CIK細胞治療黑色素瘤肝轉移的臨床效果觀察

張勇 王子兵 趙玲娣 李威 付曉敏 王黎 高全立

(鄭州大學附屬腫瘤醫院 生物治療科 河南 鄭州 450008)

惡性黑色素瘤是來源于黑色素細胞的惡性腫瘤，多發生于皮膚，惡性程度高，易發生遠處轉移，預后差，其中肝轉移患者約占20%，生存期僅有4 個月，1年生存率為10%［1－2］。而全身治療包括化療、細胞因子治療效果不佳，有效率僅15%［3］。因此探索黑色素瘤的治療方案，提高患者的生活質量、延長生存期具有重要意義。本研究通過回顧性分析，探討CIK 治療黑色素瘤肝轉移的臨床療效，以提供臨床依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2009年6月至2011年10月在河南省腫瘤醫院生物治療科治療的10 例黑色素瘤患者。男6 例，女4 例;年齡40 ～64 歲，中位年齡51 歲。原發腫瘤部位:直腸3 例，胃1 例，頭頸部3 例;指端2例，肘部1 例。CIK 細胞治療1 ～8 周期，中位數為5周期;中位手術至肝轉移時間為12.5 個月。

納入標準為:①經河南省腫瘤醫院病理證實黑色素瘤;②均經過手術切除，術后復發出現肝臟轉移;③CIK細胞治療前具有完整臨床資料進行臨床分期;④CIK細胞治療結束后進行療效評價;⑤接受CIK 細胞治療聯合細胞因子治療;⑥患者或家屬簽署知情同意書。排除標準:①外院病理診斷為黑色素瘤未經河南省腫瘤醫院病理科會診者;②CIK 治療前無肝臟轉移者;③CIK 治療前臨床資料不全者;④CIK 治療結束后無療效評價者;⑤治療方案為CIK 細胞聯合化療或單獨化療者。

1.2 治療方案及療效評價 患者無治療禁忌，簽署知情同意書后，抽取外周血50 ml，分離出單個核細胞(MNC)，置于含γ－干擾素、白細胞介素－2(IL－2)、抗－CD3 單克隆抗體的無血清培養基中，37℃、5%二氧化碳條件下培養12 ～14 d 后收集細胞進行回輸。回輸后給予IL－2 以及胸腺肽治療5 d(IL－2 200 萬U，靜脈點滴，1 次/d，d1－5;胸腺肽(基泰)1.6 mg，皮下注射，d1和d4)。回輸CIK 細胞前不給予特殊處理;第1 周期治療結束后采集第2 周期血進行分離和培養，根據CIK 細胞培養時間不同15 ～20 d 為1 周期。

治療后每4 周期按照歐美國家腫瘤研究所實體瘤的療效評價標準1.1 版［7］進行療效評價，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩定(SD)和疾病進展(PD)。疾病進展時間(TTP)是指從CIK 細胞治療開始至PD 之間的時間間隔。總體生存期(OS)是指從CIK 細胞治療開始至患者死亡之間的時間間隔。客觀有效率(ORR)=(CR +PR)/(CR +PR +SD +PD)×100%，疾病控制率(DCR)=(CR +PR +SD)/(CR +PR+SD+PD)×100%。治療結束后每3 個月進行隨訪。不良反應評價按照歐美國家腫瘤研究所藥物毒副作用判定標準(即NCI－CTC )3.0 版進行。

2 結果

2.1 近期療效 10 例患者中，無CR 和PR 患者，SD患者8 例，DCR 為80%(8/10)。全組患者中位TTP為3 個月(1 ～11 個月)，SD 患者中位TTP 為3.5 個月(2 ～11 個月)。全組患者TTP 曲線見圖1。

2.2 生存期 中位隨訪時間為4.5 個月(1 ～13 個月)。截止至2012年1月，6 例患者死亡，4 例患者帶瘤生存，其中2 例患者疾病穩定，患者中位生存時間為4.5 個月(1 ～13 個月)。患者生存曲線見圖2。

2.3 不良反應 CIK 細胞治療過程中主要的不良反應為發熱、惡心及食欲下降，均為Ⅰ～Ⅱ度，不需特殊處理。其中發熱的發生率為30%(3/10)，惡心及食欲下降的發生率為20%(2/10)。

圖1 患者TTP 曲線

圖2 患者生存曲線

3 討論

黑色素瘤惡性程度高，常規放化療療效不佳，嘗試抗腫瘤免疫的生物治療模式進行治療。既往的生物治療包括腫瘤疫苗、白細胞介素、LAK 細胞、干擾素等，均因抗原性差或特異性弱，不能有效誘導或激活宿主腫瘤免疫。CIK 細胞是體外擴增出的以CD3+CD56+、CD3+CD8+為主的異質性細胞群，該細胞群是從外周血、骨髓或臍血中分離出的單個核細胞，在多種細胞因子存在的條件下，經過一定時間培養而獲得的一種免疫活性細胞，能分泌多種細胞因子，具有強大的腫瘤殺傷活性，研究已表明CIK 細胞對多種腫瘤細胞具有殺傷作用［4－5］。IL－2 是活化T 淋巴細胞或NK 細胞產生的細胞因子，可誘導淋巴因子激活的殺傷細胞和CIK 細胞的增殖，增強其殺傷活性。IL－2 配合免疫治療已成為常規治療，本研究應用IL－2 200 萬U，1 次/d，d1－5靜脈點滴增強CIK 細胞活性，以確保治療的療效。

本研究中10 例術后復發出現肝轉移的黑色素瘤患者，采用CIK 細胞為主的生物治療，其中8 例患者獲得SD，DCR 為80%，高于國內報道22 例肝轉移患者生物化療DCR42.1%［6］，考慮此種差異主要是因為病例數少所致。治療過程中無嚴重的、不可耐受的不良反應發生，說明CIK 細胞治療是安全的，少數患者出現低熱、食欲下降考慮與回輸的CIK 細胞中含有人血白蛋白和IL－2，或者CIK 細胞回輸后大量細胞因子釋放作用于中樞神經系統導致體溫調定點上調所致。

本研究中10 例患者中位TTP 為3 個月，中位OS為4.5 個月，與文獻報道相一致［1］。10 例患者中除1例僅存在肝臟轉移外，其余9 例合并多處肝外轉移，可能是免疫治療療效不佳的原因，也可用來解釋為何10例患者中無CR 和PR 病例，但有延遲OS 的趨勢。

總之，CIK 細胞治療具有肝轉移的黑色素瘤患者，不良反應小，耐受性好，可明顯改善患者的疾病控制率，OS 有延長趨勢，是一種具有良好前景的治療模式。

［1］Rass K，Diefenbacher M，Tilgen W.Experimental treatment of malignant melanoma and its rationale［J］.Hautarzt，2008，59(6):475－483.

［2］Bedikian A Y，Legha S S，Mavligit G，et al.Treatment of uveal melanoma metastatic to the liver:a review of the M.D.Anderson Cancer Center experience and prognostic factors［J］.Cancer，1997，6(9):1665－1670.

［3］Rastrelli M，Tropea S，Pigozzo J，et al.Melanoma m1:Diagnosis and Therapy［J］.In Vivo，2014，28(3):273－285.

［4］Yu X，Zhao H，Liu L，et al.A randomized phase II study of autologous cytokine－induced killer cells in treatment of hepatocelluar carcinoma［J］.J Clin Immunol，2014，34(2):194－203.

［5］Liu L，Zhang W，Qi X，et al.Randomized study of autologous cytokineinduced killer cell immunotherapy in metastatic renal carcinoma［J］.Clin Cancer Res，2012，18(6):1751－1759.

［6］崔傳亮，遲志宏，袁香慶，等.淋巴細胞刪除性化療聯合自體CIK細胞回輸治療進展期黑色素瘤肝轉移Ⅱ期臨床研究［C］.中國臨床腫瘤學教育專輯，2007:534－540.