antibodies. Level 3 security systems can be applied to match blood for the patients with warm autoantibodies.

Warm autoantibody； Auto； Direct antiglobulin test（DAT）； Serological

R457.1

B

1671-8194（2015）13-0160-02