王 卓
(大連市金州區第一人民醫院,遼寧 大連 116000)
幾種ASO、RF檢測方法的比較分析
王 卓
(大連市金州區第一人民醫院,遼寧 大連 116000)
目的 對比分析幾種ASO、RF檢測方法,探討檢測方法的原理、結果準確性和線性范圍。方法 利用不同方法對已知不同濃度質控血清實施檢測,利用統計學對結果實施對比分析。結果 不同檢測方法所獲結果之間所存區別比較大,在這之中,散射比濁法的準確性最佳,且其線性范圍為最大。結論 在醫院檢驗項目中,ASO檢測和RF檢測作為常見檢測項目,要想確保其檢測結果的可靠性以及準確性,所選實驗方法必須要好,從本次研究的結果來看,推薦應用免疫比濁法,若條件允許可優先采取散射比濁法。
散射比濁法;ASO;透射比濁法;RF;膠乳凝集法
在臨床上,風濕熱與類風濕性關節炎不僅是常見病,同時也是多發病[1]。在臨床檢驗項目中ASO和RF是兩個常規項目,在進行檢驗時,所選實驗方法的好壞直接關系著該病的臨床診療以及預防。當前在ASO、RF的檢測上,常用檢測方法有免疫比濁法、膠乳凝集法[2]。本文就上述這幾種檢測方法的檢測原理以及結果實施對比分析。
1.1一般資料:在本次研究中,所檢測的對象為我院檢驗科所購入的五種定值質控血清,將每一種血清劃分為25份進行測定。所用儀器有全自動生化分析儀、西門子特種蛋白儀.
1.2方法。檢測方法主要如下:①透射比濁法:當抗體和抗原于稀釋系統中發生反應時,所形成的這一免疫復合物于PEG等作用下就會形成為微粒。若抗體濃度為固定時,則免疫復合物和待測樣品中所含抗原量之間為正比。借助于其一定波長透射光變化值來進行免疫復合物量的測定,繼而獲得待測樣品抗原所含量。②散射比濁法:其監測原理和透射比濁法相同,借助于特定散射比濁儀對免疫復合物散射光值進行測定,散射光強度和免疫復合物的量為正比,即和待測樣品中所含抗原量為正比。③膠乳凝集法:該方法包被了血清中待測物質和致敏顆粒抗體反應,在肉眼下能明顯見凝集反應。在利用上述方法進行檢測時,所用試劑需達到室溫,且輕輕將其混勻,以確保檢測結果的準確性。
1.3方法精確性:在本次研究中,批內變異系數在1.83%~2.20%,批間變異系數在2.12%~2.54%,其平均回收率是102.2%[3-4]。
1.4統計學方法:在本次的實驗數據中采用的是SPSS17.0軟件來實施統計學分析,其中組間數據資料的對比采用的是t檢驗,而計數資料對比則采用的是卡方檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1ASO檢測結果:當標定值為100時,膠乳凝集法所測結果為2份陽性,23份陰性;透射比濁法所測結果為(99.2±6.3);散射比濁法所測結果為(1.3±2.7)。當標定值為200時,膠乳凝集法所測結果為12份陽性,13份陰性;透射比濁法所測結果為(187.2±9.5);散射比濁法所測結果為(198.6±4.5)。當標定值為500時,膠乳凝集法所測結果為21份陽性,4份陰性;透射比濁法所測結果為(480.9± 15.8);散射比濁法所測結果為(501.8±8.5)。當標定值為750時,膠乳凝集法所測結果為24份陽性,1份陰性;透射比濁法所測結果為(660.3±17.0);散射比濁法所測結果為(727.7±12.6)。當標定值為1000時,膠乳凝集法所測結果為20份陽性,5份陰性;透射比濁法所測結果為(830.3±29.9);散射比濁法所測結果為(922.4± 19.3)。ASO檢測結果見表1。
2.2RF檢測結果:當標定值為15時,膠乳凝集法所測結果為5份陽性,20份陰性;透射比濁法所測結果為(14.4±2.4);散射比濁法所測結果為(15.2±1.5)。當標定值為30時,膠乳凝集法所測結果為11份陽性,14份陰性;透射比濁法所測結果為(28.5±4.8);散射比濁法所測結果為(28.9±2.9)。當標定值為60時,膠乳凝集法所測結果為23份陽性,2份陰性;透射比濁法所測結果為(56.3±5.7);散射比濁法所測結果為(58.2±4.5)。當標定值為100時,膠乳凝集法所測結果為21份陽性,4份陰性;透射比濁法所測結果為(89.5±8.4);散射比濁法所測結果為(96.4±7.2)。當標定值為150時,膠乳凝集法所測結果為18份陽性,7份陰性;透射比濁法所測結果為(122.4±11.4);散射比濁法所測結果為(137.6±8.8)。其結果見表2。
通過上述數據的分析可知,不同檢測方法所獲結果之間所存區別比較大,在這之中,散射比濁法的準確性最佳,且其線性范圍為最大。
經大量實踐發現,ASO、RF檢測方法在操作上比較簡單,便于檢驗人員操作和掌握,但是容易受方面因素的干擾以及影響[5]。從本次研究的結果來看,通過上述檢測結果的分析可知,膠乳凝集法所獲結果只是半定量分析或者定性分析得到的,再加上其自身原因,很容易出現假陰性或者假陽性等現象,尤其在遇到臨界值時,很難對結果進行判斷。透射比濁法在線性檢測上比較好,于較寬范圍內所獲結果比較準確,當ASO標定值低于500,且RF標定值低于60時,該方法準確性一般于5%范圍。但在對高值進行檢測時,其結果很容易發生偏差,此時其不準確性均在10%及以上,在檢測時需對樣本進行稀釋。散射比濁法所獲結果線性較好,不管是在低值檢測上,還是中高值檢測上,有關系數均在0.97~1.00范圍內,其截距和零相接近,于較大抗原濃度的范圍區間,基本上無超標測定值。鑒于此,筆者建議在ASO檢測和RF檢測中盡量選用免疫比濁法,若條件允許可優先采取散射比濁法。
表1 ASO檢測結果 IU/mL()

表1 ASO檢測結果 IU/mL()
標定值 100 200 500 750 1000膠乳凝集法陽性 2 12 21 24 20膠乳凝集法陰性 23 13 4 1 5透射比濁法 99.2±6.3 187.2±9.5 480.9±15.8 660.3±17.0 830.3±29.9散射比濁法 1.3±2.7 198.6±4.5 501.8±8.5 727.7±12.6 922.4±19.3
表2 RF檢測結果 IU/mL()

表2 RF檢測結果 IU/mL()
標定值 15 30 60 100 150膠乳凝集法陽性 5 11 23 21 18膠乳凝集法陰性 20 14 2 4 7透射比濁法 14.4±2.4 28.5±4.8 56.3±5.7 89.5±8.4 122.4±11.4散射比濁法 15.2±1.5 28.9±2.9 58.2±4.5 96.4±7.2 137.6±8.8
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R593.21;R593.22
B
1671-8194(2015)24-0100-02