黃丹膠囊對糖尿病腎病模型大鼠的治療作用

田濤，鄧麗，王紅宇

（1.中國人民解放軍成都軍區78491部隊業務處，四川成都610017；2.中國人民解放軍成都軍區成都藥材供應站，四川成都610017；3.中國人民解放軍成都軍區聯勤部藥檢所，四川成都610017）

黃丹膠囊對糖尿病腎病模型大鼠的治療作用

田濤1，鄧麗2，王紅宇3

（1.中國人民解放軍成都軍區78491部隊業務處，四川成都610017；2.中國人民解放軍成都軍區成都藥材供應站，四川成都610017；3.中國人民解放軍成都軍區聯勤部藥檢所，四川成都610017）

目的探討黃丹膠囊對糖尿病腎病（DN）模型大鼠血糖和腎功能的影響。方法采用高脂飼料加注射STZ法制備的DN大鼠模型，按血糖水平將模型大鼠隨機分為模型組（A組），安博維組（B組），黃丹膠囊高、中、低劑量組（C1，C2，C3組）和正常對照組（D組），每組10只。D組與A組給予等量蒸餾水，均灌胃給藥，連續30 d。末次給藥后，收集大鼠24 h尿液并檢測24 h尿蛋白定量（Upro），采血測定空腹血糖、血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr），并取腎臟稱重并計算腎臟系數。結果C1，C2，C3組腎臟系數、24 h Upro、血糖水平和BUN較A組顯著降低（P<0.05）。C1及C2組24 h尿量較A組顯著降低（P<0.05）。C1組24 h Upro較A組顯著降低（P<0.05）。結論黃丹膠囊對DN大鼠有較好的治療作用，黃丹膠囊能顯著降低模型大鼠血糖、腎臟系數、尿量、尿蛋白、BUN及Scr水平。

黃丹膠囊；糖尿病腎病；腎功能；大鼠

糖尿病腎病（DN）是糖尿病嚴重的并發癥，已成為影響患者壽命及生活質量的主要原因。現代醫學治療DN療效不夠理想，而中醫藥多靶點治療的特點在DN的治療上得到了充分的發揮。筆者觀察了我院自制制劑黃丹膠囊對實驗性DN大鼠血糖和腎功能的影響，為該藥的進一步開發和利用提供可靠的試驗及理論依據。現報道如下。

1　材料與方法

1.1動物、試藥及儀器

清潔級雄性SD大鼠90只，體重250 g（上海斯萊克實驗動物有限責任公司，合格證號為SCXK<滬>2007-0005）。均以高脂飼料配方飼養：基礎飼料84.5%、蛋黃粉10%、豬油5%、膽酸鈉0.5%。黃丹膠囊（自制制劑，由黃芪、丹參、白術、茯苓、山藥、川芎、熟地黃、澤瀉、山茱萸組方，批號為20150212）；鏈脲佐菌素（STZ，美國Sigma公司，批號為2014/08）；安博維（賽諾菲<杭州>制藥有限公司，批號為20141102）。血糖測試盒（四川邁克科技股份有限責任公司，批號為20141027）；考馬斯亮藍試劑盒（南京建成科技有限公司，批號為20140924）；血尿素氮試劑盒（BUN，南京建成科技有限公司，批號為20150126）；肌酐試劑盒（南京建成科技有限公司，批號為20141216）。UV-2204型紫外可見分光光度計（上海普析儀器有限公司）；強生血糖儀穩豪倍易型（美國強生公司）；Olympus-2000型全自動生化分析儀（日本Olympus公司）。

1.2方法

DN模型的建立：大鼠適應性飼養1周，D組10只，其余80只大鼠均以高脂飼料配方飼養［1］：6周后，腹腔注射STZ（35mg/kg）制備的DN大鼠模型。血糖≥16.0 mmol/L，24 h尿量≥80 mL， 24 h尿蛋白定量（Upro）≥30mg視為造模成功。

分組：選擇造模成功大鼠50只，按血糖水平隨機分為A組，B組（30mg/kg），C1，C2，C3組（生藥30，15，7.5 g/kg），D組與A組給予等量蒸餾水，灌胃給藥，連續30 d。

檢測指標：灌胃期間，觀察各組體毛、呼吸，每周稱體重，并根據體重調整給藥量。末次給藥后1 d，將動物放入代謝籠中，收集大鼠24 h尿量，用考馬斯亮藍G-250法檢測Upro，并計算24 h Upro。心臟采血后，測定空腹血糖、血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）。采血后，處死大鼠，取腎臟稱重并計算臟器系數。

1.3統計學處理

2　結果

結果見表1。

表1　各組大鼠觀察指標比較（±s，n=10）

表1　各組大鼠觀察指標比較（±s，n=10）

注：與A組比較，*P<0.05，△P<0.01。

組別A組B維C1組C2組C3組D組給藥劑量30mg/kg 30 g/kg 15 g/kg 7.5 g/kg體重（g）207.02±38.81 220.23±25.87 230.39±35.44 233.79±43.24 220.23±52.31 368.52±27.43△腎臟系數（g/100 g）1.37±0.21 0.86±0.13△0.84±0.11△0.92±0.14△1.07±0.17*0.51±0.08△24 h尿量（mL）138.98±29.76 101.32±23.57△103.90±21.05△109.39±18.68*117.56±23.84 21.55±6.28△24 h Upro（mg）25.45±7.12 18.74±3.82*19.30±4.58*20.57±8.37 23.45±7.89 18.07±1.18△血糖（mmol/L）24.52±0.77 20.30±1.10△17.45±1.15△17.95±1.02△18.20±2.24△4.85±0.16△Scr（μmol/L）178.21±12.77 152.35±6.31△141.93±10.05△148.56±13.05△164.53±8.22*79.45±4.21△BUN（mmol/L）16.64±1.65 12.37±1.04△10.00±0.68△9.86±1.45△13.03±1.54△7.73±0.37△

3　討論

DN以腎小球彌漫性硬化為臨床特征，發病機制尚未完全闡明，一般認為與糖、脂代謝紊亂、腎臟局部炎癥介質表達、組織損傷等因素有關。腎臟周圍血管血流動力學及血液流變學發生改變，局部腎素-血管緊張素-醛固酮系統異常興奮，引起血管活性物質的水平升高，腎小球基底膜增厚，系膜擴張，加重腎間質炎癥反應，導致腎小球硬化，蛋白尿形成。

高血糖是糖尿病逐漸惡化為DN的前提，本實驗采用高脂喂養6周后腹腔注射STZ 35mg/kg制備的DN大鼠模型，80%以上的造模動物成功，達到血糖≥16.0 mmol/L、24 h尿量≥80 mL，24 h Upro≥30mg的建模標準。

傳統醫學將DN歸屬于“消腎”范疇，病機以“腎氣受傷”為主；病久生瘀，“血瘀”的病機貫穿于糖尿病慢性并發癥的始終；“腎虛血瘀”是DN的基本病機。黃丹膠囊由黃芪、丹參、白術、茯苓、山藥、川芎、熟地黃、澤瀉、山茱萸組方。其中黃芪大補元氣、利水消腫，功補三焦，利營衛之氣，為君藥；丹參功擅活血祛瘀、涼血消癰；白術健脾益氣、燥濕利水；茯苓健脾滲濕、利水消腫；山藥健脾胃、益肺腎、化痰涎；川芎活血化瘀；熟地黃補血滋陰，健脾益腎、氣陰雙補；澤瀉利水、清濕熱和泄熱；山茱萸滋陰補腎，培元固本；全方共奏扶正固本、益氣養陰、活血通絡、化瘀解毒、利水益腎之功。現代藥理研究表明，黃芪具有調節血糖、增強免疫、抗氧化、減少尿蛋白、保護腎臟等作用［2］；丹參具有改善血液黏度，保護心、肝、腎等作用［3］；白術具有抗衰老、免疫調節等作用［4］；茯苓具有保護胰島β細胞降低血糖、增強免疫、抗炎等作用［5］；山藥具有增加胰島素分泌、改善受損的胰島β細胞功能、改善胰島素抵抗，降低血糖等作用［6］；川芎具有降低血液黏度、保護心腦細胞等作用［7］；熟地黃具有增強造血機能、鎮靜催眠、調節免疫等作用［8］；澤瀉具有降血糖、調血脂及抗動脈粥樣硬化、抗腎結石形成、抗腎炎、利尿、免疫調節等作用［9］；山茱萸具有降血糖、抑制血小板聚集、調節免疫、抗炎等作用［10］。

本試驗結果顯示，模型組血糖上升，腎臟系數、尿量、尿蛋白、BUN及Scr均非常顯著的升高，表明模型動物的腎臟受到損傷，為典型的DN。黃丹膠囊能顯著降低模型組血糖、腎臟系數、尿量、尿蛋白、BUN及Scr水平，為治療DN提供了理論和試驗和依據。

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Huangdan Capsules for Treating Diabetic Nephropathy M odel in Rats

Tian Tao1，Deng Li2，Wang Hongyu3
（1.Operation Office，78491 Troop of PLA Chengdu Military Area Command，Chengdu，Sichuan，China 610017；2.Chengdu Medicinal Plant，PLA
Chengdu Military Area Command，Chengdu Sichuan，China 610017；3.Medicine Inspecting Institute of the Joint Logistics Department，PLA Chengdu Military Area Command，Chengdu Sichuan，China 610017）

Objective To investigate the influence of Huangdan Capsules on the blood glucose and renal function of diabetic nephropathy（DN）model rats.M ethods Using high fat feed plus STZ injection prepared DN rat model，the rats were random ly divided into groups according to the blood glucose levels：model group（group A），Aprovel group（group B），high，medium and low dose groups of Huangdan Capsules（group C1，C2，C3），and normal control group（group D），10 rats in each group.Group D and group A were given the same amount of distilled water，all gavaged for 30 d.After the last administration，the 24 h urine of rats were collected and the urine protein concentration was detected；the fasting blood glucose，blood urea nitrogen（BUN）and serum creatinine（Scr）were tested by the blood sampling；the kidney was weighted to calculate the viscera coefficient.Results The kidney coefficient index，24 h Upro，blood glucose and BUN levels of group C1，C2，C3were significantly lower than group A（P<0.05）.The 24 h urine volumes of group C1and C2were significantly reduced compared with group A（P<0.05）.The 24 h Upro of group C1was significantly reduced compared with group A（P<0.05）.Conclusion Huangdan Capsule has good therapeutic effect on diabetic nephropathy rats，can significantly reduce the levels of blood glucose，kidney coefficient index，urine volume，Upro，BUN and Src.

Huangdan Capsules；diabetic nephropathy；renal function；rats

R285.5；R286

A

1006-4931（2015）24-0122-02

2015-05-13）