高效液相色譜法測定琥珀酸亞鐵片的含量均勻度及溶出度*

竇金鳳，邵吉，劉源，胡安青

（江蘇省鎮江市藥品檢驗所，江蘇鎮江212003）

高效液相色譜法測定琥珀酸亞鐵片的含量均勻度及溶出度*

竇金鳳，邵吉，劉源，胡安青

（江蘇省鎮江市藥品檢驗所，江蘇鎮江212003）

目的建立測定琥珀酸亞鐵片中Fe2+含量均勻度及溶出度的高效液相色譜（HPLC）法。方法色譜柱為Agilent TC-C18柱（250mm× 4.6 mm，5μm），流動相為0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40），檢測波長為215 nm。結果Fe2+物質的量濃度在1.62～16.16 mmol/L范圍內與峰面積呈良好線性關系，平均回收率為98.94%，RSD=1.08%（n=6）。結論該方法操作簡便、結果準確，可用于琥珀酸亞鐵片的質量控制。

琥珀酸亞鐵片；高效液相色譜法；含量均勻度；溶出度

琥珀酸亞鐵片是補鐵的常用制劑，具有補充鐵元素和糾正缺鐵性貧血的作用，用于缺鐵性貧血的預防和治療。該制劑質量標準是用氧化還原滴定法測定其Fe2+的含量，對其含量均勻度未測定。本研究中參考文獻［1-5］采用高效液相色譜（HPLC）法測定琥珀酸亞鐵片含量均勻度及溶出度，現報道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695型高效液相色譜儀；3-Star型精密pH計；AG245型天平。琥珀酸亞鐵片（金陵藥業股份有限公司南京金陵制藥廠，批號分別為110904，110801，111105）；琥珀酸對照品（國產分析純，含量不低于99.8%）；試驗用水為純化水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統適用性試驗

色譜柱：Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40）；檢測波長：215 nm；流速：1.0mL/min；柱溫：25℃；進樣量：20μL。理論板數按琥珀酸計不低于5 000，琥珀酸與相鄰雜質峰之間的分離度大于1.5，色譜圖見圖1。

2.2 溶液制備

精密稱定琥珀酸對照品0.381 5 g，置100mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，制成質量濃度為32.31mmol/L的琥珀酸對照品貯備液；精密量取貯備液3mL，置10mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，即得對照品溶液。

取琥珀酸亞鐵20片，除去薄膜衣后精密稱定，研細，精密稱取約2片量的樣品粉末置100 mL容量瓶中，加適量流動相，超聲處理20 min，用流動相稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液。

2.3 方法學考察

干擾試驗：按處方取其他原輔料，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液，照擬訂色譜條件分別進樣測定。結果其他輔料對測定無干擾（見圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：精密取琥珀酸對照品貯備液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分別置10mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，得質量濃度不等的系列對照溶液，分別取系列對照溶液各20μL進樣測定。以質量濃度（X）為橫坐標、峰面積（Y）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程Y=138 608X-3 369.9，r=0.999 9（n=6）。結果表明，琥珀酸質量濃度在1.62～16.16mmol/L范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液（9.69 mmol/L）20μL，連續進樣5次，依法測定。結果琥珀酸亞鐵峰面積的RSD=0.40%（n=5），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一批（批號為110904）樣品，依法制備5份供試品溶液并依法進樣測定含量。結果的RSD=0.90%（n=5），表明方法重復性良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于配制后0，2，4，6，8，12 h時依法進樣測定。結果的RSD=0.40%（n=6），表明供試品溶液在12 h內基本穩定。

加樣回收試驗：稱取已知含量的同批樣品（批號為110904）6份，每份約0.2 g，精密稱定，分別加入琥珀酸對照品，依法測定，并計算回收率，結果見表1。

表1 琥珀酸加樣回收試驗結果（n=6）

2.4 含量均勻度測定

取本品1片，置乳缽中，研細，加流動相適量，并分次轉移至50mL容量瓶中，超聲20min，放冷，用流動相稀釋至刻度，0.45μm微孔濾膜過濾，得供試品溶液，依法進樣測定。結果見表2。

表2 樣品含量均勻度測定結果（%）

2.5 溶出度測定

采用2010年版《中國藥典（二部）》附錄溶出度測定法（第三法），以稀鹽酸24mL加水至1 000mL為溶劑，取200mL，轉速為100 r/min，溫度為37.0℃，分別于5，10，20，30，45，60min時取溶液適量，濾過，續濾液作為供試品溶液，依法進樣測定，繪制溶出曲線。見圖2。攪拌槳轉速對照品溶出量測定結果見表3。

3 討論

圖2 溶出度測定結果圖

表3 攪拌漿轉速對樣品溶出量的影響（%）

該方法只能測定與琥珀酸根結合的亞鐵，不能用于測定總的亞鐵含量。由于琥珀酸亞鐵片中Fe2+的含量較少，故建議進行含量均勻度檢查，不同批次間的結果存在差異。本研究結果顯示，流動相的pH對峰形影響較大。琥珀酸亞鐵在各種亞鐵鹽中吸收率較好，是琥珀酸亞鐵片的主要有效成分。琥珀酸亞鐵中琥珀酸根離子與Fe2+的摩爾比為1∶1，本研究中采用HPLC法測定琥珀酸根離子的量即可計算與琥珀酸結合的Fe2+含量，對控制琥珀酸亞鐵片的生產工藝，確保其主要成分的含量，有一定應用價值。

由于琥珀酸亞鐵片中Fe2+的含量較少，故采用《中國藥典（二部）》中第三法（小杯法）測定其溶出度，以提高其準確度。根據試驗數據，溶出的轉速以100 r/min為宜，取樣時間為60min。

［1］郭小潔.HPLC法測定鹽酸特拉唑嗪膠囊溶出度［J］.中國藥品標準，2005，6（2）：8-11.

［2］李曉燕，冉曉靜.HPLC法測定復方對乙酰氨基酚片中對乙酰氨基酚、乙酰水楊酸及咖啡因的含量［J］.藥物分析雜志，2008，28（5）：801-803.

［3］鄭艷彬，印杰，陸威.同廠家那格列奈片的溶出度比較［J］.中國藥師，2009，12（11）：1 678-1 679.

［4］闞淑玲，屠錫德，劉建平.琥珀酸亞鐵胃內滯留漂浮型緩釋片的制備及體外釋放度研究［J］.藥學與臨床研究，2009，17（2）：89-92.

［5］李鶯，吳燕，劉麗平，等.自制與進口鹽酸左西替利嗪片溶出度比較［J］.中國藥業，2012，21（21）：8-9.

Determination of Content Uniform ity and Dissolution in Ferrous Succinate Tablets by HPLC

Dou Jinfeng，Shao Ji，Liu Yuan，Hu Anqing
（Zhenjiang Institute for Drug Control，Zhenjiang，Jiangsu，China 212003）

Objective To establish an HPLC method for the determination of content uniformity and dissolution of Fe2+in Ferrous Succinate Tablets.Methods An Agilent TC-C18column（250 mm×4.6 mm，5μm）was used.The mobile phase consisted of 0.05mol/L KH2PO4（pH=2.40），and the detective wavelength was at 215 nm.Results The linear concentration ranges of Fe2+was 1.62～16.16 mmol/L.The average recoveries were 98.94%and RSD=1.08%（n=6）Conclusion The method is simple and accurate and can be used to control the quality of Ferrous Succinate Tablets.

Ferrous Succinate Tablets；HPLC；content uniformity；dissolution

R927.2；R973+.3

A

1006-4931（2015）22-0116-02

2014-09-30；

2015-03-20）

*江蘇省鎮江市科技支撐計劃項目，項目編號：FZ20130332。